1. TOIT JA SELLE TÄHTSUS Iga toiduaine, mis turule jõuab, peab olema tarbijale ohutu ning vastama kvaliteedi-
nõuetele. Selle tagamiseks on välja antud vastavad õigusaktid. Nõuded, millele
turustamisotstarbeline toidutoore ja toit peavad vastama, on järgmised.
1. Toit peab olema ohutu inimese tervisele.
2. Toidus ei tohi olla selle omadusi halvendavaid või inimese tervist ohustavaid
parasiite, kahjureid ega võõrkehi.
3. Keelatud on käidelda riknenud, saastunud või mikrobioloogilistele nõuetele
mittevastavat toidutooret ja toitu.
4. Toit peab vastama seda iseloomustavatele koostis- ja kvaliteedinõuetele.
5. Loomsele toidule esitatavad erinõuded: 1) värskena müüdav või muul viisil üle
antav liha peab olema veterinaarkontrolli tulemusel
tunnistatud toidukõlblikuks,
mida tõendatakse veterinaartõendiga; 2) loomset toidutooret ja toitu on keelatud
kasutada, kui loomale on manustatud ravimit, ravimitaolist või hormonaalse
toimega ainet ja kui nende kasutamise järgne keeluaeg ei ole möödunud.
Toidualased õigusaktid esitavad nõuded ka eritoidule, uuendtoidule ja toidu-
lisandile.
Eritoiduna käsitatakse toitu, mis on mõeldud seedeprotsessi või ainevahetuse
kõrvalekallete või füsioloogilise seisundi tõttu tavapärasest erinevate
toitumis -
vajadustega inimestele ning mis on seetõttu valmistatud eritehnoloogiat kasutades
või millel on tavatoidust erinev koostis. Eritoidud on näiteks imiku ja väikelapse
piimasegud ja -toidud, dieettoidud,
sportlaste ja diabeetikute toidud jne. Nende
maaletoomiseks ja/või turustamiseks on vaja taotleda käitlemisluba. Käitlemisluba
peavad
taotlema kas valmistajad, pakendajad või
importijad .
Uuendtoit on toit, mida ei ole varem ulatuslikult toiduna kasutatud ning:
mis sisaldab geneetiliselt muundatud organisme või koosneb neist (näiteks mais,
mille ühe valgu aminohappelist koostist on insenergeneetiliselt muudetud;
geenide siirdamise eesmärkideks võivad olla näiteks nii taime
muundamine taimekahjuritele resistentseks kui ka toidu toiteväärtuse tõstmine);
mis on saadud geneetiliselt muundatud organismidest, kuid ei sisalda neid. Siin
võib näiteks tuua geneetiliselt muundatud
rapsist valmistatud toiduõli või
suhkru, mis on saadud herbitsiiditolerantsest geneetiliselt muundatud suhkrupee-
7
dist. Siinkohal on geneetilist muundamist kasutatud organismi puhul, millest
toode saadakse; geneetiline muundamine annab sellele organismile juurde kasu-
likke omadusi (näiteks tõstab saagikust), aga ei tekita muudatusi toiduks
kasutatavas tooraines;
mis on uue või tahtlikult muudetud esmase molekulaarstruktuuriga. Need on
näiteks uued magusained või rasvaasendajad. Ameerika Ühendriikides on juba
mõnda aega kasutatud rasvavaba rasvaasendajat nimega
olestra; see sisaldab
rasvhappeid ja suhkrut, mida inimese organism ei ole võimeline absorbeerima
ning seetõttu ei anna ka mingit energiat. Kui olestra tuuakse turule Euroopa
Liidu riikides, siis kuulub ta oma esmase molekulaarstruktuuri tõttu uuendtoidu
alla;
mis koosneb või on eraldatud mikroorganismidest, seentest või
vetikatest või on
valmistatud varem ulatuslikult kasutamata toidutoormest. Nende hulka kuuluvad
näiteks
eksootilised seened, mükoproteiinid või mikroobidest pärinevad
valgud ,
millest varem pole toitu valmistatud, samuti kuuluvad siia alla eksootilised
puuviljad , kalad vms; mõnes teises maailmaosas on selliseid toite võib-olla
tarbitud
aastasadu , kuid et Euroopas on nad siiani olnud tundmatud, siis kuulu-
vad need uuendtoidu hulka. Nende ohutuse analüüsil tuleb kindlasti arvestada ka
ohutu tarvitamise kogemust väljaspool Euroopat;
mille valmistamiseks kasutatakse tavapärasest erinevat tehnoloogiat, mis põhjus-
tab toidu struktuuri olulisi, toiteväärtust või ebasoovitavate ainete sisaldust või
inimese ainevahetust mõjutavaid muutusi. Uuendprotsesside alla võivad kuuluda
näiteks rõhu all pastöriseerimine traditsioonilise kuumutamise asemel, uut tüüpi
kuumutamine , mittetermilised säilitusmeetodid, uus jahutus- või külmutusviis
või dehüdreerimise protsess ja ensüümide rakendamine. Vastavalt uuendtoidu
määrusele loetakse lõpptoodet uuendtoiduks ainult juhul, kui see töötlemisviis
põhjustab muutusi toidu keemilises koostises, mis mõjutab ta toiteväärtust, me-
tabolismi või soovimatute ainete
esinemist . Uuendprotsessi ohutust analüüsi-
takse üksikjuhtumite kaupa.
Uuendtoit peab olema nõuetekohane, ta ei tohi eksitada tarbijat ega erineda asenda-
tavast toidust määral, mis muudab uuendtoidu tarbijale toiteväärtuselt ja
omasta -
tavuselt ebasoodsamaks. Uuendtoitude maaletoomiseks ja/või turustamiseks on
vaja taotleda käitlemisluba.
Toidulisand on
toitaine või toitainete segu, mis ei kuulu ravimite ega ravimi-
sarnaste ainete hulka ning mida lisaks toidule kasutatakse organismi toitaine-
vajaduse rahuldamiseks. Toidulisandid on
vitamiinid ,
mineraalained ,
aminohapped ,
asendamatud
rasvhapped , kiudained, taimsed ja loomsed ekstraktid, taimede
värsked või kuivatatud osad ja teised sedalaadi ained.
Kõik toiduained koosnevad omakorda põhitoitainetest, mida organism omastab.
Need on valgud,
rasvad , süsivesikud, mineraalained, vesi ja vitamiinid. Toitumine
on organismi eluline vajadus. Elusorganismis töötavad
alaliselt vereringe - ja
seede -
elundid, närvid ja lihased. Kõigeks selleks on tarvis energiat. Et kõik eluks vajali-
kud protsessid kulgeksid normaalselt, peavad organismi hävinenud
rakud ja koed
8
pidevalt asenduma uutega ning kulutatud energia taastuma. Materjaliks, mille arvel
toimub rakkude uuenemine, on toit.
Toit on ka allikaks, millest organism saab vajaliku energia normaalse kehatempe-
ratuuri säilitamiseks ja meie keha mitmesuguste elundite tegevuseks. Toit on üks
olulisemaid tegureid, millest oleneb noore inimese kasv ning täiskasvanu tervislik
seisund ja töövõime.
Toiduained jagunevad põhiliselt kahte liiki:
1) taimse päritoluga toiduained: leib, puu- ja köögivili jne, mis annavad organis-
mile peamiselt süsivesikuid;
2) loomse päritoluga toiduained: liha, piim, kala jne, mis annavad täisväärtuslikke
valke ja rasvu.
Valgud. Valgud täidavad organismis mitmeid funktsioone: nad on struktuurseks
materjaliks
kehavalkude sünteesil, osalevad aktiivselt antikehade tootmises ja
immuniteedi kujunemises nakkushaiguste suhtes, neil on ka katalüüsiv ja regulee-
riv roll, samuti võimaldavad erinevate ühendite transpordi. Toiduvalkude bioloogi-
line väärtus sõltub nende aminohappelisest koostisest. Aminohapped jagatakse
asendatavateks ja asendamatuteks, neist viimaseid organism ise ei tooda ja
sellepärast tuleb neid saada toiduga. Valgud, mis sisaldavad kõiki
aminohappeid organite ja kudede valkude sünteesiks, on täisväärtuslikud valgud. Nad sisalduvad
loomsetes
toiduainetes : piimas, lihas, munades,
kalas . Nende valkude omastatavus
on kõrge, ligikaudu 90%. Taimsetes toiduainetes leiduvad valgud ei sisalda kõiki
asendamatuid aminohappeid või sisaldavad neid ebapiisavas koguses. Seepärast
nimetatakse neid mittetäisväärtuslikeks. Nende omastatavus on väiksem, ligikaudu
60%. Valgud peaksid andma toiduga saadavast energiast 10–15%. Tasakaalustatud
toitumise tagamiseks peab toit sisaldama piisavas koguses nii loomse (50%) kui ka
taimse (50%) päritoluga valke. Sellise toiduratsiooni juures rikastatakse toitu ka
teiste komponentidega: lipiidide, süsivesikute, mineraalainete ja vitamiinidega.
Valkude või mõne aminohappe
defitsiidi korral toidus pidurdub lastel kasv ning
täiskasvanutel väheneb lihasmass, samuti väheneb vastupanuvõime
nakkushaigus -
tele. Tõuseb vastuvõtlikkus respiratoorsete ja
seedetrakti haiguste suhtes. Valgu-
vaese toidu puhul aeglustub
vereloome . Ilmneda võivad häired kesknärvisüsteemi
talitluses. Lastel aeglustub psühhomotoorne ja intellektuaalne areng. Valkude liig-
tarbimise korral esinevad häired antikehade moodustamises, langeb organismi
resistentsus nakkushaiguste suhtes. Samuti mõjutab valkude liigsus neerude eritus-
funktsioone, mille tagajärjel ainevahetuse lõpp-
produktid erituvad organismist
puudulikult. Tõuseb ka allergiliste haiguste
esinemissagedus . Toidu suure valgu-
sisalduse puhul täheldatakse kaltsiumi peetust organismis, mis põhjustab lapse
luustiku ülemäärast mineraliseerumist. Valkude allikad on peaaegu kõik töötlemata
toiduained. Loomsete valkude allikateks on põhiliselt liha, piim ja munad ning neid
loetakse väga headeks nii kvaliteedilt kui ka kvantiteedilt. Taimsetest valgu-
allikatest on
kaunviljad head nii valkude kvaliteedilt kui ka kvantiteedilt.
Kartul sisaldab küll suhteliselt palju valku, kuid seda ei peeta eriti kvaliteetseks. Tera-
viljatooteid, puu- ja juurvilju eriti headeks valguallikateks ei loeta. Soovitav on
erinevate valguallikate kombineerimine, mis annab parima efekti.
9
Rasvad. Lipiidideks on rasvhapped, triglütseriidid,
fosfolipiidid , glükolipiidid,
steroolid (kolesterool).
Lipiidid sisaldavad rasvlahustuvaid vitamiine.
Terminit “rasvad” kasutatakse triglütseriidide kohta, mis koosnevad kolmest rasvhappe-
molekulist ning glütseroolist. Rasvad sisaldavad kolme tüüpi (küllastunud,
mono -
ja polüküllastumata) rasvhappeid. Loomsetes rasvades on ülekaalus küllastunud
rasvhapped, taimsetes õlides mono- ja polüküllastumata rasvhapped. Rasvade
põhiülesandeks on energia
katmine ning säilitamine, nad on ka asendamatute
polüküllastumata rasvhapete ja rasvlahustuvate vitamiinide allikaks. Fosfatiidid
kuuluvad kõikide kudede ja rakkude koostisesse,
suuremal hulgal on neid
närvikoes ja ajurakkudes. Rasvad võtavad osa kasvuprotsesside ja muu elutegevuse
reguleerimisest. Uuemad soovitused pakuvad rasvade osatähtsuseks toiduenergiast
30%. Selleks tuleks kasutada toiduks vähese rasvasisaldusega toiduaineid, tõsta
teraviljatoodete, puu- ning juurviljade tarbimist ehk toituda toidupüramiidi silmas
pidades. 30% nõue ei kehti alla kahe aasta vanuste laste puhul, kuid alates viiendast
eluaastast oleks see kindlasti soovitav. Rasvade protsent ei tohi aga langeda alla
20–25, sest siis võib muutuda raskendatuks nõutava koguse asendamatute rasv-
hapete (linool- ja
linoleenhappe – ei sünteesita organismis, tuleb kindlasti saada
toiduga) ning rasvlahustuvate vitamiinide saamine. Linool- ja
linoleenhape peaksid
andma 3–10% koguenergiast. Linoolhappe nõutav kogus on suurem kui linoleen-
happel. Linoleenhapet ja pika süsivesiniku ahelaga polüküllastumata rasvhappeid
peab saama vähemalt 0,5% päevasest energiast.
Süsivesikud. Süsivesikud on organismi põhiliseks energiaallikaks, nad kuuluvad
rakkude ja kudede koostisesse; vere erütrotsüütide koostises määravad veregrupi
ning kuuluvad ka rea hormoonide koostisesse. Toidus esinevad süsivesikud mono-
sahhariidide (glükoos,
fruktoos ), disahhariidide (
sahharoos ,
laktoos ,
maltoos ) ning
polüsahhariididena. Polüsahhariidid jagunevad tärkliseks ja mittetärkliselisteks
(kiudaine) polüsahhariidideks. Tasakaalustatud toidu puhul moodustub põhilisest
osast verre sattunud glükoosist energia, mida rakud kasutavad oma elutegevuses.
Ligikaudu kolmkümmend protsenti glükoosist muudetakse neutraalrasvaks ja
rasvhapeteks, ligikaudu kolmest protsendist moodustub glükogeen, mis ladestub
maksas ja lihastes. Süsivesikud peaksid andma ligi 60% päevasest energiast. Süsi-
vesikute defitsiidi korral muudetakse organismis talletunud rasv energiaks, mille
käigus eralduvad
ketokehad ning see võib põhjustada ketoosi. Glükoosi ning
fruktoosi on põhiliselt puuviljades ja mees, sahharoosi leidub roo- või
peedi -
suhkrus, aga ka melassis, vahtrasiirupis ning osas puuviljades. Maltoosi leidub
teraviljaidudes, laktoosi ehk piimasuhkrut sisaldavad
piimatooted . Tärkliserikkaks
toiduaineks on kartul.
Mineraalained. Mineraalained on vajalikud luude ja teiste kudede moodusta-
miseks ning ainevahetuse reguleerimiseks. Nad aitavad säilitada hapete ja leeliste
tasakaalu organismis.
Kaltsium täidab struktuurseid funktsioone, kuuludes organismi
luukoe ja teiste
kudede koosseisu, tal on oluline roll kudede ainevahetuses: ta kindlustab vere-
soonte seinte normaalse läbilaskvuse, aidates toitainetel läbida rakuseinu, on akti-
veerijaks vere hüübimissüsteemis, madaldab vererõhku ja vere kolesterooli taset,
10
on vajalik neerude normaalseks funktsioneerimiseks, normaliseerib kesknärvi-
süsteemi ja lihaste ärrituvust, kuulub raku fermentide koosseisu, tasandab südame
rütmi, vähendab unetust. Kaltsiumi imendumist soodustavad laktoos ja
vitamiin D.
Imendumist halvendavad kiudaineterikas toit, lipiidide ainevahetuse häired,
keedu -
sool,
tsitruselised , sahharoos, äädikas ja toidu suur foolhappesisaldus. Kaltsiumi
defitsiidi korral võivad ilmneda: käte ja jalgade spasmid ja krambid, luude pehme-
nemine ja hõrenemine (
osteoporoos ), luude
haprus , hammaste
lagunemine , depres-
sioon . Suured kaltsiumikogused võivad viia tasakaalust välja mineraalainete oma-
vahelise soovitava suhte organismis. Kõige hinnalisemateks, s.o kõige kergemini
omastatavateks kaltsiumi allikateks on piim ja piimatooted (juust, kohupiim).
Kaltsiumi on palju ka kuivatatud ubades, brokolis. Oksalaadirikastest toiduainetest
(
spinat ) saadav kaltsium on tavaliselt halvasti omastatav.
Fosforit leidub igas rakus. Ta osaleb hammaste ja luude ülesehituses, energia
vabastamises toidust, geneetilise materjali ülesehitamises, rakumembraanide ja
ensüümide moodustamises. Organismi Ca-P tasakaal peab olema 2:1. Fosfori-
vaegust esineb ülimalt harva.
