BIOKEEMIA KONSPEKTIATP
(
adenosiintrifosfaat ) ja
NADPH
(taandatud nikotiinmiidadeniindinukleotiid-
fosfaat ) on energiarikkad
e.
makroergilised ühendid.
Makroergiliste molekulide reageerimisel
teiste biomolekulidega vabaneb energia,
mille
arvelt toimuvad mitmed energeetiliselt ebasoodsad protsessid
(biosüntees, liikumine,
osmoos ).
MOLEKULAARNE HIERARHIA :
Anorgaanilised
eellased – CO2,
H2O,
NH3,
N2.
Metaboliidid
– püruvaat,tsitraat, suktsinaat
Monomeersed
ehituskivid –
aminohapped ,
nukleotiidid ,
monosahhariidid ,
rasvhapped , glütserool
Makromolekulid
–
valgud ,
nukleiinhapped , polüsahhariidid,
lipiidid .
Supramolekulaarsed kompleksid –
ribosoomid ,
tsütoskelett
Organellid
– tuum,
mitokondrid ,
kloroplastid .
ELUSLOODUSE
HIERARHIA:
Molekul
– väikseim iseseisev osake
Makromolekul
– kovalentsete sidemete abil
lihtsatest molekulidest konstrueeritud
biomolekul .
Organell
– reaktsioone ajas/ruumis eraldav rakusisene
moodustis .
Rakk
– eluslooduse väikseim
struktuurne ühik
Kude
– sarnase tekke/ehituse/talitlusega rakkude kogum.
Organ
–
struktuurseks/funktsionaalseks tervikuks ühendatud erinavte kudede
kogum.
Elundkond
– ühiseks eesmärgiks ühendatud erinevate funkts.
organid .
Hulkrakne
organism – kudedest,
organitest ja elundkondadest koosnev isend.
Populatsioon
– teatud levilas olevad samaliigliste isendite kogum
Kooslus
– teatud levilas elavad populatsioonide kogum
Ökosüsteem
– bioloogiline kooslus oma füüsikalises/keemikalises kk-s.
Biosfäär
– organismide poolt asustatud ala.
RAKKUDES
TOIMUVAD KEEMILISED REAKTSIOONID: - Funktsionaalsete rühmade ülekanne
- Oksüdeerumine / redutseerumine
- C-C sideme teke/katkemine
- Funktsionaalsete rühmade ümberpaigutamine ühe või enama süsinikuaatomi pmber
- Molekulide kondenseerumine
H-O-C-N
vahelised sidemed on kovalentsetest tugevaimad. (H-H; C-H; C-O; C-C
tugevuse järjekorras).
MITTEKOVALENTSED
SIDEMED:
- Van der Waalsi jõud – tekivad indutseeritud elektrilistest interaktsioonides kahe lähestikku jõudnud aatomi positiivselt laetud elektronpilvede vahel
- Vesiniksidemed – tekib el.negatiivse aatomiga kovalentselt seotud H ja teise el.negatiivse aatomi vahel samas või naaber molekulis. Side on tugevaim, kui molekulid asuvad ühel joonel .
- Ioonsed sidemed – vastaslaenguliste polaarsete funktsionaalsete rühmade vahelise elektrostaatiliste tõmbejõudude tulemus.
- Hüdrofoobsed vastasmõjud – sarnaste apolaarsete aatomirühmade omavaheline tõmbumine vesikeskkonnas .
Rakk on väikseim süsteem, millel
ilmnevad elu tunnused. Rakk on isepaljunev mikroskoopiline
mullreaktor.
Rakud on avatud termodünaamilised
süsteemid.