Naatrium asub valdavalt rakkude väliselt: vereplasmas, rakkudevahelises vedeli-
kus, lümfis. Seal on Na+ umbes 8–20 korda rohkem kui rakus.
Kaaliumi on aga
rakus 30–50 korda rohkem kui rakuvälises
vedelikus . Naatriumi ja kaaliumi koos-
töö on hädavajalik, sest nende erinev
jaotumine raku sise- ja väliskeskkonna vahel
tagab: a) rakkude normaalse membraanipotentsiaali; b)
osmootse rõhu säilimise;
c) organismi normaalse veevahetuse; d) membraantranspordi ja imendumise;
e) mitmete ensüümide aktivatsiooni.
Kaaliumivajadust peab silmas
pidama väga erinevate haiguste vältimisel ja ka
ravil.
Kaalium imendub kiiresti peensoolest. Tema imendumist, aga ka omastamist
rakkude poolt soodustab vitamiin B6. Kaalium väljutatakse peamiselt uriiniga,
märkimisväärselt ka higiga. Ülemäärane naatriumi, kohvi, suhkru ja alkoholi
tarbimine suurendab kaaliumi väljutamist uriiniga. Et normaalne kaaliumi omasta-
mine vajab ka vastaval hulgal magneesiumi tarbimist, siis on
alkohol kaaliumi
suhtes kahekordne antagonist, sest ta soodustab ka magneesiumi väljutamist.
Kaaliumi ülemäärast eritumist soodustab samuti madal veresuhkru tase. Täiskasva-
nud inimese ööpäevane kaaliumitarve on erinevatel andmetel umbes 1,4–3,0g.
Konkreetne vajadus sõltub inimeste kehakaalust, füsioloogilisest seisundist, keha-
lisest aktiivsusest, elukoha kliimast jne. Näiteks
oksendamine , kestev kõhulahtisus,
rohke higistamine, diureetikumide kasutamine suurendavad tunduvalt kaaliumi-
vajadust.
Magneesium kuulub luude koostisesse, tal on roll kaltsiumi ning C-vitamiini
ainevahetuses, mõjutab süsivesikute ainevahetust, aktiveerib aminohappeid, on
vajalik südamelihaste tööks ja vereringe reguleerimiseks, omab võtmerolli vähe-
malt 300 põhilises ensümaatilises reaktsioonis, aitab aktiveerida valgu sünteesil
osalevaid ensüüme. Magneesiumi
defitsiidil võivad ilmneda närvilisus, muutused
käitumises, lihaste
talituse häired, arütmia, kõrge vererõhk, neerukivid, halveneb
toidu omastatavus. Defitsiiti on täheldatud põhiliselt seoses vähese absorptsiooni,
kroonilise alkoholismi ja neerude halvenenud funktsioneerimise korral, samuti osa
11
ravimite
kasutamisel . Suured magneesiumikogused võivad osutuda toksilisteks
neeruprobleemidega inimestel ning põhjustada kõhulahtisust. Magneesiumirikkad
on taimsed toiduained, mis sisaldavad klorofülli, ning pähklid ja seemned.
Magneesiumi on palju täisteraviljatoodetes, lehtköögiviljades, kakaos. Kare vesi
ning
mineraalvesi võivad olla headeks magneesiumi allikateks.
Kloor koos naatriumiga on organismile vajalik maomahla koostises oleva sool-
happe moodustamiseks, normaalseks seedimiseks ja ainevahetuseks. Kloori saa-
dakse samuti keedusoolast.
Rauasoolad kuuluvad punase vereaine
hemoglobiini koostisesse. Raua puudumine
toidus põhjustab kehvveresust. Rauasooli leidub munakollases, maksas, lihas,
kaunviljades.
Fluor on oluline hammaste ja luude moodustumisel ning hambaaukude enneta-
misel.
Vasevajadus seostub raua metabolismiga – vask osaleb hemoglobiini sünteesis ja
soodustab raua omastamist erütrotsüütide kujunemisel. Vask on aminohapete ja
valkude metabolismi paljude ensüümide kofaktor, samuti fosfolipiidide sünteesil
ensüümide
komponent . Vask on oluline komponent ka rakuhingamise võtme-
ensüümis. Vask osaleb hapniku vabade radikaalide taseme regulatsioonis, omades
antioksüdantset rolli. Mikrobioelemendina on vask vajalik ka luukoe tekkeks. Vase
depooks on maks,
neerud , süda ja aju. Peamised vaske sisaldavad produktid on
maks, punane liha, kalaliha, oad,
herned , must
aroonia , kirsid, täisteraviljatooted,
pähklid. Oluline vaseallikas on ka
joogivesi .
Jood on vajalik kilpnäärme tööks. Joodi leidub vähesel määral
kalades ja vees.
Koobalt on vajalik erütrotsüütide
talitluseks ja vereloomeks. Element kuulub B12-
vitamiini koostisesse ja on vajalik mitmete ensüümide tööks. Koobalt soodustab
samuti raua imendumist ning erütrotsüütide rauasisalduse
suurenemist . Peamised
koobaltit sisaldavad produktid on loomaliha, maks, neer ja piim. Taimedest sisalda-
vad koobaltit rõikad,
pirnid , mustad sõstrad, vaarikad,
peet , kaunviljad,
astelpaju viljad ja sibulapealsed. Rõhutada tuleb, et maismaataimede koobaltisisaldus on
suhteliselt väike, mistõttu rangetel taimetoitlastel võib esineda koobalti defitsiiti.
Kroom teeb koostööd insuliiniga glükoosi ainevahetuses. Stimuleerib kõhunäärme
beetarakke
tootma rohkem insuliini.
Mineraalsoolade vajadus kaetakse täielikult siis, kui toit koosneb mitmekesistest
loomsetest ja taimsetest toiduainetest.
Erandiks on keedusool, mida toiduainetes
tavaliselt vajalikul hulgal ei leidu, mistõttu soola tuleb toidule eraldi lisada.
Vesi. Mitmesuguste eluvormide
eksisteerimine sõltub oluliselt veest. Ka inimene
vajab elamiseks vett (
inimorganism sisaldab seda keskmiselt 65%). Vesi on samuti
iga raku vältimatult vajalik koostisosa. Vee füsioloogiline tähtsus seisneb selles, et
ta võtab osa organismi ainevahetusest. Organismi ja väliskeskkonna vahel toimub
pidev veevahetus. Inimene eritab ööpäevas keskmiselt 2,5 liitrit vett. Eritatava vee
peab inimene asendama, sest muidu võivad tekkida tõsised tervisehäired. Kui
orga -
12
nism kaotab 10% temas leiduvast veest, siis ohustab see elu, 20–25% vee kaota-
mine aga põhjustab surma, ööpäevas eritatud vesi asendatakse vedeliku joomisega
(janu kustutamiseks 1,2 liitrit, toiduainetes
leiduva veega 1,0 liitrit ja organismis
toitainete hapendumisel moodustuva veega 0,3 liitrit). Vesi sisaldab mitmesuguseid
mineraalsooli, sealhulgas ka mikroelemente (joodi,
fluori , seleeni, koobaltit,
arseeni,
pliid , vaske,
tsinki jt), mis on igale organismile vajalikud väga väikestes
kogustes . Mõne mikroelemendi hulk joogivees on väga suure tervishoiulise tähtsu-
sega. Näiteks joodi puudumine või vähesus joogivees võib põhjustada kilpnäärme
haigestumist ja isegi füüsilist ning vaimset kängujäämist.
Tabel 1.1. Vitamiinide klassifikatsioon
Tähis
Keemiline põhinimetus
Olulisemad allikad
Rasvlahustuvad vitamiinid
A
retinoidid kala- ja
loomamaks , või
D
kaltsiferoolid
kalarasv,
munakollane , või, pärm
E
tokoferoolid porgand,
kapsas , taimsed õlid,
linnaseleib
K naftokinoonid
kalasaadused, spinat, kapsas,
herned
Q ubikinoonid
taimsed
produktid
F
linoolhape + linoleenhape
taimsed õlid
Vees lahustuvad vitamiinid
B1
tiamiin
pärm, kaerahelbed, sealiha,
täisteraviljatooted
B2
riboflaviin
piim, maks, kala, pärm,
kaunviljad, spinat
pantoteenhape
pärm, maks, piim, munad,
kapsas, kartul,
tomat B4
koliin liha, kroovimata jahust leib,
munarebu, maks, piim
PP
niatsiin , nikotiinhape
maks, pärm, kalasaadused,
kanaliha , nisukroov
B6
püridoksiin
maks, munakollane, porgand
B8
inosiit (müoinosiit)
neerud, süda, kartul, mais
B10, B11
foolhape , folatsiin
maks, oad, rohelised taimeosad,
neerud, liha
B12
kobalamiinid
verivorst, maks, tailiha, juust,
pärm, seened
B13 oroothape
loomsed
produktid
B15
pangaamhape
loomsed produktid ja seemned
BT
karnitiin lihasaadused,
pärm
C
askorbiinhape musta sõstra ja kibuvitsa
marjad ,
jõhvikas, kapsas, paprika,
pähklid, tsitrused
H
biotiin maks, neerud, piim, oad, tomat,
munakollane
N
lipoehape
pärm, piim, liha
U S-metüülmetioniin
kapsas,
spargel , petersell, tomat
pAB
p-aminobensoehape
maks, piim, munad, pärm
P bioflavonoidid
värsked puu- ja
juurviljad A
retinoidid
kala- ja loomamaks, või
Vitamiinid. Vitamiinide klassifikatsioonis (tabel 1.1) tuntakse üle 20 vitamiini.
Vitamiinide määratluse teatud suhtelisus ja nende ehituse oluline heterogeensus on
peamised põhjused, miks vitamiinide klassifikatsiooni aluseks on nende lahustu-
vus. Vitamiine tähistatakse ladina tähestikus suurtähtedega. Rasvlahustuvate vita-
13
miinide puhul tähistab üks täht tervet ühendite gruppi, millel on väga sarnane
ehitus ja sama toime. Rasvlahustuvad vitamiinid on A, D, E, K, Q, F. Vees
lahustuvad vitamiinid on B-grupi vitamiinid: C, H, U, P, N. Vitamiinid on vajali-
kud meie organismi normaalseks funktsioneerimiseks. Organism neid ise sünteesi-
da ei suuda (välja arvatud mõningad erandid, nt D-vitamiin) ning ilma vitamiini-
deta on võimatu ellu jääda. Vitamiinid ei ole toidu asendajad, neil ei ole energee-
tilist väärtust ja nad ei sisalda kaloreid. Vitamiinid ei asenda valke, rasvu, süsive-
sikuid, vett ega ka üksteist. Ei ole võimalik vitamiine tarvitades lakata söömast ja
loota jääda terveks. Vitamiinid reguleerivad organismi ainevahetust ensüümide
kaudu, nad on ensüümide koostisosad. Ensüümid kiirendavad ja reguleerivad meie
ainevahetust
hoides organismi funktsioone vajalikul tasemel. Ensüümid kui bioka-
talüsaatorid määravad inimorganismis biomolekulide muundumisprotsesside kiiru-
se ja suuna, see tähendab nende tegevus on organismi talitluse aluseks. Vitamiinide
mis tahes defitsiit tekitab nende koensüümse rolli tõttu keerulisi probleeme aineva-
hetusprotsesside normaalses kulgemises. Vitamiinide allikateks on toit, seedekulgla
mikrofloora ja vitamiinipreparaadid. Vitamiinide defitsiidi tekkepõhjused on
toitumuslik-olmelised, füsioloogilised ja organismi teatud haiguslikud
seisundid .
14
2. TOIDUHÜGIEENI PÕHITÕED 2.1. SISSEJUHATUS Toiduainetööstuste eesmärgiks ja ülesandeks on rahuldada tarbijate vajadusi.
Toiduainete
ostmisel eeldab tarbija, et saab täisväärtusliku, võltsimata ja ohutu
toote. Seepärast ei tohi ükski toiduaine põhjustada sööja haigestumist ega vigastusi.
Riknenud toote võib tarbija
maitsmis - ja haistmismeele abil kindlaks teha, kuid
haigusttekitavate mikroorganismidega saastunud toiduainet on võimatu teistest
eristada. Nii võib saada maitsvast juustutükist hoopis listerioosi
tekitaja . Vaatamata
tarbijate ja toidukäitlejate teadlikkuse tõusule ning toiduainete tehnoloogiate
kaasajastamisele ja täiustamisele ei ole toidust tingitud haigestumiste esinemis-
sagedus siiski vähenenud. Igal aastal kannatavad inimesed toidust põhjustatud hai-
guste all, mis tavaliselt esinevad tõsise kõhulahtisuse,
oksendamise või kõhukram-
pide näol saastunud või mürgiste
toitude söömise või joomise tagajärjel. Toidust
tingitud haigestumised tekivad patogeenseid
mikroorganisme ja inimorganismile
ohtlikke aineid sisaldavate toiduainete tarvitamisel.
Toidumürgistusel võib olla aga kõrge hind, mitte ainult riigi jaoks kaotatud töö-
päevade näol, vaid ka toidutöötlemisega seotud tööandjate ja töövõtjate jaoks.
Toidumürgistusega
seostatud toiduainetööstuste omanikud võivad kaotada oma
ettevõtted, töötajad aga oma töö. Toidukäitlejaid, kes rikuvad toidualaseid seadusi,
võib kohtulikult vastutusele võtta, toidumürgistuse
puhang aga võib kompensat-
siooninõuete tõttu firmadele maksma minna kümneid tuhandeid kroone. Hooletud
toidukäitlejad võivad mürgitada iseend, veelgi halvemal juhul aga põhjustada
nende poolt valmistatud toiduga tarbija haigestumise või isegi surma. Olemas-
olevate toiduhügieeni-alaste seaduste range ellurakendamine on oluline, samas pole
see aga iseenesest veel piisav toidumürgistuse vältimiseks.
Toidumürgistuse põhjustajaks on tavaliselt
hooletus või teadmatus, seepärast usub
enamik toiduhügieenieksperte, et praeguse aja sünge statistika paranemist võib
saavutada ainult toidukäitlejate
harimise kaudu. Üks väljaõpetamata toidukäitleja
viga kõige moodsamas toiduainetööstuse ettevõttes võib põhjustada tõsise toidu-
mürgistuse puhangu. Toiduhügieeni põhimõtteid tuleks õpetada süstemaatiliselt
ning see peaks olema olulisel kohal toiduhügieeni algõpetuse andmisel.
15
Enam kasutatavad toiduhügieeni- alased mõisted TOIDUHÜGIEEN – vajalikud tingimused ja abinõud ohutu, tervisliku, inimtoi-
duks kõlbliku toote valmistamiseks, säilitamiseks ja turustamiseks.
TOIDU TURVALISUS – inimeste varustamine piisavas koguses toiduga, mis
vastab nende eelistustele ning tagab vajalike toitainete kättesaadavuse ja toetudes
eespool mainitud faktoritele loob eelduse aktiivseks eluks.
OHUTU JA TERVISLIK –
tähendab toidu kõlblikkust inimtoiduks järgnevate
kriteeriumide kohaselt:
• ei põhjusta toidust pärinevaid infektsioone ja intoksikatsioone ning on käidel-
dud õige eesmärgi kohaselt;
• ei sisalda jääkaineid üle lubatud piirnormide;
• on vaba
haigustest , eriti zoonootilistest ja loomatervishoiu seisukohalt olulis-
test haigustest;
• on vaba ilmsest saastatusest;
• on vaba defektidest, mis on üldiselt tunnistatud tarbijale ebameeldivateks;
• on toodetud adekvaatse hügieenilise kontrolli all;
• täidab tarbija nõudmised koostisele ja valmistusviisile.
OHT ( hazard ) – bioloogiline, keemiline või füüsiline
agens ehk mõjur toidus või
toidu potentsiaal tekitada tervist kahjustavaid
efekte .
RISK (risk) – ohust tingitud kahjuliku toime tõenäosus ja ohu tõsidus.
RISKI ANALÜÜS – kolmeosaline protsess:
• riski hindamine,
• riski ohjamine,
• riski kommunikatsioon.
RISKI HINDAMINE (risk assesment) –
koosneb järgmistest etappidest:
• ohu identifitseerimine,
• ohu
iseloomustamine ,
• toimeaja hindamine,
• riski iseloomustamine.
RISKI OHJE (risk management ) – riski hindamisest, headest kaubandustavadest
ja tervisekaitse nõudeist lähtuv ning alternatiive
arvestav tegevus. Vajadusel
rakendatakse ennetavaid ja kontrollimeetmeid.
RISKI KOMMUNIKATSIOON –
interaktiivne info ja arvamuste vahetamine riski
hindajate ja ohjajate, tarbijate, tööstuse, teadlaste jt huvipoolte vahel riski analüüsi käigus.
KVALITEETNE TOIT – toit on kvaliteetne, kui ta on:
• ohutu,
• toitainete koosluselt sobilik,
• maitsev ning omase lõhnaga,
• kergelt valmistatav,
• kergelt kättesaadav,
• tarbija eelistustele vastav.
16
2.2. TOIDUHÜGIEENI EESMÄRK JA ÜLESANDED Toiduhügieen on enam kui lihtsalt puhtus; see hõlmab kõiki töövõtteid, ja sellest
tingituna on toiduhügieeni eesmärkideks:
1) kaitsta toitu saastumisohu, sh kahjulike bakterite, ohtlike ainete ja võõrkehade
eest;
2)
takistada kõigi olemasolevate bakterite paljunemist määrani, mis võib
põhjustada tarbijate haigestumise või toidu kiire riknemise;
3) hävitada toidust kõik
patogeensed bakterid põhjaliku
keetmise -küpsetamise või
töötlemise abil.
Seega
on
toiduhügieen toimingute kogum toidu ohutuse ja hügieeninõuete-
kohasuse tagamiseks.
Toiduhügieenil on järgmised ülesanded: • toidu kaitsmine mikrobioloogilise, keemilise ja füüsikalise saastumise eest;
• mikroobide paljunemise pidurdamine, vältimaks tarbijate tervisehäireid ja too-
dete enneaegset riknemist;
• toidupatogeenide ja termolabiilsete (temperatuuritundlike) toksiinide hävita-
mine töötlemisel;
• tarbijale ohutu toidu tagamine toiduhügieeni reeglite järgimisega.
Toidu ohutust ning kvaliteeti saab tagada üksnes siis, kui on kindlustatud
kontroll kogu tootmise ulatuses, toorme tootmine kaasa arvatud.
Toiduhügieen jaguneb üldiselt kolmeks:
• hügieen farmi tasandil;
• ettevõtte tootmishügieen;
• töötajate isiklik hügieen.
Heast hügieenist tulenevad tulud: • tarbijate rahulolu, ettevõtte hea reputatsioon, suurenev läbimüük;
• toodete säilivuse
pikenemine ;
• kasumi suurenemine;
• meeldiv töökeskkond;
• seadusekuulekus jt.
Puudulikust hügieenist tulenevad kahjud: • tarbijate haigestumine, surmajuhtumid;
• toidu
saastumine , reklamatsioonid (kirjalikud kaebused);
• kaod toidu riknemise tõttu;
• ettevõtte tegevuse peatamine või
sulgemine ;
• trahvid ja muud sanktsioonid;
• tarbijakaitseühenduste ja kodanike sanktsioonid;
• toodangu kaotus ja
utiliseerimise kulud;
• täiendavad sanktsioonikulud ja seadmete asendamine;
•
kaudsed tagajärjed (kasumi ja töötasude vähenemine, koondamised, pankrot).
Kõik need tegurid vähendavad tulusid. Kui ettevõtte kaubanduslik konkurentsi-
17
võime satub ohtu, võivad töötajad kaotada lisatasud ületunnitööde eest, preemiad
või koguni oma töö. Sellepärast on kõigi toidu valmistamise ja käitlemisega seotute
huvides täita toiduhügieeni kõige kõrgemaid norme. Kui teadvustada toiduhügieeni
olulisust ja rakendada kõiki selle põhimõtteid oma töös, siis praktiliselt puudub
võimalus saada toidumürgistuse puhangu põhjustajaks.
Oluline on teada, et mikroobide kasvu, toksiinide moodustumist ja haigestu-
mist soodustavad: • nakatunud inimese kontakt toiduga;
• valmistoidu või toorme
ristsaastumine ;
• seadmete mitteküllaldane
sanitatsioon ;
• temperatuurirežiimide
rikkumine :
a) toidu mitteküllaldane
jahutamine ,
b) toidu mitteküllaldane kuumutamine jt.
Põhjused, miks tänapäeval toiduga ülekanduvaid haigusi on rohkem: • parem haiguste registreerimine;
• laboridiagnostika on täienenud (seotud eelnevaga);
• rohkem tootmist, et suurendada käivet; tapaliinidel on kiirused kasvanud;
• inimesed on tundlikumad (statistika selle kohta puudub);
• tarbijad nõuavad pikema säilitusajaga toiduaineid (listeeriate ja jersiiniate
esinemise võimalus suureneb);
• halb hügieen köökides;
• suurenenud on pooltoore liha ja valmistoitude söömine;
• suuremad
haiguspuhangud (saavad alguse toitlustamisega tegelevatest ettevõte-
test);
• suured
farmid – intensiivne
loomakasvatus .
Toiduohutuse tagamine sisaldab järgmisi menetlusi: •
tooraine kontrolli ja nõuetekohast käitlemist;
•
tehnoloogiliste seadmete korrasolekut ja vastavust nõuetele;
• tehnoloogilise protsessi parameetrite järgimist;
• seadmete ja tootmisruumide efektiivset
pesemist ja desinfitseerimist;
• tootmisruumides nõuetekohase
puhtuse tagamist;
• töötajate üldiste hügieenireeglite tundmist ja isikliku hügieeni tagamist;
• kontrollsüsteemide efektiivset toimimist.
Toiduohutuse tagamisel on esmane vastutus käitlemisettevõttel ning järeleval-
veinstitutsioonide ülesandeks on teostada järelevalvet toodangu, tootmise,
impordi ja turustamise üle. Järelevalveinstitutsioonide tegevus toidu ohutuse
tagamisel on tihedalt seotud toiduainetööstuse toodanguga ja see omakorda toor-
ainega selle tootmiseks. Toiduohutusel on otsene seos ka keskkonna hügieeniga.
Standarditega on reguleeritud järgmised valdkonnad: vee kvaliteet, heitvete kogu-
mine ja kahjutustamine, vastuvõetavad elukeskkonna tingimused jne.
Toiduohutuse tagamise süsteemis peavad töötama adekvaatsed
spetsialistid . Süs-
teemi peavad kindlasti olema kaasatud sellised spetsialistid, nagu toiduinspektorid,
18
arstid, veterinaararstid, mikrobioloogid, molekulaarbioloogid,
keemikud ja toidu-
tehnoloogid.
Ohud, mis põhjustavad inimese haigestumise või vigastumise, jaotatakse kolme
klassi:
• bioloogilised ohud,
• keemilised ohud,
• füüsikalised ohud.
Lihatoodete puhul tuleb esinemissageduse ja tõsidusastme tõttu kõige olulisema-
teks pidada bioloogilisi ohtusid, mis põhjustavad eeskätt toidumürgistusi. Esineb
kahte tüüpi toidumürgistusi. Esiteks võivad toidumürgistusi esile kutsuda
mikro -
organismid, mis satuvad toiduainete kaudu inimese organismi ning hakkavad seal
paljunema ja
toksiine tootma. Teiseks võivad
mikroorganismid (nii bakterid kui
mikroseened) sattununa toiduainetesse toota toksiine ning seega kutsuvad toidu-
mürgistuse esile toiduga organismi sattunud
toksiinid , ilma et haigusetekitajad
peremeesorganismi koloniseeriks.
Kõrgete temperatuuride rakendamine toiduohutuse tagamiseks ei oma 100%
efektiivsust , sest toiduained võivad olla saastunud termoresistentsete toksii-
nidega, mis üldjuhul hävinevad selliste temperatuuride juures, mida toidu-
ainetööstustes rakendatakse suhteliselt harva. Tähtsamad toidupatogeenid: •
Salmonella ,
•
Shigella ,
•
Campylobacter jejuni,
•
Listeria monocytogenes,
•
E. coli (enteropatogeenne),
•
Clostridium botulinum,
•
Clostridium perfringens,
•
Brucella abortus,
•
Mycobacterium bovis,
•
Staphylococcus aureus ,
•
Vibrio parahaemolyticus,
•
Vibrio vulnificus,
•
Yersinia enterocolitica, •
Coxiella burnetti. Väga oluliseks bioloogiliseks ohuallikaks toiduainetes on mükotoksiinid. Mükotok-
siine produtseerivad erinevad hallitusseened. Toiduainetes on mükotoksiinidest
levinumad aflatoksiinid. Aflatoksiine produtseerivad
Aspergillus flavus’e ning
Aspergillus parasiticus’e liigid. Aflatoksiinid avaldavad inimesele kantserogeenset
ja maksa kahjustavat toimet.
Toidumürgistusi esile kutsuvaid mikroorganisme võib leiduda laialdaselt nii
looduses kui olme tasandil. Seepärast on oluline, et töötajad suhtuksid väga tõsiselt
isiklikku hügieeni ning teadvustaksid endale, et nad võivad ise olla haigusetekitaja-
te kandjateks ja
levitajateks . Käitlemisettevõtte töötaja peab teavitama käitlejat või
19
tema esindajat oma tervisehäiretest, haigustest, kontakteerumisest nakkushaigega
või muudest ohtudest, mis võivad põhjustada toidu saastumise.
Lisaks eespool mainitule on äärmiselt oluline töötajatele selgitada käte pesemise
vajalikkust . Igal juhul peavad toidukäitlejatel olema käed pestud, sest just käed on
põhiliseks allikaks patogeenide ülekandmisel tootesse. Käsi tuleb pesta enne tööle
asumist, pärast
tualeti kasutamist ja muudel vajalikel juhtudel. Nõuetekohane on
käte pesemine sooja veega (45–49 °C), kasutades desinfitseerimisainet sisaldavat
vedelseepi, ning käte hügieeniline
kuivatamine . Käte kuivatamiseks võiks kasutada
näiteks ühekordseid paberkäterätte. Mitte mingil juhul ei tohi käsi kuivatada
kaitseriietesse. Töötamise ajal tuleks samuti aeg-ajalt käsi pesta, et vältida nende
saastumist. Meeles tuleb pidada, et käte puhtuse astet ei saa alati visuaalselt
hinnata. Näiliselt täiesti puhtad käed võivad olla saastunud mikroobidega ning
puutudes otseselt kokku toiduga, saastada seda. Oluliseks tuleb pidada fakti, et
ligikaudu 40% täiskasvanutest kannab
S. aureus’t nina või
kurgu limaskestal ning
seega aevastamisel või nuuskamisel võib toidupatogeen sattuda toitu või käitlemis-
pindadele .
Aevastamise või nuuskamise järgselt ning pärast
suitsetamist (ette-
nähtud ruumis) tuleb alati käsi pesta. Nuuskamiseks sobivad ühekordselt kasuta-
tavad pabertaskurätid, sest riidest taskurätikuid kasutatakse korduvalt, mis seab
ohtu tootmishügieeni.
Eraldi väärivad tähelepanu töötajate harjumused:
1) tuleks vältida näppudega nina kratsimist ja nina nokkimist,
2) aevastamisel ja köhimisel
katta suu käega ning pärast seda pesta käsi,
3) vältida tuleks enda erinevate kehapiirkondade kratsimist,
4) närimiskummi närimine ja toidu söömine tootmisruumides on keelatud,
5) näppude niisutamine süljega on keelatud (kilekottide avamisel jne).
Töötajad ei tohiks kasutada intensiivselt lõhnavaid parfüüme,
ehted ja kellad jäägu
riietusruumidesse, kaitseriietus olgu puhas, vigastuste katmiseks kasutatagu
veekindlat värvilist plaastrit, juukseid ei tohi tootmisruumis kammida ning nad
peavad olema hoolikalt kaetud jne.
Ettevõtte tööline, olles oluliseks lüliks toiduainete käitlemisel, võib suurel mää-
ral mõjutada ettevõtte käekäiku. Seda nii positiivses kui negatiivses suunas. Et mikroorganismid on ja jäävad meiega, siis on tähtis leida tasakaal, mis väldiks
sagedasi haigusjuhtumeid. Üks võimalus tasakaalu leidmiseks on endale selgeks
teha, millised on kõige olulisemad bioloogilised
ohuallikad , milliste meetoditega
on võimalik nende vastu võidelda ja kuidas ennast kaitsta konkreetsete ohtude eest.
Teatud toidupatogeenide puhul (näiteks kampülobakterid) on väga raske leida
20
võimalusi nende absoluutseks hävitamiseks tooraines ning see ei ole tihti ka
eesmärk
omaette .
Sellistel juhtudel on aga väga oluline viia mikroorganismide arvukus nii madalaks
kui võimalik ning edaspidise töötlemisega saab juba mikroorganismid hävitada.
Mida suurem on tooraine algsaastatus, seda raskem on saavutada lõpptoote
vastavust hügieenistandarditele ja seda suurem on tõenäosus, et toode on
saastunud termoresistentsete toksiinidega. Seega on väga oluline tagada nõuetele
vastav tootmishügieen ja töötajate isiklik hügieen alates tooraine vastuvõtust kuni
valmistoote tarbijani jõudmiseni. Tooraine kontroll peab
algama juba farmi tasandilt.
Tänapäeval on toidumürgistuste arvu suurenemine tingitud eeskätt sellest, et tarbi-
takse rohkem valmistoite. Tarbijate tasandil on oluline teada, et korralik toidu läbi-
küpsetamine tagab tihti toidu bioloogilise ohutuse, samuti on väga vajalik tootja
poolt määratud temperatuurirežiimide järgimine – külmaketi pidev säilimine ja
toote valmistamisel tootja poolt määratud temperatuuride rakendamine. Eespool
loetletule põhinedes võib väita, et mitte kõik toidu tarbimisest tulenevad ohud ei
ole tingitud käitlemisettevõttest, vaid ka meist endist, kes me toitu ostame ja seda
vääralt kasutame. Ettevõtte töötajad peaksid arvestama sellega, et paljude haiguse-
tekitajate kandjateks võivad olla meie
lemmikloomad , ilma et nad ise haigestuks
(loomad on
terved , kuid haigusetekitajate kandjad –
reservuaar ). Olulisemateks
patogeenideks , mille reservuaariks ja vektoriteks (levitajateks) on koduloomad, on
näiteks salmonellad, kampülobakterid ja isegi listeeriad. Seega, tagamaks ettevõttes
eeskujulikku hügieeni, peame elementaarseid hügieenireegleid täitma ka kodus.
2.3. RISKIASTMED, SAASTUMISVIISID JA -TEED Kõik
toitlustus - ja jaekaubandusettevõtted võib jagada kolme riskikategooriasse:
kõrge, keskmise ja madala
riskiga .
1. Kõrge riskiga on: • käitlemisettevõtted, kus valmistatakse toitu tundlikele tarbijarühmadele (nt
vastsündinud, väikelapsed,
vanurid , rasedad);
• käitlemisettevõtted, kus valmistatakse toitu
suurele hulgale tarbijatele ning
kus risk võib olla põhjustatud
- toidu riskikategooriast,
-
toiduvalmistamise viisist (kuumtöödeldud või kuumtöötlemata),
- toiduvalmistamise tingimustest (hügieeninõuete täitmine),
- enesekontrollisüsteemi toimimisest.
2. Keskmise riskiga on üldjuhul käitlemisettevõtted, kus valmistatud toit on
ettenähtud tavatarbijatele ja kus ei valmistata kõrge riskiga valmistoite, kuid
toitude
sortiment või tarbijate arv on suur.
3. Madala riskiga on käitlemisettevõtted, mille puhul on vähe tõenäoline, et
käideldav toit võib kahjustada tarbija tervist.
Kõrge riskiastmega toitudeks loetakse tavaliselt niisuguseid toite, mis
soodusta -
21
vad kahjulike bakterite paljunemist ning on mõeldud tarbimiseks ilma töötlemiseta,
näiteks keetmise-küpsetamiseta, mis patogeensed mikroorganismid muidu hävi-
taks. Need toidud sisaldavad tavaliselt valku ning nõuavad säilitamist külmikus.
Seega nõuavad kõrge riskiastmega toidud ranget temperatuurikontrolli ja kaitset
saastumise eest. Neid tuleb alati hoida lahus toorestest toitudest.
Nendeks on näiteks:
1) keedetud-küpsetatud liha ja
linnuliha ;
2) keedetud-küpsetatud
lihatooted , sh kastmed ja
puljongid ;
3) piim, koor, tehiskoor,
munaroad ja piimatooted;
4) keedetud munad ja
munatooted , näiteks
majonees ;
5)
koorikloomad ja muud meretoidud;
6) keedetud riis;
7)
salatid .