PROKARÜOOTNEEUKARÜOOTNESUURUS1-10 μm
5-100 μm
GENOOM DNA nukleoidis, puuduvad histoonvalgud
DNA kromosoomidesse paktiuna tuumas
RAKU JAGUNEMINEPooldumine , pungumine
mitoos MEMBRAANIGA ÜMBRITSETUD ORGANELLIDPuuduvad
Mitokondrid, kloroplastid, golgi aparaata
TOITUMINEAbsorptsioon , vahel fotosüntees
Absorptsioon, seedimine, fotosüntees
ENERGIA METABOLISM Oksüdatiivsed ensüümid plasmamembraanis
Oksüdatiivsed ensüümid mitokondrites
TSÜTOSKELETTPuudub
Kompleks mikrotuubulitest ja filamentidest
RAKUSISENE LIIKUMINEPuudub
Endotsütoos, mitoos, vesiikulite transport
- Plasmamembraan – aktiivse transpordisüsteem
- Tuum – DNA replikatsioon , RNA transkiptsioon, tuumavalkude süntees
- ER – lipiidide süntees, biosünteesitud biomolekulide suunamine nende lõplikku paika rakus.
- Golgi kompleks – glükoproteiinide ja muude membraanikomponentide lõplik valmimine
- Mitokondrid – tsitraaditsükkel, elektrontransport, rasvhapete ja püruvaadi oksüdatsioon, aminophapete katabolism .
- Lüsosoomid – hüdrolaasid eraldamine
- Ribosoomid – valkude süntees
- Peroksioomid – aminohapete oksüdeerimine
- Tsütoskelett – tagab raku kuju ja liikumisvõime.
- Endoplasmaatiline võrgustik – kareda ja siledapinnaline ER. Valkude, fosfolipiidide süntees
- Rakusein – säilitada raku vorm
- Peroksüsoom – reaktsioonid, mille käigus vaba hapniku abi seotakse vesiniku aatomeid. Tekkiv vesinikperoksiidi kasut oksüdeerimisel.
- Kloroplast - fotosüntees
Viirused on eluta ja elusa looduse piirimail olevad
rakulise ehituseta ainult elusrakkudes paljunevad bioloogilised objektid.Viirus on
rakuta
moodustis,
tema koostises on vähemalt:
- genoom ( nukleiinhape - DNA või RNA)- nukleiinhaped säilitavad pärilikku info. Viirusel peab olema vähemalt kolm geeni
- kapsiid (valgud) - kaitseb genoomi keskkonnamõjutuste eest ja aitab viiruse genoomi peremeesrakku.
Nendele
võib lisanduda
ümbris,
mille
viirus
rakust väljudes kaasa võtab.
Kapsiid ja ümbris on
genoomi
kaitseks,
aga ka viiruse rakku tungimise tagamiseks (
taku äratundmiseks).
Viiruse ümbrise pinnal on
valgud,
mis käituvad signaalidena.
Viiruste
paljumine
jagatatakse nelja etapiks:
1.
Viirusosake kinnitub
fibrillidega rakumembraanile;
2.
Viirusosake
vabaneb
ümbrisest
ja
lagundab rakumembraani;
3.
Viirusosakese nukleiinhape
koos kapsiidiga siseneb rakku;
4.
Viirusosake
vabaneb
kapsiidist;
LÜÜTILINE
ELUTSÜKKEL5.
Viiruse nukleiinhape
replitseerub
rakutuumas või
tsütoplasmas;
6.
Moodustuvad
uued
viirusosakesed,
sünteesitakse
ümber kapsiidid;
7.
Rakumembraan
laguneb,
rakk
hukkub
ja
viirused
väljuvad;
8.
Peremeesraku membraanist
võetakse
osake kaasa ümbriseks.
LÜSOGEENNE
ELUTSÜKKEL5.
Viiruse nukleiinhape
seostub
bakteriraku kromosoomi;
6.
Viiruse nukleiinhape on mõni aeg
inaktiivses
olekus;
7.
Bakterirakk paljuneb;
8.
Järgneb
lüütiline
tsükkel.
VEE
OMADUSED - kõrge sulamis- ja keemistemperatuur
- suur aurumissoojus
- suur soojusmahtuvus
- kõrge pindpinveus
- kõrge dielektriline kontstnt maksimaalne tihedus vedels olekus
Ioonide hüdratatsioon
- positiivse laenguga ioone
ümbritsevad vee osaliselt negatiivse laenguga hapniku
aatomid ;
negatiivse laenguga ioone ümbritsevad vee osaliselt positiivse
laenguga vesinikuaatomid.