Kõiki ülalloetletud toite
seostatakse sageli toidumürgistuse puhangutega, eriti
linnuliha, toormunatooteid ja keedetud-küpsetatud liha. Tihti maitseb ja lõhnab
saastunud toit täiesti normaalselt ning saastumist ei suuda
avastada ilma labora-
toorsete uuringuteta.
Keskmise riskiga toidud on need, mis ei kuulu kõrge ega madala riskiga toitude
gruppi. Näiteks steriliseeritud toiduained (
konservid , steriliseeritud piim jne).
Madala riskiga toidud on need, mille muutumine tarbijale ohtlikuks tavalise
realiseerimisaja jooksul ei ole tõenäoline ning mis ei vaja säilitamiseks eritingimusi
(võib hoida toatemperatuuril). Näiteks lihtpagaritooted (leib, sai), küpsised, kuiv-
ained, mahl, alkohol jne.
Vältimaks ebatervisliku ja ohtliku toidu tarbimist, on oluline hoida kõrge riski-
astmega toidu saastumine minimaalsena. Kõrge riskiastmega toidu saastumist on
kolme liiki:
1) bioloogiline saastumine, mis tavaliselt esineb toiduainetööstustes teadmatuse,
ebapiisava ruumi, halva konstruktsiooni või toidukäitlejate n-ö lõikamiste tõttu.
Sedalaadi saastumine on kõige tõsisem ning võib lõppeda toidu riknemise,
toidumürgistuse või koguni surmaga;
2) füüsikaline saastumine toimub tavaliselt võõrkehade kaudu, mis vahel võivad
olla ohtlikud, näiteks klaas või
naelad ;
3) keemiline saastumine, mis tavaliselt toimub pestitsiidide, jääkainete või
desin -
fitseerimisvahendite kaudu.
Toidumürgistust põhjustavate bakterite allikad on järgmised.
1. Inimene. Inimestel asuvad toidumürgistust põhjustavad bakterid tavaliselt ninas,
suus ja soolestikus, aga ka nahal. Toit võib saastuda otseselt käte, aevastamise
või köhimise kaudu või kaudselt kanalisatsioonist saastunud vee kaudu. Kogu
toiduainetööstuses kasutatav vesi tuleks kohe töödelda, näiteks kloreerida.
2. Toores toit. Toores toit on väga ohtlik, eriti punane liha, linnuliha (kuni 80%
sügavkülmutatud linnulihast võib olla
Salmonella kandja), töötlemata piim,
munad ja koorikloomad, näiteks
austrid . Toorest toitu tuleks alati hoida lahus
22
kõrge riskiastmega toidust. Sügavkülmutatud toitude, eriti sügavkülmutatud
linnuliha sulamisvedelikul ei tohi lasta saastada lappe, kõrge riskiastmega toite
ega nende puhul kasutatavaid seadmeid.
3. Putukad. Mitmed putukad võivad
edastada toidumürgistust
tekitavaid baktereid
toidule. Kärbsed ja tarakanid kujutavad suurimat ohtu oma toitumisharjumuste
ning
kohtade tõttu, kus nad käivad. Kärbsed maanduvad sageli looma välja-
heidetel, kust nad koguvad oma karvastele kehadele suure hulga baktereid.
Lisaks roojavad ja oksendavad nad söömise ajal oma eelnevalt söödud
road tagasi toidule. Putukamürkide hooletu kasutamine võib põhjustada surnud putu-
kate sattumise toitu. Tarakanid elavad sageli kanalisatsioonitorudes ning toitu-
vad tavaliselt nakkuslikest jääkainetest. Nad
peituvad toiduruumide kõige ligi-
pääsmatumatesse
kohtadesse ning võivad kanda toidumürgistust tekitavaid orga-
nisme oma jalgadel ja kehadel toidule ning seadmetele, millel nad kõnnivad.
4. Närilised. Nii
rotid kui hiired võivad saastada toitu väljaheidete, uriini ja
karvadega ning seda närides. Toidu kontaktpinnad, millel närilised on kõndinud,
tuleb enne tarvitamist
desinfitseerida . Kui kahtlustatakse, et mingi toit on
saastatud näriliste poolt, tuleb see hävitada.
5. Tolm. Alati leidub suurel hulgal baktereid tolmus ja õhus.
6. Prügi ja toidujäätmed. Toidujäätmeid ja kõlbmatut toitu ei tohi lasta kuhjuda
toiduruumidesse. Tuleb vältida toidu saastumist jäätmete kaudu kas otseselt või
kaudselt. Töötajad peavad pärast prügi käsitsemist
pesema oma käed. Prüginõud
on kärbeste lemmiktoitumiskohad ning neil peavad alati olema tihedalt sulguvad
kaaned.
7. Loomad ja linnud. Nii kodu- kui
metsloomad kannavad
kahjulikke baktereid
oma kehal ja soolestikus. Veelgi enam, nende jalgadelt võib toidule sattuda
mustust, samuti
karvu ja sulgi. Lemmikloomad tuleb alati jätta tootmisruumidest
väljapoole.
Mõnikord edastatakse kahjulikke baktereid vahetult allikast kõrge riskiastmega
toidule, kuid et bakterid on üldjuhul staatilised ning allikad ei pruugi olla
otseses kontaktis toiduga, satuvad baktereid toidule muude asjade kaudu. Neid asju tuntak-
se edastusvahenditena ning peamisteks neist on käed, riided ja
seadmed , käte
kontaktpinnad ja toidu kontaktpinnad. Kaudne saastumine vahepealse
edastus -
vahendi kaudu on kõige levinum, näiteks bakterite ülekandumine toidukäitleja
soolestikust toidule käte kaudu pärast tualeti kasutamist. Kui
saastus edastatakse
toortoidult kõrge riskiastmega toidule näiteks tööpinna kaudu, nimetatakse seda
ristsaastumiseks.
2.4. TOIDUMÜRGISTUSTE VÄLTIMINE Maailma Terviseorganisatsioon (WHO)
defineerib toidumürgistust haigusena, mis
avaldub infektsiooni või toksikoosina ning on põhjustatud söögi või joogivee
tarbimisest. Definitsioon sisaldab kõiki toidu- ja joogiveepõhiseid haigusi, sõltumata
haiguse tunnustest ja sümptomitest. Mõiste sisaldab nii ägeda kuluga haigusi, mida
iseloomustavad diarröa ja oksendamine, kui ka haigusi, mille sümptomid ei ole
23
seotud mao-sooletraktiga. Näidetena võiks tuua botulismi ja toidupõhise listerioosi
ning haigused, mis on põhjustatud toidu kontaminatsiooniga toksiliste kemikaalide
poolt. Toidumürgistuse mõistet ei kasutata haiguste korral, mis on põhjustatud tuntud
allergeenide ja organismile talumatute ainete poolt (intolerantsus).
Toidumürgistuse 10 peamist põhjust: 1) toit on valmistatud liiga vara ette ning on säilitatud toatemperatuuril, s.o mitte
külmikus;
2) enne külmikusse panemist on toitu liiga aeglaselt jahutatud;
3)
toitu pole taaskuumutatud piisavalt kõrgete temperatuurideni, hävitamaks
toidumürgistust põhjustavaid baktereid;
4)
toidumürgistust põhjustavate
bakteritega eelnevalt saastunud valmistoidu
kasutamine;
5) toidu alavalmistamine;
6) sügavkülmutatud linnuliha sulatamiseks ebapiisav aeg;
7) ristsaastumine toorelt toidult valmistatud toidule;
8) kuuma toidu säilitamine temperatuuril alla 65 °C;
9) nakatunud toidukäitlejad;
10) toidu ülejääkide kasutamine.
Enamiku toidumürgistusjuhtumite korral tekib ahelreaktsioon ning haiguste esine-
missageduse vähendamiseks tuleb see ahel murda.
Toidumürgistuse ahela murdmiseks on kolm peamist viisi: 1) toidu kaitsmine saastumise eest;
2) mis tahes toidus leiduvate bakterite paljunemise pidurdamine;
3) toidus leiduvate bakterite elimineerimine.
Toitu on võimalik saastumise eest kaitsta järgmistel viisidel : 1) toidu säilitamine kaetuna, kui võimalik;
2) sobimatute, puudulike seadmete mittekasutamine;
3) määrdunud lappide mittekasutamine, eelistada tuleks ühekordseid lappe;
4) toidu kätega puudutamine ainult hädavajaduse korral, eelistada tuleks pintsette,
taldrikuid ja kandikuid;
5)
toore ja keedetud-küpsetatud toidu eraldi hoidmine valmistamise, säilitamise ja
edastamise kõikidel astmetel. Toore ja kõrge riskiastmega toidu käitlemiseks ei
tohi kasutada samu seadmeid ja tööpindu;
6) putukate, loomade ja lindude toiduruumidesse tulemise või toiduga kokku-
puutumise vältimine;
7) toidu säilitamine närilistekindlates nõudes ning kaante tihedalt taassulgemine
pärast toidu kasutamist;
8) isiklike hügieeninõuete täitmine igal ajal;
9) kõik toidukäitlejad peavad kandma
sobivat kaitseriietust;
10) sööginõude või -
riistade toiduga kokkupuutuvate osade, näiteks noaterade
mittepuudutamine;
11) kõlbmatu toidu või toidujäätmete ja prügi eemaldamine viivitamatult ning
nende hoidmine lahus kõrge riskiastmega toidust;
24
12) sügavkülmutatud liha ja linnuliha sulamisvesi või kasutatud pinnad ja seadmed
ei tohi kokku puutuda kõrge riskiastmega toiduga;
13) õigete puhastus- ja desinfitseerimisprotseduuride kasutamine;
14) kätepesemisvalamute mittekasutamine toidu- või toiduseadmete pesemiseks
ning toidupesemisvalamute mittekasutamine käte pesemiseks;
15) toidu ostmine usaldusväärsetest allikatest.
Toidus sisalduvate bakterite paljunemise pidurdamine saab toimuda järgmis-
tel viisidel: 1) toidu säilitamine väljaspool ohutsooni. Toitu tuleks hoida temperatuuril alla
5 °C, näiteks külmkapis, või üle 63 °C, näiteks toidusoojendis;
2) hoolitsemine selle eest, et valmistamise ajal viibiks toit ohutsoonis (5–63 °C)
nii lühikest aega kui võimalik. Kõrge riskiastmega toitu ei tohiks hoida
köökide või serveerimispiirkondade temperatuuril, välja arvatud valmistamise
ajal või viivitamatu tarbimise korral;
3)
sobivate konservantide, nagu soola ja suhkru kasutamine;
4) kuivadel toiduainetel niiskuse absorbeerimise takistamine.
Toidus sisalduvate bakterite elimineerimise viisid on: 1) põhjalik
keetmine -küpsetamine;
2)
kuumtöötlemine, näiteks pastöriseerimine,
steriliseerimine või konserveeri-
mine.
Bakterite hävitamine nõuab alati nii sobivat temperatuuri kui piisavat aega. Nõutav
aeg ja temperatuur sõltuvad vastavast organismist. Näiteks
Clostridium
perfringens’i
spoorid taluvad kuumust palju paremini kui S
almonella bakterid.
Piima pastöriseerimine võib toimuda isegi nii madalal temperatuuril kui 63 °C
poole tunni jooksul, samal ajal kui köögiviljade
konserveerimine nõuab
tempera -
tuuri 121 °C kolme minuti jooksul. Ohutuse tagamiseks tuleb toidu
keskpunktis saavutada keetmis-küpsetustemperatuuriks 75 °C.
Toidu korrektne säilitamine. Toidu õige säilitamine on iga toiduainetööstuse
ettevõtte hügieenilise töö alus.
Suutmatus tagada rahuldavaid puhtuse, tempera-
tuuri, niiskuse ja varude asetsemise järjekorra tingimusi võib tekitada probleeme
kõlbmatu ja riknenud toidu näol, kaasa arvatud
hallitus , värvikaotus ning putukate
ja näriliste tekitatud
nakkused . Õiged säilitustingimused peaksid tagama toidu
toiteväärtuse, välimuse, maitse ja kõlblikkuse kõrgeima taseme. Säilituspiirkondi ei
tohi liiga täis kiiluda ning toidu ostmisel tuleb arvestada olemasoleva ruumiga.
Kõigi toidutarnete puhul tuleks kontrollida toidu värskust, temperatuuri, värvust,
lõhna, saastust ning pakendi ja markeeringu korrasolekut. Mis tahes probleemidest
tuleb teatada otsesele ülemusele. Kui võimalik, tuleb vältida välimise pakendi
toomist toiduvalmistamise piirkondadesse.
25
Kuivatatud toiduainete laod . Ruumid, mida kasutatakse kuivatatud ja konservee-
ritud toidu säilitamiseks, peaksid olema kuivad, jahedad, hästi valgustatud ja kahju-
rikindlad ning need peab hoidma puhtad. Toitu tuleks säilitada eemal kondensat-
siooniveega kaetud seintest ja torudest, samuti põrandast, sobivatel riiulitel, näiteks
roostevabadest torudest raamidel või ratastega kastides. Mahapillatud toit tuleb
viivitamatult ära koristada. Kõik
kaubad tuleks enne hoidlasse panekut üle vaadata.
Tavalisteks probleemideks on määrdunud alused, kahjustatud ja läbilaskvad paken-
did, roostetanud konservid ja
aegunud varud. Võimaluse korral tuleks puu- ja
köögivilju säilitada
kuivades jahedates hästi ventileeritud piirkondades, eelistata-
valt teistest toitudest eraldi. Toitu tuleks regulaarselt jälgida, sest hallitus levib
kiiresti.
Konserveeritud toidud. Konserveeritud toidu puhul on oht võrreldes toodangu
suurusega väga väike ning ohutuse kõrge tase jääb püsima, kui
1) ei kasutata kummis konserve;
2) jäetakse kõrvale tugevasti mõlgistunud, liitekohtadest
kahjustunud , aukudega
või roostetanud pakendis konservid;
3) varusid kasutatakse järjekorras.
Kiiresti rikneva toidu säilitamine. Kõrge riskiastmega ja kergesti
riknev toit võib
saastuda patogeensete bakteritega, mis võivad paljuneda ohtlike tasemeteni, kui
neid ei säilitata külmikus. Viimase aja trend lisandeid mitte kasutada tähendab, et
nüüd tuleb mõningaid toite, nagu avatud pudelis tomatikastet, säilitada külmikus,
samal ajal kui varem polnud selleks vajadust. Ühtki toitu ei tohi säilitada
temperatuuridel , mis tekitavad ohtu tervisele. Kõrge riskiastmega toite tuleb
säilitada temperatuuril alla 6 °C.
Külmikute õige kasutamine. Tavalised toidumürgistust tekitavad organismid pole
võimelised paljunema ja toksiine produtseerima temperatuuridel alla 5 °C. Veel
enam väheneb toidu riknemine bakterite ja hallituse tõttu. Temperatuuri kontroll on
selgelt kõige tähtsam tegur toidumürgistuse vältimisel. Sellepärast on oluline, et
toidukäitlejad saaksid oma töö efektiivsuse tagamiseks selgeid juhiseid külmikute
kasutamise kohta.
Asukoht. Külmikud tuleks asetada hästi ventileeritud paikadesse küttekehadest ja
otsese päikese käest eemale.
Ehitus. Külmikud tuleks
konstrueerida nii, et neid oleks hõlbus
puhastada . Sise-
katted ja riiulid peaksid olema mitteläbilaskvad ja mitteroostetavad. Ukseisolat-
siooni tuleb hoida heas korras ning seadet tuleb regulaarselt
hooldada .
Töötemperatuur. Seadmed peavad tavaliselt töötama temperatuurivahemikus 1–
4 °C. Külmiku kõige soojemasse ossa tuleks paigutada
statsionaarne termomeeter
ning temperatuuri tuleks kontrollida vähemalt kolm korda päevas.
Sulatamine ja puhastamine. Sulatada ja puhastada tuleks sageli vastavalt tootja
instruktsioonidele. Isegi automaatse sulatusega seadmeid tuleks puhastada vähe-
malt üks kord nädalas.
Pakkimine ja varude järjekord. Külmikuid ei tohi liiga täis kiiluda ning kunagi
26
ei tohi toitu asetada jahutusseadmete ette. Külmikus tuleks säilitada ainult kergesti
riknevaid toiduaineid, sh ka vaakumpakendeid ja pastöriseeritud lihakonserve.