Hüdrofoobse
aine ümber moodustub vee
keskkonnas vee molekulidest
klatraaditaoline
struktuur. Vee
vesiniksidemete võrgustik reorganiseerub
apolaarse ühendi vastuvõtmiseks,
millega tõuseb vee järk – s.t
väheneb entroopia .
Amfifiilne molekul
sisaldab nii
hüdrofiilseid
kui hüdrofoobseid rühmi ning
mida
tõmbab samaaegselt nii
polaarse kui apolaarsesse keskkonda.
Vesikeskkonas organiseerub molekul nii, et
hüdrofiilsed
osad orienteeruksid mitselli pinnale ja interakteeruvad polaarsete
vee molekulidega;
hüdrofoobsed
osad orienteeruvad
tsentrisse ja neile toimivad hüdrofoobsed vastasmõjud.
Negatiivse pinnalaengu tõttu mitsellid tõukuvad üksteisest ning
tulemusek on suhteliselt stabiilne lahus.
pH
–
vesinikeksponent ,
negatiivne logarithm lahuse vesinikioonide kontsentratsioonist.
Osmoos
– aine liikumine läbi poolläbilaskva membraani, mis eraldab kaht
erineva kontsentratsiooniga lahust.
Osmootne rõhk – osmoosist tingitud
rõhk kõrgema kontsentratsooniga lahuse poolel.
Vesi
ioniseerub, kuna suurem ja
tugevalt
elektronegatiivne
hapniku aatom tõmbab ära elektroni ühelt vesiniku aatomilt,
mille tulemusena prooton dissotsieerub.
POAARSUS. ELEKTRONEGATIIVSUS . Polaarsus
on
laengute
ebavõrdsest jaotumisest tingitud olekPolaarne kovalentne side
-
sideme elektronpaar on ebavõrdselt
jaotunud,
üks
aatom kannab positiivset (d+),
teine negatiivset osalaengut
(d-),
st
esineb
sideme dipool .
Millest
polaarsus
tuleneb?
Polaarsus
tuleneb
seostunud aatomite
erinevast
elektronegatiivsusest.Elektronegatiivsus
(elektronafiinsus)
on
aatomi võime
tõmmata
sideme
elektrone
enda poole;
suhteline
suurus.Elektronegatiivsus
sõltub
- tuuma efektiivsest laengust
- orbitaalide hübridisatsioonist
- asendajate mõjust
Millal
polaarne
molekul omab püsivat elektrilist dipooli ,
s.o.
+
ja - osalaenguga
tsentreid?
- kui molekulis esinevad sideme dipoolid (polaarsed sidemed)
- kui aatomite paigutus tingib erineva osalaenguga tsentrite kujunemise.
Apolaarne
side
- samade
aatomite või lähedase /võrdse
elektronega-
tiivsusega
aatomite vaheline side
Apolaarne
molekul -
molekulis
pole d+
ega d-
tsentrit, kuna*
molekulis pole sideme dipoole
*
molekulis esinevad sideme dipoolid, kuid aatomite
paigutuse tõttu
dipoolid
“neutraliseerivad” teineteist
(toimivad
vastassuundades)
Kui
seotud aatomite
elektronegatiivsuste erinevused on
piirides 0,5…1,7 , siis - side on
polaarneKui
aatomid on äärmuslikult
erineva elektronegatiivsusega
>
1,7
, siis -
ioonne
side.
HÜDROFOOBSED INTERAKTSIOONID Apolaarsete
ühendite ja apolaarseid aatomirühmi
(aromaatsed
tuumad,
pikemad C-radikaalid) sisaldavate
molekulide selline orientatsioon vesikeskkonnas,
mis tagab nende
minimaalse
kontakti veega, st apolaarsete rühmade omavaheline “tõmbumine”
vesikeskkonnas. Põhjendus:Vesikeskkonda
sattudes apolaarsed (hüdrofoobsed) ühendid häirivad H-sidemetest
tingitud vee sisestruktuuri. Taoliste molekulide või rühmade
agregatsioon vähendab
üldist hüdro-foobset pinda
ja takistab
süsteemi entroopia vähenemist.
Amfifiilsed
e amfipaatsed molekulid.Molekulid,
mis sisaldavad nii
hüdrofiilseid
(polaarseid)
kui ka
hüdrofoobseid
(apolaarseid)
rühmi ning mida “tõmbab” sama-aegselt nii polaarsesse kui
apolaarsesse keskkonda.
Negatiivse
laenguga karboksülaatpeagrupid on
mitselli
pinnal ja interakteeruvad polaarsete vee molekulidega
ioon-dipool vastasmõju abil, st moodustub hüdraatkest.
Hüdrofoobsed
alküülsabad
on hüdrofoobsete
interaktsioonide toimel sfäärilise
mitselli tsentris .
Negatiivse
pinnalaengu tõttu
mitsellid
tõukuvad üksteisest
ning tulemuseks on suhteliselt stabiilne lahus.
Rakutsükkel
ehk
raku jagunemistsükkel
on raku elukäik pooldumisest pooldumiseni.
Rakutuuma
omavate ehk eukarüootsete
rakkude rakutsüklit jaotatakse kolmeks osaks:
- interfaas – toimub raku kasvamine, mitoosiks vajalike toitainete kogumine ja DNA kahekordistamine (G1, S, G2)
- mitoos – tulemuseks on raku jagunemine kaheks erinevaks rakuks, mida kutsutakse tütarrakkudeks (M faas= profaas , metfaas, anafaas , telofaas )
- tsütokinees – toimub raku lõplik jagunemine
Iseloomustage raku tsütoskeleti koostist ja funktsioone. -> Aktiini
filamendid,
mikrotuubulid , intermediaarsed filamendid. Osalevad raku
pooldumisel, kuju säilitamise, raku polaarsuse kujunemisel.
2 H2O2 ® 2 H2O + O2 (loomne rakk) peroksüsoomid
DNA koopeerimine e. replikatsioon ( loomarakk ; bakterirakk) tuumas, tuumapiirkonnas, kloroplastides, mitokondrites.
Rakku sisenenud võõra RNA hüdrolüüs (loomarakk) lüsosüüm
CO2 + H2O ® ( CH2O ) n + O2 (taimerakk) klorofüll
Varurasvade säilitamine (loomarakk) tsütoplasma
Uute valgumolekulide süntees (eukarüoot; prokarüoot) ribosoomid
Energeetiline metabolism, st põhiline ATP tootmine (loomarakk;
bakterirakk)
mitokonder
Raku kuju säilitamine, rakusisene transport (eukarüootne rakk) tsütoplasmavõrgustik
Mis
on pKa?
- Happe dissotsiatsioonikonstandi väärtuse negatiivne log
- Happe tugevuse mõõt
- Selline pH väärtus, mille juures 50% happest on dissotsieerunud ( hape on pooldissotsieerunud).
Mono -
ja polüprootsed happed
Monoprootsed
happed
-
vabastavad
ühe H+;
üks
pKa
väärtus
Polüprootsed
happed
- vabastavad
kaks või rohkem H+,
mis dissotseeruvad järk-järgult; omavad mitut pKa
väärtust.
PUHVERLAHUSED
( PUHVRID )
- Vesilahused, mille pH ei muutu väikese koguse happe või aluse lisamisel;
- Koosnevad nõrgast happest (prootoni doonor) ja tema soolast (prootoni aktseptor);
- Omavad puhverdusvõimet ca ühe pH ühiku piires happe pKa ümbruses (kõige efektiivsemad pH juures, mis vastab happe pKa väärtusele);
- Isotooniline ehk füsioloogiline lahus
Lahus,
mille osmootne rõhk võrdub vereplasma osmootse rõhuga. plah=
pplasma
Lahus,
mille osmootne rõhk on kõrgem vereplasma osmootsest rõhust plah
> pplasma
Lahus,
mille osmootne rõhk on madalam
vereplasma
osmootsest rõhust
plah
pplasma
TD
I seadus
Kõigi
energialiikide summa süsteemis on jääv suurus
Konstantse
ainehulga juures siseenergia muut DE
võrdub
DE
= Eprod
- Ereakt
= Q
– W
ehk
Q
= DE
+ W
E
– süsteemi siseenergia; Q
- süsteemi
sisestatud soojahulk
W
- süsteemi poolt tehtud töö
Entalpia ,
H
– keemias kasutatav parameeter, mis iseloomustab süsteemi
soojusefekti
(heat
content),
ühik cal/mol või J/mol
ΔH
= Qp
, kus
Qp
- süsteemi soojusefekt konstantsel rõhul (P = const ); W(töö) = P
ΔV
Seega: Qp
= ΔEp
+ PΔV
= ΔHp
,
ΔH
0 - endotermiline protsess,
süsteem seob soojust
TD
II seadus
Kõik
protsessid kulgevad tasakaalu e. minimaalse potentsiaalse energia
poole e. entroopia kasvu suunas
Entroopia
(S
)
-juhuslikkuse e korrastamatuse mõõt; J/mol·K
- Korrastatud olek - madal entroopia
- Korrastamata olek - kõrge entroopia
ΔS
= 0 pöörduvate protsesside (reaktsioonide) korral
ΔS
> 0 pöördumatute protsesside korral.