Riknemise vältimiseks on oluline varude järjekord.
Kuum toit. Kuuma toitu ei tohi kunagi otse külmikusse panna, kui see tõstab juba
säilitatava toidu temperatuuri üle 5 °C. Samuti soodustab see kondenseerumist ning
seega ka saastumist.
Toidu saastumine ja katmine. Toorest toitu tuleb alati hoida lahus kõrge riski-
astmega toidust. Eelistatavamad on eraldi külmikud. Kui tegemist on ühe ja sama
seadmega , tuleb toores toit alati külmiku põhja asetada. Kuivamise, ristsaastumise
ja lõhna absorptsiooni vältimiseks tuleb toit kinni katta.
Töötajate väljaõpe ja kohustused. Kõik toidukäitlejad peavad saama juhiseid
külmikute õige kasutamise kohta, näiteks ust tohib hoida
avatuna ainult minimaalse
aja jooksul. Käitlemisettevõttesse saabunud toidu temperatuuri tuleb kohe saabu-
misel kontrollida.
Sügavkülmikud ja sügavkülmutatud toit. Kaubanduslikud sügavkülmikud peak-
sid töötama –18 °C või veidi madalamal temperatuuril. Sellel temperatuuril säilib
toit soovitud aja jooksul ilma igasuguse bakterite kasvuta. Ometi säilivad spoorid ja
patogeenid ning temperatuuri tõustes üle –10 °C hakkavad riknemist tekitavad
organismid, eriti hallitused ja pärmid, põhjustama probleeme. Töötajaile tuleks
jagada informatsiooni sügavkülmikute ja sügavkülmutatud toidu õige käsitsemise
kohta. Sügavkülmutatud toidu temperatuuri ja
pakendit tuleb enne mahalaadimist
kontrollida. Kui temperatuur on –18°C, tuleb toit panna sügavkülmikusse nii
kiiresti kui võimalik. Uus varu tuleb alati asetada olemasoleva toidu alla. Toitu ei
tohi säilitada üle sügavkülmiku laadimisjoone ning üle tootja poolt
soovitatud aja,
sest selle kvaliteet järk-järgult halveneb.
Sügavkülmutatud toidu sulatamine. Enamikku sügavkülmikust võetud toitudest
võib
keeta -küpsetada viivitamatult, kuid linnuliha ja suured lihatükid tuleb enne
keetmist-küpsetamist täielikult üles sulatada. Alati tuleks järgida tootja instruktsioone.
Toore liha/linnuliha sulatamine peab toimuma paigas, mis on täielikult eraldatud
teistest toitudest, mis võivad sulamisvedelikust saastuda. Seda paika ei tohi kunagi
kasutada keedetud-küpsetatud toitude mahajahutamiseks enne külmikusse panemist.
Sulatada on kõige parem temperatuuril 10–15 °C või sulatuskapis. Sulatada võib
vastavas mikrolaineahjus,
ehkki siin on tarvis olla äärmiselt ettevaatlik ebaühtlase
soojenemise ohu tõttu. Sulatusajad külmikutes varieeruvad tunduvalt sõltuvalt
temperatuurist. Näiteks 1,1 kg linnulihal kulub 0 °C saavutamiseks 70 tundi
temperatuuril 1 °C, 40 tundi temperatuuril 5 °C ja 13 tundi temperatuuril 10 °C. Enne,
27
kui kasutada sulatamiseks külmikut, on oluline teada külmiku temperatuuri ja aega,
mis kulub sügavkülmutatud kanaliha või mis tahes toidutoote sulatamiseks sellel
temperatuuril. Samuti tuleb olla äärmiselt ettevaatlik ristsaastumise vältimiseks.
Reeglid sügavkülmutatud linnuliha käsitsemiseks: 1) hoida lahus muudest toitudest;
2) sulatada täielikult jahedas ruumis. Linnuliha on keetmiseks-küpsetamiseks
valmis, kui liha ja jalad on painduvad ja ihuõõnes puuduvad jääkristallid;
3) eemaldada rupskid;
4) pärast liha sulamist hoida seda külmikus ja keeta-küpsetada 24 tunni jooksul;
5) keeta-küpsetada põhjalikult, täitematerjali aga eraldi;
6) kõik toore liha ja linnuliha valmistamiseks kasutatud nõud ja tööpinnad tuleb
põhjalikult puhastada ja desinfitseerida enne nende kasutamist kõrge riskiast-
mega toidu valmistamisel;
7) süüa kohe pärast keetmist-küpsetamist või kui linnuliha on tarvis külmalt
tükeldada, jahutada see kiiresti ning säilitada külmikus. Nagu kõigi lihaliikide
puhul tuleb see panna külmikusse säilima poolteise tunni jooksul;
8) vältida keedetud-küpsetatud linnuliha käega puudutamist.
Varude järjekord. Riknemise vältimiseks on oluline varude kasutamise järjekord,
tagamaks, et vanem toit võetakse kasutusele kõigepealt. Varude järjekord kehtib
kõigi toiduliikide puhul. Lühikese säilivusajaga kergesti riknevaid toite tuleb
külmikutes kontrollida iga päev, teiste toitude puhul piisab kontrollimisest üks kord
nädalas. Hea varude kasutamise järjekorra täiendavaks
eeliseks on varude õigete
koguste tagamise soodustamine. Varude kasutamise järjekorrast kinnipidamine on
muutunud palju lihtsamaks avamiskuupäeva koodi kasutuselevõtmisega. Toidu-
käitlejad peaksid kasutama oma koodi, leidmaks niisuguste toodete kättesaamis-
kuupäeva, mille puhul pole tarvis teada kasutamise lõppkuupäeva. Kunagi ei tohi
unustada reeglit “esimesena sisse, esimesena välja”. Enamik toite tuleb sildistada,
näitamaks “kõlblik kuni ...” või “parim enne ...” kuupäevi koos mis tahes spetsiaal-
setele säilitustingimustele
osutamisega , näiteks: “hoida külmikus”.
Markeeringut “kõlblik kuni” kasutatakse kiiresti riknevate toidukaupade puhul.
Niimoodi tähistatud toidukaupu ei tohi pärast näidatud tähtaega enam müüa ja
süüa, isegi allahinnatuna mitte. Ka tuleb kiiresti riknevaid toidukaupu nii
müügikohas kui ka hiljem kodus säilitada jahutatult või külmutatult, täpselt nii,
nagu näevad ette pakendile märgitud säilitamistingimused.
“Parim enne” on kasutusel selliste toidukaupade puhul, mis näidatud tähtaja
ületamisel võivad kaotada kas oma väljanägemises või maitseomadustes, kuid need
muutused ei too kohe endaga kaasa ohtu tervisele. Selliseid tooteid on lubatud
müüa pärast pakendil näidatud aega, kuid mitte lõpmata kaua ja keset sooja
müügisaali, vaid ikkagi lühiajaliselt ning ettenähtud hoiutingimustel. Kui “parim
enne” on möödas, siis peab müüja sellest ostjat teavitama ning
garanteerima toidu
ohutuse, tootja selle kauba kvaliteedi eest enam ei vastuta.
Minimaalset säilimisaega ei pea märkima värsketel puuviljadel, marjadel, äädikal,
soolal, suhkrul ja närimiskummil.
28
Toidu valmistamine. Hea hügieenitava järgimine toidu valmistamisel on oluline
tingimus toidumürgistuse vältimiseks. Toores ja kõrge riskiastmega toit tuleb
valmistada eri kohtades eraldi
puhaste seadmete abil. Toores toit tuleb põhjalikult
pesta eraldi valamus, mida ei kasutata nõude jms pesemiseks ning mis on
paigu -
tatud nõnda, et on välistatud kõrge riskiastmega toidu või puhaste nõude/seadmete
ristsaastumine. Pühkimiseks tuleb kasutada ühekordse kasutusega lappe. Toidu
kätega puudutamine tuleb viia miinimumini ning toitu ei tohi jätta sooja ja
niiskesse paika. Toidukäitlejad peaksid töötama loogiliselt ja plaanipäraselt,
tagamaks tööpindade hoidmist maksimaalselt puhastena. Mahapillatud toit ja
toidujäätmed tuleb viivitamatult ära koristada.
Keetmine-küpsetamine. Põhjalik keetmine-küpsetamine on oluline patogeensete
bakterite hävitamiseks, ehkki mõned neist toodavad toksiine, mis taluvad keetmist
vähemalt 30 minuti jooksul. Keetmist-küpsetamist võivad taluda ka spoorid. Sellal
kui mõningad töödeldud, konserveeritud ja villitud toidud vajavad vaid ülessoojen-
damist, nõuavad
toored ning suurem osa sügavkülmutatud ja jahutatud toitudest
põhjalikku keetmist-küpsetamist. Pärast keetmist-küpsetamist tuleks toit ära süüa
nii kiiresti kui võimalik.
Keetmine-küpsetamine mikrolaineahjus. Mikrolaineahjud on ohutu ja efektiivne
meetod toidu keetmiseks-küpsetamiseks ning soojendamiseks tingimusel, et järgi-
takse instruktsioone. Toidumürgistust põhjustavate organismide hävitamine põhi-
neb kõrgete temperatuuride ja piisava aja kombinatsioonil ning sellepärast on
oluline teada ahju võimsust (
vattides ), võimaldamaks piisavalt aega toiduohutust
tagavate temperatuuride tagamiseks. Toidu kuumutamiseks vajaliku temperatuuri
saavutamiseks tuleks seda kontrollida spetsiaalse termomeetriga. Vedelike puhul
võib olla vajalik
segamine ning keetmise-küpsetamise lõpetamisel ka seisuaeg.
29
Serveerimine . Serveerimisnõud tuleb säilitada korrakohaselt, eriti jäätisekulbid.
Laudadele asetatud toitu ei tohi teist korda kasutada. Kõik
taldrikud ja nõud peavad
olema puhtad ja kuivad ning neid nõude osasid, mis tõenaoliselt satuvad kontakti
kõrge riskiastmega toiduga, ei tohi kätega puudutada. Maitseaineid tuleb hoida
puhastes nõudes, vajaduse korral kaetuna. Tarbijatel ei tohi olla võimalust katmata
toitu kätega puudutada. Toit tuleks eelnevalt
pakkida , katta või kaitsta sirmidega.
Jaemüügiettevõtete lette ei tohiks kasutada toidu säilitamiseks või valmistamiseks.
Jahutamine. Külmutamisele kuuluv toit tuleks jahutada kiiresti ja asetada külmi-
kusse 1½ tunni jooksul pärast keetmist-küpsetamist. Parem on kasutada väiksemaid
lihatükke, sest need
jahtuvad kiiremini. Aeg keetmise-küpsetamise ja söömise
vahel, keetmise-küpsetamise ja jahutamise vahel, jahutamise ja serveerimise vahel
peab olema võimalikult lühike.
Toidu säilitamine. Säilitamine on toidu töötlemine eesmärgiga vältida või edasi
lükata riknemist ja hävitada või pidurdada patogeenseid mikroorganisme, mis
võivad muuta toidu tarbimiskõlbmatuks.
Toitu on võimalik säilitada, kasutades:
1) kõrgeid
temperatuure (pastöriseerimine, steriliseerimine, keetmine, küpsetamine,
konserveerimine jne);
2) madalaid temperatuure (jahutamine, külmutamine);
3) dehüdratatsiooni (niiskuse eemaldamine);
4) vaakum- ja
modifitseeritud pakendamist.
30
3. TOIDUMIKROBIOLOOGIA ALUSED 3.1. SISSEJUHATUS Toiduainete
mikrobioloogia on üks olulisemaid rakendusmikrobioloogia harusid,
mis hõlmab nii toiduainete ohutu tootmise, säilitamise ja toiduainete riknemise
problemaatikat kui ka mikroobse fermentatsiooni abil erinevate toiduainete ja
jookide tootmist. Naturaalsete toiduainete töötlemisel kasutatakse erinevaid mikro-
organisme, lähtudes nende ensümaatilistest omadustest ja ainevahetusradade tüüpi-
dest, ning saavutatakse nii toiduainete parem säilimine kui ka toidulaua
rikastamine uute toodetega (Heinaru, Talpsep, 2001).
Kõik toiduained sisaldavad vähemal või suuremal arvul mikroorganisme. Mikroo-
bide kasv ja areng toiduainetes võib põhjustada nii majanduslikke probleeme (toi-
duainete riknemisest tulenev kahju) kui ka ohtu tarbija tervisele (toidutekkelised
infektsioonid ja intoksikatsioonid). Eesti Vabariigis on toidutoorme kui ka töödel-
dud toidutoodete mikrobioloogilise ohutuse tagamiseks kehtestatud toiduseadusega
mikrobioloogilised nõuded. Mikroobide arvukus
tootes sõltub keskkonnast, kust
toidutoore on saadud, mikroobide arvukusest toidutoormes, sanitaarsetest tingimus-
test toidu tööstuslikul töötlemisel ja valmistoodangu pakendamisel ning valmis-
toote säilitamise tingimustest. Toidus esinevad mikroorganismid on nende pato-
geensuse ja nakkusohtlikkuse alusel jaotatud nelja rühma:
1) toidu kvaliteeti ja mikrobioloogilist stabiilsust iseloomustavad mikroorganismid
(
piimhappebakterid , pärmid, teatud hallitusseened jne);
2) sanitaarnäitlikud mikroorganismid ehk indikaatororganismid (
coli-
laadsed bak-
terid, termotolerantsed
coli-laadsed,
E. coli, sulfitit
redutseerivad klostriidid jt);
3)
tinglikult patogeensed
mikroobid (
Staphylococcus aureus, Bacillus cereus ,
Proteus spp., Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus);
4)
otseselt tervisele ohtlikud mikroorganismid (
Salmonella spp., Shigella spp.,
Vibrio cholerae, Clostridium botulinum, Campylobacter jejuni, Mycobacterium
tuberculosis).
Käesolev peatükk käsitleb toidumikrobioloogia aluseid lihahügieeni seisukohalt
lähtudes. Põhirõhust hoolimata on alljärgnev kehtiv enamikule toidukategooriatele,
seda eriti mõistete, üldiste põhimõtete ja rakendatavate mikrobioloogiliste meeto-
dite suhtes.
31
Lihaga seonduvalt jaotatakse mikroorganismid põhiliselt kahte kategooriasse. Esi-
mese kategooria moodustavad liha riknemist põhjustavad mikroorganismid. Teise
kategooriasse kuuluvad mikroobid, mis võivad inimestel, kes liha käitlevad või
tarbivad, kutsuda esile toiduinfektsioone. Kuigi mõlemasse kategooriasse kuulu-
vaid mikroorganisme saab laboratoorselt
isoleerida , ei ole olemas universaalset
isoleerimise
tehnikat , mis võimaldaks kõikide proovis esinevate mikroorganismide
üheaegset määramist. Toidus esinevate mikroorganismide uurimiseks on kasutusel
väga palju erinevaid söötmeid ja
meetodeid . Osa meetodeid on rahvuslike või
rahvusvaheliste ametite ja organisatsioonide poolt
standardiseeritud (nt
ISO –
International Standards Organisations). Need on enamasti mõeldud kasutamiseks
referentsmeetoditena, seetõttu leiavad harva rutiinselt kasutamist ning järgnevas
materjalis neid ei käsitleta. Traditsioonilisi kultiveerimise tehnikaid saab täiendada
või
asendada mitmete teiste meetoditega, mis enamasti võimaldavad analüüside
tulemuste kiiremat registreerimist. Uuemad meetodid on otsene epifluorestsents-
filtertehnika (
DEFT – Direct Epifluorescent Filter Technique); adenosiintrifosfaadi
(ATP) ja nukleiinhapete määramisel ja elektrijuhtivuse muutumisel põhinevad
tehnikad . Paljud immunoloogilised testid on saadaval kittidena ning on täielikult
või osaliselt
automatiseeritud . Kiirtestide kõige
suuremaks puuduseks on see, et ei
saa isolaate, mistõttu ei ole võimalik rakendada täpsemaid epidemioloogilisi
uuringuid .
Selgelt ebapraktiline on rakendada kõikide rümpade ja lihatoodete mikrobioloo-
gilist uuringut ning seetõttu on
proovide võtmisele vajalik läheneda struktureeritult.
Proovide võtmine ja analüüsimine on oluline osa kvaliteedi kindlustamise
programmis .