Vabaenergia e. Gibbs’i vabaenergia (G
) on see osa süsteemi siseenergiast, mis on võimeline konstantse
temperatuuri ja rõhu juures tööd tegema
Vabaenergia
G on
hüpoteetiline suurus, mis seob entalpia
ja entroopia;
keemikul võimaldab prognoosida, kas antud reaktsioon leiab ase.
G = H - TS
ΔG
= ΔH
– TΔS
- Δ G = 0: reaktsioon on tasakaalus
- Δ G : produktide siseenergia on väiksem kui reaktantidel, reaktsioonis vabaneb energia, reaktsioon on eksergooniline, st kulgeb spontaanselt.
- ΔG > 0: produktide siseenergia on suurem kui reaktantidel, reaktsioonis seotakse energiat; endergooniline reaktsioon, st mittespontaanne reaktsioon.
ISOELEKTRILINE
PUNKT (tähis pI)
on
keskkonna pH väärtus, mille juures aminohappe molekuli summaarne laeng võrdub nulliga.
- Kõik aminohapped (va glütsiin) on kiraalsed, kuna α-süsinik on asümmeetriline (4 erinevat asendajat)
- Looduses domineerivad a,L-aminohapped
Suhteline - baseerub
kiraalse tsentri konfiguratsiooni
võrdlusele
glütseeraldehüüdi konfiguratsiooniga
- R,S-klassifikatsioon (R,S-nomenklatuur)
Absoluutne
-
baseerub
kiraalse C aatomiga seotud funktsio-naalsete rühmade
prioriteetsusele (“vanusele”).
PEPTIIDSIDEME
ISELOOMUSTUS
- Karbonüülne =O ja amiidne -H on trans-konfiguratsioonis
- On iseloomult osaline kaksikside (ajaliselt ~ 40%)
- C – N vaheline side on ~0,133 nm pikk, st lühem kui tüüpiline üksikside ja pikem kui kaksikside
- Tänu kaksiksideme iseloomule on peptiidsideme 4 aatomit asetunud planaarselt
- Peptiidi põhiskelett on kergelt laetud: amiidrühma N on osaliselt positiivne; karbonüülrühma O osaliselt negatiivne.
- Lihtvalgud – valgud, mis koosnevad ainult aminohapetest
- Liitvalgud – valgud, mis sisaldavad lisaks aminohapetele mitte-aminohappelist osa
-
Kui mitte-aminohappeline osa on funktsionaalselt oluline, siis
nimetatakse seda prosteetiliseks
rühmaks
-
Sõltuvalt mitte-aminohappelisest osast jaotatakse liitvalgud
glüko-,
lipo-,
nukleo-,
fosfo-,
metallo-,
hemo-
ja
flavoproteiinideks
- Ensüümvalkudes nimetatakse struktuurilt lihtsaid prosteetilisi rühmi kofaktoriteks, keerulisi koensüümideks
katalüütiline
(ensüümid) ribonukleaas,
heksokinaas jpt.
regulatoorne
(hormoonid) insuliin , kasvuhormoon jt
gaaside
transport (O2,
CO2) hemoglobiin
struktuurne kollageen ,
a- keratiin
reserv ovalbumiin, kaseiin jt
kontraktsioon aktiin ,
müosiin,
tubuliin, kinesiin
kaitse immunoglobuliinid
adapter (kohandaja) AKAP’id hormon. sign . ülekandes
eksootilised antifriisvalgud kalades
*Primaarstruktuur
– aminohapete
järjestus polüpeptiidahelas.