Liha mikrobioloogiliseks uurimiseks võib kasutada otseseid tahketele söötmetele
kultiveerimise tehnikaid. Need on sobilikud juhtudel, kui tegemist on suhteliselt
suure mikroobide arvuga (tavaliselt >102
grammis ) ja määratakse üldist kontami-
nantide taset (toidu riknemist põhjustavaid baktereid või rooja mikrofloorat).
Otsesed külvitehnikad ei sobi enamasti toidumürgistusi põhjustavate bakterite
kultiveerimiseks. See on tingitud toidupatogeenide sagedasest madalast arvukusest
toiduainetes, nt üks
rakk 25 g toote kohta. Toidupatogeenide kultiveerimise tehni-
kad sisaldavad sageli eelrikastamist või “taaselustamist”, selektiivset rikastamist
puljongis ning kultiveerimist selektiivsetele agaritele, millele järgneb tüüpiliste
kolooniate identifitseerimine. Tüüpiliste kolooniatega tehakse täiendavalt
biokee -
milised või muud testid, lähtuvalt metoodikast. “Taaselustamisel” tuleb arvestada
sellega, et kahjustatud rakud on tundlikud selektiivsete ainete ja inhibiitorite suhtes.
“Taaselustamine” võib hõlmata proovi inkubeerimist mitteselektiivses puljongis, nt
puhverdatud peptoonvees, või söötmetesse kaitsvate komponentide lisamist, mil-
leks on näiteks püruvaadid ja munarebu.
Rikastussöötmed on vajalikud juhtudel, kus määratakse patogeenseid mikroorga-
nisme, mida on suhteliselt vähe võrreldes teiste proovis sisalduvate bakteritega.
Rikastussöötmetes sisalduvad
toitained on aga otseselt kättesaadavad
konkurents -
mikrofloora esindajatele. Konkurentsmikrofloorat pärsitakse keemiliste inhibiitori-
tega, nt naatriumseleniidiga, mis lubab
inkubatsiooni ajal eelistatavalt salmonel-
32
ladel paljuneda. Psührofiilsete mikroorganismide, nt
Listeria monocytogenes’e
ja
Yersinia enterocolitica puhul on teiseks võimaluseks inkubeerimine madalatel
temperatuuridel. Selle meetodi puuduseks on sihtmärk-organismide aeglane kasv.
Toidus madalal arvukusel esinevate patogeenide korral rakendatakse teise
etapina selektiivsetele tahketele söötmetele külvamist.
3.2. PROOVIDE VÕTMINE Hoolimata mikrobioloogiliste meetodite arenemisest ja täpsusest ei ole neid
võimalik efektiivselt kasutada ilma proovide kogumise plaanita. Selline plaan
sisaldab õiges koguses proovide võtmist, nende mikrobioloogilist kontrolli ning,
arvestades kehtivaid piirnorme ja saadud tulemusi, õige otsuse langetamist proovi
kohta. Proovivõtuplaanid peaksid tulenema parimatest kättesaadavatest
mikrobio -
loogilisest andmetest ja põhinema statistikal. Eeltoodut arutatakse detailselt
ICMSF-i (
International Commission on Microbiological Specifications –
Rahvusvaheline Toiduainete Mikrobioloogiliste Spetsifikatsioonide Komisjon)
poolt. Plaani tüüp ja selle rangus sõltub produkti ohtlikkusest. Ettevõttesiseseks
kvaliteedi kontrolliks on toore liha ja linnuliha jaoks arendatud kolme tunnusega
plaanid. Need sisaldavad antud partiiga seonduvat spetsiifilist proovide arvu (n) ja
plaatidel kindlaks määratud kolooniate arvu
piirnormi (M), kus iga
proov , mis
ületab ettenähtud kolooniate määra, tähendab seda, et partii ei vasta kehtestatud
nõuetele või vajab täiendavat
uurimist . Sellist tüüpi proovivõtu plaanide puhul on
hea kvaliteet ja piiripealne aktsepteeritud kvaliteet eraldatud üksteisest väärtustega
alla maksimaalselt lubatud piirväärtust (m), mida üksikute proovide puhul on
lubatud pisut ületada (kuid mitte M-piirnorme). Aktsepteeritud proovide numbrit
tähistatakse c-ga. Igast partiist on nõutav 5 proovi. Eespool kirjeldatud meetod
annab rohkem kriitilist informatsiooni kui tööstustes igapäevaselt kasutusel olev
süsteem, kus on antud vaid üks
piirnorm teatud proovide arvu kohta ühe päeva-
toodangu piires.
Mõlemad süsteemid on loodud liha üldise mikrobioloogilise kvaliteedi hinda-
miseks ja isegi kui patogeenide määramine on kaasatud (teatud klientide soovil), ei
garanteeri see nendega
saastatuse olematust juhtudel, kui tegemist on kogu partii
toodanguga. Rakendades tapamajades toimivat HACCP süsteemi – ohtude analüüsi
läbi kriitiliste kontrollpunktide tõrje, peaks rümpade mikrobioloogiline kvaliteet
jääma enamasti lubatud
piiridesse . Kuigi lõpptoodete mikrobioloogiline kontroll on
ohtude ennetamisel töötlemise jooksul sobimatu, on sellest kasu toodete mikro-
bioloogilise saastatuse tendentside näitamisel teatud ajaperioodi jooksul. Informat-
sioon toodete mikrobioloogilise saastumise tendentsidest on vajalik mõningate
töötlemisprotsesside muutmiseks.
Liha mikrobioloogiline saastatus on enamasti pinnapealne ning oma jaotuselt
ebaühtlane, mis loob proovide võtmise vajaduse erinevatest rümba piirkondadest.
Proovide võtmise eesmärgid võivad olla erinevad. Üheks eesmärgiks võib olla eri-
nevate tapmisprotsesside hügieeni hindamine (naha- ja sisikonna eemaldamine jm).
Proove võetakse ka toodete säilivusaja ja patogeenidega saastatuse hindamiseks.
33
Võetava proovi tüüp sõltub sellest, millist tüüpi mikroorganisme otsitakse, ja
bakterite paiknemise iseärasustest rümba välispinnal. Tuleb arvestada asjaoluga, et
uuritavad mikroorganismid võivad olla tugevalt kinnitunud toote pinnale, mis loob
vajaduse proovimaterjali eriliseks eeltöötlemiseks. Rümbaliha proovide võtmisel
tuleb koetükikesi lõigata rümba erinevatest piirkondadest ning proovi eeltöötle-
misel kasutada nt
stomacher-tehnikat, et vabastada pinnale kinnitunud mikroobid.
Proove võib analüüsida eraldi või liitproovina. Siseelundite
uurimisel võetakse
tavaliselt
proovid nii kudede pinnalt kui seest.
Kuigi selline meetod on rümpade uurimiseks ideaalne
, pole nende välispinnale
lõigete tegemine alati töötleja poolt aktsepteeritav ning selle asemel kasutatakse
puuteproovi ehk tampooniproovi tehnikaid. Tavaliselt kasutatakse selleks puuvil-
last otsikuga pulgakesi ja steriilset raami, mis piiritleb soovitud proovivõtuala,
näiteks 50 cm2
. Lamba ja sea rümpadel tuleb proove võtta kahest või enamast
punktist (kaasa arvatud reie- ja rinnapiirkond) ning veise rümpadel kolmest kohast
(reie-, kubeme- ja kaelapiirkonnast). Edasine juhend proovide kogumiseks on
dokumenteeritud ICMSF poolt (1986). Puuteproovide võtmise põhipuuduseks on
see, et rümpade pinnal on baktereid suhteliselt vähe ja nad on jaotunud ebaühtla-
selt. Nagu lõikeproovide korral näitavad tampooniproovide vastused vaid lihakeha
piirkondlikku saastatust, mitte aga üldist rümba mikrobioloogilist kontamineeritust.
Suuremaid alasid saab uurida, võttes proove
niisutatud käsnaga, mis ei tohiks aga
sisaldada inhibeerivaid aineid. Selline tehnika võimaldab määrata patogeenide
olemasolu, mida esineb rümbal väga vähesel määral.
Vastupidiselt loomarümpadele on linnurümbad küllaltki väikesed ja tihti võetakse
proov vaid ühelt kohalt. See hõlmab väikese osa kaelanaha (umbes 5 g) eemalda-
mist, sest see on üks kõige enam saastunud piirkondi, ning samas ei mõjuta selle
eemaldamine rümba lõplikku välimust ebasoodsalt. Kaelanaha proovi uurimise
ajaks võib rümp jääda töötlusliinile. Kaelanaha mikrobioloogilise kontaminatsiooni
uurimine võimaldab hinnata ka erinevate töötlemisprotsesside mõju rümba
hügieenile. Nahaproovide uurimisel tuleb kasutada destruktiivseid tehnikaid (nt
stomacher-tehnika).
Kaelanaha proovi puuduseks on fakt, et see annab ülevaate
vaid väikesest rümba osast ning organismid, mida esineb vähe või ebaühtlaselt,
näiteks salmonellad, võivad jääda avastamata.
Põhiline
alternatiiv kaelanaha proovile on kogu rümba loputamistehnika. Selleks
tuleks kogu rümp töötlemisliinilt eemaldada ja asetada steriilsesse plastikaatkotti
koos lahjendusvedelikuga, mida peab olema vähemalt 500 ml. Seejärel
kott sule-
takse ja seda loksutatakse hoolikalt, nagu on kirjeldatud Barnesi poolt. Suspen-
siooni kasutatakse mikrobioloogilisteks analüüsideks. Kuigi loputusmeetod annab
ülevaate kogu rümba saastatusest, nii pinnalt kui seestpoolt, on suhteliselt ebatõe-
näone, et uuritavasse vedelikku satuvad tugevasti rümba välispinnale kinnitunud
organismid. Lisaks sellele on loputamistehnika ka liialt töömahukas ja sobimatu
kalkunirümpadele nende suuruse tõttu.
Proovide võtmiseks külmutatud lihast, näiteks lihaplokkidest ja mehaaniliselt
konditustatud lihast, võib kasutada spetsiaalse koguriga elektripuuri. Külmutatud
34
linnuliha rümpasid jahutatakse üle öö ja proovid võetakse sarnaselt värske rümba
proovivõtu tehnikaga.
Liha ja linnuliha lõigatud jaotustükkidelt võetakse proovid värskelt lõigatud tükki-
de pindadelt. Töödeldud toodete (nt küpsetatud) on kasulik määrata mikroorganis-
mide olemasolu toodete keskpunktis ja proovid võetakse sel juhul steriilse korgits-
puuriga
. Pärast töötlemist võivad tooted kontamineeruda ristsaastumise tulemusena
ning sellisel juhul on vajalik destruktiivne pinnaproovide uurimine.
3.3. TOIDU JA VEE UURIMISEKS KASUTATAVAD MIKROBIOLOOGILISED MEETODID Käesolev teema annab põgusa ülevaate teatud põhimeetoditest, mida kasutatakse
mikrobioloogia laborites inimtoiduks ettenähtud toidu ja vee uurimiseks.
Külviviisid. Tahket või vedelat söödet võib inokuleerida (külvata), kasutades
steriilset vatipulka või võttes väikese koguse vedelikku külviaasale. Kui on vaja
kindlaks määrata teatud hulga mikroorganismide olemasolu, siis traditsioonilised
plaadile külvamise tehnikad näevad ette mõõdetud koguse uuritava suspensiooni
kandmist plaadile, kas eelnevalt sulatatud
agari valamist plaadile või vastava
(mõõdetud) koguse külvamist tahkete söötmete pindadele. Need on töömahukad ja
materjalikulukad meetodid. Kulukust on võimalik vähendada sellega, et proovi iga
lahjendust ei külvata kogu plaadi pinnale, vaid kantakse sellest neljandikule.
Majanduslike kulude vähendamiseks on modifitseeritud või välja töötatud uued
meetodid. Need sisaldavad näiteks spiraalkülvajaid, mis doseerivad eelnevalt sööt-
metega täidetud plaatidele järjest alanevas koguses suspensiooni ning külvavad
selle spiraalselt plaadi pinnale, võimaldades saavutada palju nõrgemaid lahjendusi,
kasutades seejuures vähem
plaate . Eeltoodud
protseduur on automatiseeritud. Kui
samast proovist soovitakse leida erinevaid mikroorganismide gruppe, kasutades
selleks erinevaid söötmeid, säästab eeltoodud külvitehnika vaid pisut aega või siis
üldsegi mitte. Spiraalkülvamise meetod on tõhus siis, kui seda kasutatakse
kombineeritult automaatse kolooniate lugemise seadmega.
Selektiivsööde. Selektiivsöötmetes kasutatakse segavate mikroobide kasvu takista-
vaid kemikaale
. Enterobakterite (nt salmonellad ja
E. coli) puhul on kasutusel
sapisoolad. Grampositiivsete bakterite kasvu takistamiseks lisatakse söötmetele
briljantrohelist ja kristallvioletti. Selektiivsuse tagamiseks lisatakse teatud söötme-
tele erinevaid antibiootikume, näiteks tsefaloridiini, klooramfenikooli, tsüklohek-
simiidi ja streptomütsiini. Söötmetele lisatakse ka teisi kemikaale, nagu
liitium -
kloriidi,
tallium (I)atsetaati jne. Samal eesmärgil võib kasutada ka osmootselt
aktiivseid komponente, nagu glütserool ja
naatriumkloriid . Näited söötmetest, mis
nimetatud komponente sisaldavad, on toodud tabelis 3.1. Hallitusseente välista-
miseks ning aeglasemalt arenevate seente kasvu soodustamiseks kasutatakse
dikloraani (
dichloran). Selektiivsöötmed, mis toetuvad üksnes inhibiitoritele, on
väga harva piisaval määral efektiivsed, tagamaks konkurentsmikrofloora pärssi-
mist. Sihtmärk-organismide nähtavaks muutmiseks sisaldavad mitmed söötmed
35
indikaatorsüsteeme. Näitena võiks tuua VRBL-agari, kus laktoos fermenteeritakse
coli-laadsete bakterite poolt, millega kaasneb happe
produktsioon . See muudetakse
nähtavaks pH-indikaatori fenoolpunase poolt, mis muudab
kolooniad punaseks.
Alternatiivseks indikaatorsüsteemiks on rauasoola ja naatriummetabisulfiti
kombi -
natsiooni kasutamine söötmetes, mis tänu sadestunud raudsulfitile muudab
kolooniad mustaks. Paljud söötmed kasvatavad spetsiifilise välimusega
kolooniaid ,
kuid sellegipoolest tuleb nende kuuluvuse identifitseerimiseks teha täiendavaid
katseid, näiteks gramvärvimine, koagulaas- ja katalaastest,
indool - ja oksüdaastest.
Tabel 3.1. Üldkasutatavatesse söötmetesse lisatavad selekteerivad ained
Sööde (koloonia välimus)
Selekteeritavad organismid
Aktiivsed ained ja inkubeerimise
temperatuurid
Baird-Parkeri sööde
Staphylococcus aureus kaaliumtelluriit, liitiumkloriid,
must
munakollane,
sulphamezathine
37 ºC
VRBL-
agar coli-laadsed
bakterid
sapisoolad, kristallviolett,
(lillakaspunane)
neutraalpunane 30 ºC või 37 ºC
XLD
Salmonella spp. naatriumdeoksükolaat (sapisool)
keskelt punane või must
naatriumtiosulfaat, raudtsitraat,
ksüloos, laktoos, sukroos, lüsiin,
fenoolpunane, 37 ºC
TSC
Clostridium perfringens D-tsükloseriin, naatriumsulfit
keskelt must
37 ºC (anaeroobselt)
DG18
pärmid ja hallitused
klooramfenikool, dikloraan,
glütserool 20–25 ºC
MSA
mikrokokid ja stafülokokid
mannitool , fenoolpunane,
vastavalt lillad ja kollased
naatriumkloriid 25–37 ºC
CFC
Pseudomonas spp. tsefaloridiin, futsidiin, tsetrimiid
20–25 ºC
STAA
Brochothrix thermosphacta streptomütsiin, tallium(I)
atsetaat ,
tsükloheksimiid 20–25 ºC
Taaselustamistehnikad tahketele söötmetele. Soikeseisundis ehk subletaalselt
kahjustatud organismide avastamiseks kasutatakse selektiivset kõige tõenäolisema
arvu meetodit (MPN –
Most Probable Number)
või kvalitatiivseid rikastamise
meetodeid. Eeltoodud meetodite rakendamiseks on tahkeid söötmeid väga raske
kohandada . Üheks
meetodiks on mikroorganismide külvamine mitteselekteerivale
söötmele. Seejärel inkubeeritakse söödet mõne tunni jooksul (bakterite taastu-
miseks) ja järgnevalt lisatakse (enne inkubeerimise jätkamist) ühesugune kogus
sulatatud selektiivset agarit, mis sisaldab topelt koguses selekteerivaid inhibiito-
reid. Taaselustamiseks võib kasutada veel ka membraanfiltreid. Näitena võib
esitada
Andersoni ja Baird-Parkeri meetodit
E. coli detekteerimiseks. Analüüsitava
toidu lahjendatud
suspensioon külvatakse trüptoon-
soja agarile asetatud memb-
raanfiltri ülemisele pinnale. Pärast neljatunnist inkubeerimist 37 ºC juures aseta-
takse filter trüptoon-soja-
sapi agarile ning jätkatakse inkubeerimist 42 ºC juures
18 tundi. Membraanfiltrite kasutamise negatiivseks küljeks on nende küllaltki
kõrge hind.