Struktuuri alus - kovalentsed peptiidsidemed aminohappejääkide vahel
*Sekundaarstruktuur
– polüpeptiidahela lokaalsed struktuuriühikud.
Seotud ainult H-sidemetega
lähestikku paiknevate, peptiidsidemetesse kuuluvate amiidse N–H
ja karbonüülse =O vahel
- *Tertsiaarstruktuur – polüpeptiidahela üldine 3-D pakkimine. a-heeli ksid ja b-lehed pakitakse tihedalt üksteise kõrvale, kuid nad moodustavad vaid ~75% gloobuli mahust, jääkide vahel on tühi ruum. Kiud või globullaarsed.
* Kvaternaarstruktuur –
viis, kuidas
monomeersed subühikud on omavahel ühendatud oligo - või
multimeerseks valgumolekuliks.
Nt
hemogloobin.
Sekundaarstrutkuur
lähemalt:
Polüpeptiidahela
mingi
osa lokaalne konformatsioon ,
mis on stabiliseeritud ainult vesiniksidemetega peptiidsidemete
koostisse kuuluvate amiidrühma vesiniku ja karbonüülrühma hapniku
vahel.
Sekundaarstruktuuri
tüübid:
*
a-heeliks
*
b-(voldik)
leht (b-pleated
sheet)
*
b- pöörded (b-turns, beta bends)
*
b-mõhk
või kink (b-
bulge)
ENSÜÜMI SPETSIIFILISUS…
...realiseerub
substraadi molekulaarse äratundmise tulemusena
Ensüümi
aktiivtsenter...
...on ensüümi
molekuli piirkond, kus substraat interakteerub teatavate aminohapete
(keskmiselt 3 ... 4) radikaalidega.
Substraat seotakse
ensüümi
aktiivtsentrisse
nõrkade jõudude toimel
- H-sidemed
- van
der Waalsi
interaktsioonid
- ioonsed
sidemed
- hüdrofoobsed
interaktsioonid
Ensüümid
alandavad
aktivatsiooni vaba-energiat
(ΔG
±),
kuna
seovad
siirdeseisundis substraati (X
±)
tugevamini kui lähteolekus substraati.
Ensüümide toime
molekulaarse mehhanismi mudelid
*
luku-võtme
mudel (E aktiivtsenter = lukk , S = võti).
*
indutseeritud
sobivuse mudel (S
kutsub E aktiivtsentris esile konformatsiooni muutusi, tänu millele
tekibki ES kompleks).
SIIRDESEISUND
on reaktsioonikoordinaadi
kõrgeim punkt,
substraadi molekuli aktiveeritud vorm, milles ta reaktsiooni siseneb.
- ΔG - reaktsiooni vabaenergia muut, mis sõltub reaktsiooni tasakaalukonstandi Keq väärtusest
- ΔG ‡ - reaktsiooni aktivatsioonienergia muut, mis
sõltub
reaktsiooni kiiruskonstandist
k
Pöördumatud inhibiitorid
seostuvad ensüümiga kovalentsete
sidemete
abil: E
+ I → EI
Pöörduvad
inhibiitorid
interakteeruvad
ensüümiga mitte-kovalentsete
sidemete
abil: E + I EI
Pöörduva
inhibeerimise alaliigid :
Konkurentne
- inhibiitor
(I) seondub ainult E,
mitte ES kompleksiga.
Mittekonkurentne
–
I seondub
kas E
või ES kompleksiga.
Ebakonkurentne
- I seondub
ainult ES, mitte
E.
Vitamiinid on
heterogeensed, bioaktiivsed, madalmolekulaarsed, eksogeensed
orgaanilised ained.
Nad on liitensüümide
ehituslik-funktsionaalsete osadena hädavajalikud ensüümkatalüüsis
ja seetõttu eriti vajalikud organismi normaalses elutegevuses.