Rikastamismeetodid. Rikastamismeetodit kasutatakse kõige sagedamini juhtudel,
kui proovimaterjalis arvatakse olevat väga väike kogus sihtmärk-mikroorganisme
36
või on proovis
arvatavalt suures koguses teisi baktereid (konkurentsmikrofloora).
Teatud juhtudel näevad metoodikad ette kaheetapilist rikastamist (tabel 3.2).
1. Eelrikastamine mitteselektiivsel söötmel, et võimaldada kahjustunud rakkudel
taastuda . Toimub sihtmärk-organismide ja kõikide proovis olemasolevate mik-
roobide paljunemine.
2. Selektiivne rikastamine, et võimaldada uuritavate organismide kasvu ning
samaaegselt inhibeerida konkureerivaid mikroorganisme puljongis. Rikastamis-
protseduurile järgneb sihtmärk-organismide
isoleerimine selekteerival agaril.
Viimaseks etapiks on kahtlustatavate kolooniatega teostatavad biokeemilised ja
seroloogilised testid.
Tabel 3.2. Isoleerimise nõuded patogeenidele
Mikroorganism (id) Eelrikastamine Rikastamine
Salmonella spp. + +
Verotoksikogeenne
E. coli + +
Campylobacter jejuni/coli – +
Yersinia enterocolitica mittekohustuslik +
Listeria monocytogenes – +
Inkubeerimise tingimused. Pärast tassidele külvamist peab võimaldama sihtmärk-
organismidele parimad
kasvutingimused . Alati on võtmefaktoriks inkubatsiooni-
temperatuuri kontroll, seda nii otsitavate organismide kasvu soodustamiseks kui
mittesoovitavate organismide pärssimise seisukohalt. Soovitud tulemuste saa-
miseks on oluliseks faktoriks ka optimaalne gaasiline keskkond. Kui soovitakse
aeroobseid kasvutingimusi, peab tagama hapniku takistuseta juurdepääsu. Seega ei
tohiks liiga tugevalt sulgeda ei plastikaatkotte ega anumaid, mille kasutamist
metoodika eeldab. Kommertsiaalselt on olemas Petri tassid anaeroobseks ja
aeroobseks kasutamiseks. Kui otsitavateks bakteriteks on obligatoorsed anaeroobid
või
mikroaerofiilid , siis tuleb võimaldada neile sobiv gaasikeskkond. Anaeroobseid
tingimusi on võimalik saavutada, kasutades tihedalt suletavaid anaerostaate, kuhu
võib lisada vastavat gaasikeskkonda loovaid reagentide kotikesi. Kasutusel on ka
spetsiaalne
aparatuur või termokapid, mis on ühendatud vajaminevate gaaside
balloonidega ning gaasikeskkond tagatakse automaatselt. Mitteselektiivsel söötmel
on võimalik saavutada mõne mikroobigrupi selektiivset loendamist, modifitseeri-
des inkubatsiooni temperatuuri ja atmosfääri koostist. Näiteks mikroobide loenda-
mist, mis kasvavad aeroobsetes tingimustes 1 °C juures, põhjustades külmutatud
toiduainete aeroobset riknemist, ning 55 °C juures anaeroobselt kasvavate, konser-
veeritud lihatoodete termofiilset riknemist põhjustavate bakterite loendamist.
3.4. MIKROORGANISMIDE LOENDAMINE Otsekülvamise meetodid. Nende meetodite põhimõtteks on üle lugeda pesa
moodustavate ühikute (CFU
– colony forming units )
arv, mis võib koosneda kas
ühest või mitmest organismide kogumist. Meetod eeldab suspensioonilahuse
olemasolu ja
seeria kümnekordsete lahjenduste tegemist ning lahjenduste kandmist
agarplaatidele. Pärast inkubatsiooni otsitavate mikroorganismide jaoks ettenähtud
37
temperatuuridel loendatakse iseloomulike tunnustega kolooniad. Tõelise (proovis
tegelikult esindatud) CFU numbri saab tuletada loendatud kolooniate arvust,
arvestades inokulaadi mahtu ning lahjendusastet. Seda meetodit kasutatakse
tavaliselt mikroobigruppide loendamiseks, mida harilikult leitakse >100 g–1 või
cm2 kohta. Et enamik patogeene esineb sellest madalamal tasemel, siis kasutatakse
MPN-meetodit suhteliselt harva. Erandiks on
Staphylococcus aureus’e arvukuse
määramine, seda eriti töödeldud (kuumutatud või fermenteeritud) lihatoodetest.
Mõningatel juhtudel, kus patogeene esineb tõenäoliselt palju, võib paralleelselt
rikastamismeetodiga kasutada otsekülvi tehnikat (nt listeeriate loendamisel töödel-
dud lihast pärast pikaaegset jahutamist või kampülobakterite loendamisel linnu-
lihast). Otsekülvamise meetodit kasutatakse kõige sagedamini tegeliku mikroobide
arvu hindamiseks. Tavaliselt tehakse seda mitteselektiivsel agaril, rakendades
inkubeerimist 25–30 °C juures aeroobsetes tingimustes. Otsekülvamise mõistega
paralleelselt on kasutusel olnud mitmed sünonüümid, kuid sõltumata mõistest on
selge, et antud meetodit (meetodeid) kasutades jäävad paljud mikroobid
avastama -
ta, kuna nad ei ole vastavates tingimustes (gaasikeskkond, temperatuur, söötmete
koostis) võimelised arenema ning paljunema. Otsekülvamist plaatidele kasutatakse
veel mikroobide loendamiseks, mis on olulised toidu riknemisel ja/või fermentat-
sioonil. Näitena võib esitada pseudomoonased, piimhappebakterid,
Brochothrix
thermosphacta, mikrokokid ja indikaatororganismid, nagu enterobakterid või
coli-
laadsed bakterid, mille olemasolu viitab fekaalsele saastumisele või kuumtööt-
lemise ebaõnnestumisele.
Kõige tõenäolisema arvu meetodid (
MPN – Most Probable Number): Need mee-
todid kasutavad vedelsöödet ja on sisuliselt rikastamismeetodid, mida on kvantita-
tiivseks muutmise eesmärgil modifitseeritud (nt vähesel arvul esinevate
indikaator -
või patogeensete mikroorganismide loendamiseks). Võrreldes plaadilt lugemise
meetoditega (
plate count methods) on eeltoodud meetodid vähem täpsed, kuid
võimaldavad määrata proovimaterjalis väga vähesel hulgal
esinevaid mikro-
organisme. Tavaliselt valmistatakse ette kümnekordsed proovilahjendused, mida
lisatakse 0,9 ml või 9 ml söötme kohta vastavalt 0,1 ning 1 ml. Iga proovi
lahjenduse kohta tuleb teha 3–5 paralleelseeriat ehk 3-5 proovi igast lahjendusest.
Pärast inokuleeritud söötmekatsutite inkubeerimist määratakse iga proovi puhul
sihtmärk-organismide olemasolu. Kõige tõenäolisema arvu määramisel kasutatakse
tõenäosustabeleid. Seda meetodit kasutatakse sageli fekaalsete indikaatorbakterite
(
coli-laadsed) arvukuse määramisel. Positiivsete proovidega katsutitesse
moodus -
tub hapet ja gaasi. Gaasi olemasolu on määratav gaasimullide tekkega klaastoru-
kestesse, mis on eelnevalt katsutitesse lisatud.
Alternatiivsed meetodid.
1. Adenosiintrifosfaadi (ATP) määramise meetodid. Kõik rakud sisaldavad
ATP-d ja selle määramine
põhineb ensüüm lutsiferaasi poolt katalüüsitava lutsife-
riini poolt valguse produktsioonil, mis võimaldab ATP olemasolu ning kogust
registreerida.
Reaktsioon toimub minutitega ja seda võib kasutada kiire hügieeni-
testina, kus ATP esinemine toidutöötlusruumides on ebaadekvaatse sanitatsiooni
(puhastamine, pesemine, desinfitseerimine) selgeks näitajaks. ATP sondeerimist on
38
võimalik kasutada ka bakterite arvukuse määramisel. Selle meetodi puhul lüüsi-
takse kõigepealt loomse või taimse päritoluga rakud ning inaktiveeritakse vabane-
nud ATP. Seejärel lüüsitakse bakterirakud ning määratakse kindlaks nendest vaba-
nenud ATP, mille kontsentratsioon on proportsionaalne analüüsitavas piirkonnas
olnud bakterite arvuga.
Seda meetodit kasutatakse ka rümpade ja lihatoodete hügieenilise seisundi
hindamiseks, kaasa arvatud juhtudel, mil tegemist on väga madala bakterite
arvukusega. Et tegemist on ATP määramisega, siis on tulemuste reprodutseeritavus
selle meetodi kõige suuremaks puuduseks. Kaubanduses on saadaval mitmeid
hügieeni kontrollsüsteeme, mis põhinevad ATP kindlakstegemisel (Unilite®,
Systemsure®, Biprobe® ja Hylite®).
2. Elektritakistuse muutumisel baseeruvad meetodid ehk impedantsmeetodid.
Impedantsmeetodid võimaldavad suhteliselt kiiret mikroorganismide kindlaks-
tegemist ning kvantifitseerimist. Meetodi põhimõtteks on mikroobide algse
meta -
boolse aktiivsuse mõõtmine ning inkubatsiooni ajal bakterite poolt esile kutsutud
söötmete elektriliste omaduste muutuste kvantifitseerimine. Selle meetodiga kaas-
neb selge pöördeline lineaarne korrelatsioon proovis esinevate mikroorganismide
arvu ning nende kindlaksmääramise aja (aeg, mis kulub impedantsi kõvera tek-
keks) vahel. Seda tehnikat on võimalik automatiseerida ja nii saab üheaegselt
käidelda mitu proovi. Kaubanduses on saadaval eri süsteeme (Bactometer®, Bac
Trac ®, Malthus®, Rabit®). Kasutades õiget selektiivsöödet ja ettenähtud inkubat-
sioonitingimusi, on võimalik impedantsmeetodiga määrata mitme toidupatogeeni
arvukust toidus (nt salmonellad,
E. coli, S. aureus ja listeeriad). Analüüsitavas
proovis esinevate elusate organismide loendamiseks tuleb interpoleerida (funkt-
siooni antud väärtuste alusel tema vahepealseid väärtusi
arvutama ) eelnevalt
määratud elusrakkude arvukuse (
TVC – Total Viable Count) standardkalibreerimise
kõverat
versus sihtmärk-organismi detekteerimise aeg.
3. Immunoloogilised meetodid. Need meetodid on väga kõrge spetsiifilisusega,
põhinevad antikehade sidumisel
bakteriraku pinna
spetsiifiliste antigeenidega ja on
enamasti kasutusel patogeensete bakterite identifitseerimiseks.
Seroloogilisi meetodeid kasutatakse:
1) tahkel agarsöötmel kasvavate bakterikolooniate testimiseks, näiteks
esemeklaasil
teostatav aglutinatsioonitest
salmonellade jaoks, millel eristatakse rohkem kui
3000 serotüüpi;
2) organismide avastamiseks kas selektiivsetest või mitteselektiivsetest vedelsööt-
metest, näiteks kasutades
ELISA -meetodit, mille puhul on tegemist erinevate
võimalike versioonidega ning kommertsiaalselt on saadaval ka mitmed ELISA-
kitid. ELISA annab tulemuse, mis on võrreldav konventsionaalse kultiveerimise
meetodiga, kuid on vähem efektiivne suurel arvukusel konkurentsmikrofloora
esinemisel. Valepositiivsed tulemused võivad tekkida juhtudel, kus teatud pinna-
antigeenid on samased nii patogeenidel kui mittepatogeenidel (nt salmonellad ja
tsitrobakterid). ELISA-t saab kasutada ka
Bacillus cereus’e
, Clostridium
botulinum’i
, E. coli (kaasa arvatud verotsütotoksilised tüved) ja
Staph. Aureus’e
toksiinide avastamiseks.
39
Immuno-capture – rikastamiskultuuri on täiendatud spetsiifiliste antikehadega
seondatud magnetosakestega, mida kasutatakse näiteks
E. coli serotüüp
O157,
salmonellade ja listeeriate määramisel. Patogeensete bakterite ja nende toksiinide
määramiseks on kaubanduses saadaval mitmeid automatiseeritud ELISA-süsteeme
(nt Vidas®, EIAFoss®, Minilyser®, AutoEIA®).
4. DNA-l põhinevad meetodid. DNA-l põhinevad meetodid on väga
spetsiifilised ,
kuid nende puuduseks on see, et nad pole võimelised
eristama elusrakke surnutest.
Samuti on proovi ettevalmistamine aega ja kogemust nõudev ning analüüsiks on
vajalik “puhta” proovi olemasolu. Tavakasutuses olevad tehnikad sisaldavad DNA
hübridisatsiooni ja polümeraasahelreaktsiooni (PCR –
polymerase chain reaction).
Kaubanduses on saadaval kitte, mis võimaldavad määrata enim tuntud toidupato-
geene. DNA hübridisatsioonil on vajalik eelrikastamine, et puljongis või memb-
raanfiltritel tekiks küllaldane arv patogeene. Seejärel bakterirakud lüüsitakse ja
DNA fikseeritakse filtrile. Märgistatud DNA-sondil lastakse reageerida (hübridi-
seeruda) fikseeritud DNA-ga. Pärast mittehübridiseerunud DNA väljapesemist
määratakse kindlaks reaktsiooniprodukt. Antud juhul, kasutades
dip- stick -tehno-
loogiat, bakteri märklaud-DNA püütakse kinni ning määratakse ELISA-ga (nt
Gene-
Trak ®). PCR-tehnika on väga spetsiifiline ning kõrge tundlikkusega. Toimub
spetsiifiliste geenide amplifitseerimine (kordades paljundamine) ning see metoodi-
ka võimaldab määrata ka proovis väga vähesel hulgal esinevaid baktereid. Meetodi
puuduseks on see, et teda võivad inhibeerida söötmetes ja toidus esinevad kompo-
nendid, nt ensüümid ja hemoglobiini laguproduktid. Kaubanduses on saadaval
PCR-l baseeruvad analüüsisüsteemid (nt Du Pont Bax®, Taqman®, Probelia®).
Lisauuringuteks vajalikud toimingud .
1. Mikroskoopimine. Valgusmikroskoopiat kasutatakse:
• bakterite identifitseerimiseks, põhinedes nende morfoloogial ja värvusreakt-
sioonil;
• otseseks bakterite loendamiseks (eeldab tavaliselt >105 rakku/ml olemasolu).
2. Värvimise meetodid. Lihtsad meetodid (nt grammeetod) ei võimalda eristada
surnud rakke elusatest. Seda probleemi on võimalik osaliselt vältida, kasutades
otsest epifluorestsents-filtertehnikat (DEFT –
Direct Epifluorescent Filter
Technique). Meetod baseerub sobilikul fluorestsentsil surnud ja elusbakterite
erineval värvumisel. DEFT-tehnika võimaldab spetsiifilist bakteritest patogeenide
antikehade (mis reageerivad bakteriraku pinnaantigeenidega) fluorestsentsmärgis-
tamist.
3.5. KESKKONNATINGIMUSTE MÕJU MIKROOBIDE KASVULE Mikroobide kasv sõltub nii füüsikalistest (temperatuur, kiirgus, pH, gaasiline
keskkond, veetustumine,
osmootne rõhk) kui ka keemilistest faktoritest (toitumis-
tingimused, koos kasvavate liikide omavahelised mõjutused). Mikroobide vastu-
pidavus mitmesugustele füüsikalistele faktoritele on küllalt erinev. Nii on igale
40
mikroobiliigile iseloomulikud vaid temale omased optimaalsed kasvutingimused.
Samal ajal tuleb arvestada ka mikroobide suurt kohanemisvõimet erisuguste
tingimustega, mis raskendab omakorda kontrolli kasvu üle. Alljärgnevalt tutvusta-
takse lähemalt mõningaid keskkonnategureid, mis mõjutavad mikroobide kasvu.
Temperatuur. Temperatuuri füsioloogiline toime mikroobide kasvule on suurel
määral seotud temperatuuri otsese mõjuga mikroobi ensümaatilise aparaadi
aktiiv -
susele. Madalatel temperatuuridel ensümaatiline aktiivsus väheneb ja sellega kaas-
neb kasvukiiruse langus. Kõrgematel temperatuuridel kasvavatel mikroobidel on
ensümaatiline aparaat termoresistentne mitmesuguste metalliioonide kaitsva toime
ja suurema hüdrofoobsete aminohapete sisalduse tõttu valkudes. Lisaks eeltoodule
on kuumalembeste mikroobide membraanides enam küllastunud rasvhappeid.
Madalatel temperatuuridel muutuvad aga sellise struktuuriga
membraanid vahajaks
ja funktsioneerimatuks. Selle vältimiseks on neis tingimustes kasvavatel bakteritel
membraanides suurem eelkõige küllastumata rasvhapete hulk. Membraansete
erinevuste tõttu on prokarüoodid võimelised kasvama palju kõrgematel tempera-
tuuridel kui eukarüoodid. Temperatuuri, mille juures mikroobirakkude kasvukiirus
on suurim, nimetatakse optimaalseks. Mikroobi kasv saab toimuda maksimum-
temperatuuri ja miinimumtemperatuuri vahelises piirkonnas. Näitena olgu toodud
mõnele liigile omased miinimum-optimum-maksimumtemperatuurid (°C), mis
võivad kõikuda veel ka sõltuvalt teistest keskkonnatingimustest (pH, toitaineline
kooslus jne):
P. fluorescens 4
25–30
40;
S. aureus 6
30–37
46;
Thermus aquaticus 40 70–72
79.
Mikroobid jaotatakse 5 rühma optimaalse kasvutemperatuuri piiride järgi:
psührofiilid 43 °C temperatuur võib olla salmonelladele
surmav ).
Poolvedel sööde, MSRV ja
Diasalm baseeruvad samuti RV printsiibil
. Tetrationaatpuljongi selektiivsus põhi-
neb tetrationaadi, sapisoolade ja briljantrohelise olemasolul. Seleniidil baseeruvaid
söötmeid on kasutusel mitmeid, kuid enim poolehoidu on leidnud SC-
puljong .
Vältimaks SC-puljongi inhibeerivat mõju salmonelladele, tuleb seda inkubeerida
37 °C juures. Selekteerivad plaatsöötmed põhinevad teatud selektiivsetel
ainetel ja
diferentsiaalanalüüsidel (nt süsivesikute
fermentatsioon ja vesiniksulfiidi
produkt -
sioon). Sel eesmärgil kasutatakse kõige sagedamini briljantrohelise (BR) ja
ksüloos-lüsiin-deoksükolaadi (XLD) agarit. Ksüloos-lüsiin-deoksükolaat-tergitool
4 agar sisaldab
Proteus spp. ja teiste mitte salmonellade inhibeerimiseks vajalikku
ainet (tergitool 4). Rambachi agari korral kasutavad salmonellad propüleenglü-
kooli, millele järgneb happe produktsioon ja tekivad punase värvusega kolooniad.
Laktoospositiivsete salmonellade detekteerimiseks on loodud mannitool-lüsiin-
kristallviolett-briljantrohelise agar. Salmonelladele iseloomulikud tüved tuleb
lõplikult kinnitada biokeemiliste ja seroloogiliste testidega. Täiendavate epidemio-
loogiliste uuringute eesmärgil saab tüvesid omakorda tüpiseerida, kasutades faag-
43
tüpiseerimist, pulseeriva välja
geel -elektroforeesi jt. Tabel 3.3 iseloomustab
erinevaid salmonellade isoleerimiseks kasutatavaid söötmeid.
Tabel 3.3. Söötmed salmonellade isoleerimiseks
Inkubeerimine
Toiming Sööde
Temp °C
Kestus h
Eelrikastamine Puhverdatud
peptoonvesi
37
16–20
Rikastamine Rappaport-Vassiliadise (RV) puljong
42
24+48*
Seleniit-tsüstiin (SC) puljong
37
24+48
Modifits. poolvedel RV (MSRV)
42
24+48
Diasalm
42
24+48
Tetrationaatpuljong
43
24+48
Külv selektiivsetele
Briljantrohelise agar
37
24
agaritele
Rambachi agar
37
24
Ksüloos-lüsiin-deoksükolaat agar (XLD)
37
24
Ksüloos-lüsiin-deoksükolaat-tergitool 4 agar
37 24
(XLT4)
Mannitool-lüsiin-kristallviolett-briljantrohelise
37 24
agar (MLCB)
* Kui pärast 24-tunnist rikastamist inokuleeritud selektiivsel agaril ei teki oletavalt
positiiv -
seid kolooniaid, on soovitav teostada sekundaarne subkultiveerimine.
Escherichia coli
Inimesele on patogeensed mitmed
E. coli tüübid, millest mõned toodavad ka vero-
toksiine. Verotoksiini produtseeriva
E. coli isoleerimine on suhteliselt raske. Kõige
esimeseks etapiks on proovimaterjali eelrikastamine modifitseeritud trüptoon-soja
puljongis, mis sisaldab novobiotsiini (MTSB). Järgneb rikastamine kas
modifit -
seeritud trüptoon-soja puljongis, mis sisaldab mitomütsiini, või modifitseeritud
E. coli puljongis, mis sisaldab novobiotsiini (tabel 3.4). Inkubatsiooniperioodi
jooksul tuleb proovi pidevalt segada (loksutada). Sellele järgneb kas materjali
söötmeplaatidele kandmine ning iseloomulike kolooniate identifitseerimine või
immunopretsipitatsiooni ja/või ELISA-meetodi kasutamine.
Tabel 3.4. Söötmed verotoksikogeense
E. coli isoleerimiseks
Inkubeerimine
Toiming Sööde
Temp °C
Kestus h
Esmane rikastamine
Trüptoon-soja puljong + novobiotsiin
37
6
Rikastamine
Trüptoon-soja puljong + mitomütsiin
37
16–18
Modifits.
E. coli puljong + novobiotsiin
37
16–18
Külv selektiivsetele
Cefixime-telluriit-sorbitool 37
24
agaritele
MacConkey (CT SMAC) agar
Enterohemolüsiin agar
37
24
Campylobacter jejuni
Termofiilsete kampülobakterite isoleerimisviis sõltub põhiliselt proovi tüübist ja
oletatavast kampülobakteriga saastumise astmest. Proovid linnulihast või mõnest
teisest kõrgelt saastunud allikast võib külvata otse selektiivagarile. Vähesel määral
saastunud proove tuleb eelnevalt rikastada selektiivses puljongis. Värsket liha
rikastatakse Prestoni puljongis. Külmutatud või kuivatatud liha rikastamiseks ning
kahjustatud bakterikultuuri elustamiseks soovitatakse Parki ja Sandersi
puljongit .
Inokuleeritud puljongit, mis sisaldab vankomütsiini ja trimetoprimi, inkubeeritakse
44
31–32 °C juures 4 tundi. Sellele järgneb tsefoperasooni ja tsükloheksimiidi
lisamine ning inkubeerimine 37 °C juures 2 tundi. Seejärel tõstetakse temperatuur
42 kraadini ja inkubeeritakse 40–42 tundi. Mõlemad inkubeerimised (rikastamise
puljong ja
plaadid ) peavad toimuma atmosfääris, kus on 5-7% hapnikku, 10%
süsinikdioksiidi ja 80% lämmastikku ja/või vesinikku. Saadaval on mitmeid
selektiivsöötmeid, kuid ükski neist pole kahjuks optimaalse koostisega. Kõige
laialdasemalt on verd mittesisaldavatest söötmetest kasutusel Karmali ja puusüsi-
tsefaperasoon-deoksükolaat agar ning verd sisaldavatest agaritest Skirrow’ ja
Butzleri agar (tabel 3.5). Pärast inkubatsiooni uuritakse bakterirakke kahtlustata-
vatest kolooniatest mikroskoopiliselt tüüpilise korgitseri morfoloogia suhtes.
Tüvesid diferentseeritakse nende kasvuvõime järgi 25 °C juures mikroaeroobsetes
tingimustes; H2S produktsiooni alusel kolmiksuhkru-raua agaril (
triple- sugar -iron)
ning nalidiksiinhappe tundlikkuse alusel. Teha tuleb ka hipuraatide hüdrolüüsi test
ning määrata katalaasi ja oksüdaasi aktiivsus ning nitraatide
reduktsioon .
Tabel 3.5. Söötmed
Campylobacter jejuni isoleerimiseks
Inkubeerimine
Toiming Sööde
Temp °C
Kestus h
Rikastamine Prestoni
puljong
42
24–48
Park-
Sanders + vankomütsiin + trimetoprim
31–32 4
puljong
Park-Sanders + tsefoperazoon + tsükloheksimiid
37 ja siis
2 ja siis
puljong
42
40–48*
Külv selektiivsetele
Karmali agar
42
24–48*
agaritele
Puusüsi-tsefaperasoon-deoksükolaat agar (CCD-
42 24–48*
agar)
Skirrow’ agar
42
24–48*
Butzleri (Virioni) agar
42
24–48*
* Inkubatsiooniaega võib vajadusel pikendada viie päevani.
Yersinia enterocolitica
Tegemist on psührotroofse bakteriga, mis on võimeline paljunema ka 4 °C
temperatuuri juures. Rikastamine temperatuuril 4 °C nõuab 2–4 nädalat. Tõstes
temperatuuri 22 kraadini, võib rutiinseks diagnoosimiseks kasvuperioodi kiiren-
dada viie päevani.
Et ükski protseduur ei võimalda avastada kõiki patogeenseid serotüüpe, siis
kasutatakse kahte erinevat isoleerimisprotseduuri. Tavaliselt toimitakse järgmiselt:
• rikastamine irgasaan-tirtsatsilliinkloraat (ITC) puljongis. Järgnevalt külva-
mine tsefsulodiin-irgasaan-novobiotsiin (CIN) agarile või
Salmonella-
Shigella deoksükolaat-
kaltsiumkloriid (SSDC) agarile (tabel 3.6).
• eelrikastamine trüptoon-soja puljongis (TSB). Järgnevalt rikastamine sapi-
oksalaat-sorboos (BOS) puljongis ning külvamine tsefasulodiin-irgasaan-
novobiotsiin (CIN) agarile (tabel 3.7).
Iseloomulikke kolooniaid võib identifitseerida biokeemiliste testidega ja
Y. enterocolitica tüved tüpiseeritakse seroloogiliselt. Isolaate on mõningatel
juhtudel vaja hinnata ka virulentsuse suhtes, kuid seda tehakse üksnes spetsiifilistes
diagnostikalaboratoorites.
45
Tabel 3.6. Yersinia enterocolitica isoleerimine (esimene meetod)
Inkubeerimine
Toiming Sööde
Temp °C
Kestus h
Rikastamine Irgasaan-tiratsilliin-kloraat (ITC) puljong
24
2–3 päeva
Külv selektiivsetele
Tsefsulodiin-irgasaan-novobiotsiin (CIN) agar
30; 22
18–24 või
agaritele
48 tundi
Salmonella-Shigella deoksükolaat-kaltsiumkloriid
30–33 24
agar
Tabel 3.7. Yersinia enterocolitica isoleerimine (teine meetod)
Inkubeerimine
Toiming Sööde
Temp °C
Kestus h
Eelrikastamine
Trüptoon-soja puljong (TSB)
15
2 päeva
Rikastamine Sapi-oksalaat-sorboos (BOS) puljong
22–25
3–5 päeva
Külv selektiivsetele
Tsefsulodiin-irgasaan-novobiotsiin (CIN) agar
30; 22
18–24 või 48
agaritele
tundi
Listeria spp.
Listeeriad on võimelised kasvama madalatel temperatuuridel. Aastaid oli isoleeri-
mise eesmärgil kasutusel külmrikastamine. Nüüdseks on saadaval erinevaid
selektiivrikastamise puljongeid, mis annavad kõrgematel temperatuuridel tulemuse
juba mõne päevaga. Näiteks võib tuua Fraseri puljongi, mis inhibiitoritena sisaldab
nalidiksiinhapet ja akriflaviini. Söötme tumenemine eskuliini hüdrolüüsi tulemu-
sena on kasulikuks indikaatoriks, kuigi antud hüdrolüüs ei ole omane ainuüksi
listeeriatele.
Vigastatud rakkude elustamiseks kasutatakse kaheastmelist rikasta-
mise protseduuri. Esimeseks etapiks on inkubeerimine tavalisega võrreldes kaks
korda lahjema kontsentratsiooniga Fraseri puljongis (½ Fraser) ja teiseks etapiks on
inkubeerimine täiskontsentratsiooniga (
full -strenght) Fraseri puljongis (tabel 3.8).
Listeria spp. isoleerimiseks soovitab ISO-meetod kasutada kahte selektiivagarit
(
Oxford ja Palcam),
kusjuures L. monocytogenes omab mõlemal söötmel tüüpilisi
kolooniaid (tabel 3.8). Mõlemad söötmed sisaldavad antibiootikume ja liitium-
kloriidi selektiivsete agentidena ning eskuliin/raud(III) rauda diagnostilise süstee-
mina. Palcam sisaldab D-mannitooli kombineerituna fenoolpunasega, mis võimal-
dab listeeriatest eraldada eneterokokke ja stafülokokke. Kahtlustatavad kolooniad
peaks allutama kontrolltestidele, milleks on suhkrute fermentatsioon (ksüloos ja
ramnoos) ning katalaasi ja beeta hemolüsiini produktsioon. Viimasena teostatakse
CAMP-test.
Tabel 3.8. Söötmed
Listeria spp. isoleerimiseks
Inkubeerimine
Toiming Sööde
Temp °C
Kestus h
Rikastamine
½ Fraseri puljong
37
24
Fraseri
puljong
37
24
Külv selektiivsetele
Oxfordi agar
37
48
agaritele
Palcami agar
42
48
46
3.7. TAPAMAJADES KASUTATAVA VEE MIKROBIOLOOGILINE KONTROLL Tuginedes direktiivile 80/778/EEC peab vee kvaliteet, mida kasutatakse toidu
valmistamisel, seadmete
pesemisel ning toidukäitlejate isikliku hügieeni taga-
miseks, vastama joogiveele esitatud nõuetele.
Litsentseeritud lihakäitlemise ettevõ-
tete juhtkond vastutab vee nõuetekohase kvaliteedi tagamise eest. Veeproove peab
võtma ning hindama regulaarselt. Ettevõtetest, mis on ühendatud üldisesse
veevõrku, peab veeproove võtma vähemalt üks kord aastas. Iga kuu tuleb vee-
proove võtta ja analüüsida ettevõtetes, mis on ühendatud üldisesse veevõrku, kuid
kus on olemas ka veehoidlad. Samuti tuleb iga kuu analüüsida ettevõtteid, millel on
privaatne
veevarustus . Proovid allutatakse mikrobioloogilisele
kontrollile , kusjuu-
res keemilisi veeanalüüse tehakse üksnes vajadusel. Proovid tuleb võtta aseptiliselt
ning võimalikult üldise veevarustusega liitumise punkti(de) lähedalt (algallika
lähedalt) ning samuti mitmetest ettevõttesisestest punktidest. Eraldi tuleb analüüsi-
da külma vee ja
segatud külma/sooja vee kvaliteeti. Analüüside arv sõltub ettevõtte
suurusest ning veevõtukohtade arvust. Mikrobioloogilised veeanalüüsid peavad
sisaldama elusbakterite üldarvu (TVC) määramist ning
coli-laadsete bakterite
arvukuse määramist. Direktiiv 80/778/EEC määratleb mikrobioloogiliste analüüsi-
de aktsepteeritavad väärtused. Mõningad hooajalised üldarvu (TVC
– Total Viable
Count) kõikumised on teatud piirides lubatud, kuid
kolibakterid kui fekaalse
saastumise
indikaatorid peavad jääma piiridesse
Kõik kommentaarid