Inimesele on vitamiinid asendamatud mikrotoitained .
Eksogeensus
tähendab seda, et vitamiine ei sünteesita organismis,
vaid neid peab kindlasti toiduga saama.
Põhilised
vitamiinide allikad on
Toit (eriti taimne)
Seedekanali mikrofloora tegevus
Vitamiinipreparaadid
Süntees vastavatest eelühenditest
Redutseeritud
vormOksüdeeritud
vorm
Rasvlahustuvad vitamiinid (A, D, E, K, Q, F)
Veeslahustuvad vitamiinid (B-grupi vitamiinid, C, H, U, P, N)
Vitameerid e. isoteelid - lähedast keemilist struktuuri omavad rasvlahustuvad vitamiinid, mille toimed ei ole täiesti kattuvad. Näiteks retinooli summaarne toime koosneb vitameeride A1 ja A2 koostoimest.
Ensüümi
ja substraadi vahel tekivad lühiajaliselt kovalentsed
sidemed reaktsiooniahela
ühes või mitmes etapis .
Reeglina nukleofiilne katalüüs:
ensüümi molekuli mingi nukleofiilne tsenter atakeerib substraadi
elektrofiilset tsentrit.
BX + Y + E → E:B + X + Y → E + BY + X
Katalüüs,
mille puhul siirdeseisundis toimub
prootoni ülekanne
Alaliigid:
*Spetsiifiline
hape/alus katalüüs: katalüüsis
osaleb vaid H+
või OH-
*
Üldine hape/alus katalüüs:
lisaks H+
ja OH- hõlmab
ka teisi happeid
ja
aluseid (-COOH/-COO-
; -NH3+/-NH2).
- Katalüüs metalli ioonide osavõtul
Metalli
ioonide osalemise viisid:
*
elektrofiilsete katalüsaatoritena:
vahendavad redoksreaktsioone tänu metalli iooni oksüdatsiooniastme
pöörduvale muutumisele
*
stabiliseerivad
või varjestavad
katalüüsi käigus tekkivaid negatiivseid laenguid
*
seostuvad substraatidele,
orienteerides neid reaktsiooniks õigesse asendisse
Metalloensüümid
– sisaldavad
tugevalt seotud metalli ioone,
vajavad
neid stabiilse natiivse konformatsiooni säilitamiseks
Metall -aktiveeritud
ensüümid - seovad
metalle nõrgalt ning ainult katalüütilise tsükli käigus
Seriin proteaasid - segu kovalentsest ja üldisest
hape/alus katalüüsist
Aspartaat-proteaasid
- näited üldisest hape/alus
katalüüsist
- Proteolüütilised ensüümid, mida leidub nii loomades , seentes kui kõrgemates taimedes.
- Kõik sisaldavad aktiivtsentris kahte Asp jääki.
- Kaks Asp jääki töötavad koos üldiste hape-alus katalüsaatoritena.
- Aspartaat-proteaasid lõikavad peptiidsidet eelistatult kahe hüdrofoobse aminohappe jäägi vahelt.
Kofaktorid
- arvukas rühm mittevalgulisi
ühendeid (metalli ioonid või
orgaanilised molekulid), mida paljud ensüümid vajavad aktiivsuse
avaldumiseks.
Koensüümid
– mittevalgulised orgaanilised
molekulid, vajalikud redoks - ja rühmade ülekande reaktsioonides
L- Askorbiinhape e
vitamin C
Vesilahustuv vitamiin , mis toimib elektroni kandjana , olles mõõdukalt tugev
taandaja.
Enamik
taimi ja loomi, va mõned selgroogsed sünteesib L-askorbiinhapet
ise, neile pole ta vitamiin .
Bioloogilised
funktsioonid
- Pro ja Lys hüdroksüleerimine kollageeni struktuuri tagamiseks
- Tyr metabolism ajus
- Fe mobiliseerimine põrnast
- Kaitse metallide toksilise toime eest
- Allergiliste reaktsioonide pehmendamine
- Immuunsüsteemi stimuleerimine
- Hüpovitaminoos – vitamiinide ajutisest defitsiidist tingitud ainevahetushäire
- Avitaminoos – ühe konkreetse vitamiini puudusest tingitud haigus
- Hüpervitaminoos – vitamiini liiast tingitud haiguslik seisund
Ensüümide
spetsiifilisus..
...
on ensüümide võime eristada
substraate, millele
nad toimivad või võime substraadis läbi viia teatud
tüüpi muutusi
Spetsiifilisus
toimib molekulaarse äratundmise kaudu, mille aluseks on ensüümi
aktiivtsentri ja substraadi struktuurne vastavus
Eristatakse:
A.
Substraadispetsiifilisus –
ensüümi toime avaldub ühe
substraatide grupi või ühe substraadi suhtes
Alaliigid:
- Absoluutne spetsiifilisus – toimib vaid ühele substraadile; Esineb harva (ureaas katalüüsib vaid karbamiidi hüdrolüüsi reaktsiooni)
- Stereospetsiifilisus – reaktsioon toimub vaid ühe stereoisomeeriga (glükoosi metaboliseerivad ensüümid toimivad vaid D-glükoosile)
- Sidemespetsiifilisus – ensüüm eristab substraadis teatavat kovalentset sidet ( invertaas toimib a,b(1,2)-glükosiidsidemele sahharoosis)
- Rühmaspetsiifilisus – teatavate keemiliste rühmade erista-mine substraadi molekulis (karboksüpeptidaas B ei katalüüsi C-terminaalse peptiidsideme hüdrolüüsi peptiidides, mis lõpevad Arg või Lys jäägiga)
B.
Reaktsioonispetsiifilisus –
erinevad ensüümid muundavad sama
substraati erinevalt, andes erinevaid produkte
N:
*glükogeeni lagundamisne amülaasi ja
glükogeeni fosforülaasi toimel
- tekib vastavalt vaba glükoos või glükoos-1-fosfaat.
ENSÜÜMIDE
AKTIIVSUSE KONTROLL RAKU TASEMEL
- E kontsentratsiooni kaudu – geneetiline kontroll geeni ekspressiooni indutseerimise või allasurumise kaudu
- S kontsentratsiooni kaudu – reaktsiooni kiirust mõjutab substraadi kättesaadavus
- Produkti (de) kontsentratsiooni kaudu - produkti akumulee-rumisel kiirus väheneb
- E kovalentse modifitseerimise teel (N: fosforüülimine)
- Allosteeriliste efektorite (modulaatorite) abil
- Sümogeenide (=proensüümide) ja isosüümide sünteesi kaudu
NB! Keskkonnategurite mõju
(temperatuur, pH, ioonjõud)
ensüümi aktiivsusele.
Allosteerilised
ensüümid
Ensüümid, mille
molekuli konformatsioon muutub efektori seondumise
tulemusel (allos
– teine, stereos
– kuju).
Mootorvalgud ehk molekulaarmootorid on...
...valgud, mis muundavad
ATP-energia liikumisenergiaks
Kahe
koos töötava valgu kompleksid
Mikrotuubul (tubuliin) + kinesiin
Mikrotuubul (tubuliin) + düneiin
Aktiin +
müosiin
- ATP hüdrolüüs ( ATP ® ADP + Pi) kutsub esile ja kontrollib mootorvalgus konformatsiooni muutusi, mille tulemusena üks molekul libiseb või “sammub” teise suhtes
- Mootorvalgud (kinesiin, düneiin, müosiin) assotsieeruvad ja dissotsieeruvad pöörduvalt teise valgu (mikrotuubuli, aktiini) või rakuorganelli pinnaga.
MIKROTUUBULID...
- ... on torukesed, mis koosnevad valk tubuliini dimeersetest molekulidest (13 tk pöörde koht)
- ... moodustavad bakterite ripsmete ja viburite põhi-struktuuri
- ... kuuluvad eukarüootsetes rakkudes tsütoskeleti koostisse, vahendades organellide ja vesiikulite liikumist rakus
Düneiinid
ja kinesiinid
on MT-tega koos töötavad
mootorvalgud, mis “sammuvad” või libisevad piki MT.
Lihas
koosneb:
- 100 μm diameetriga lihaskiududest e lihasrakkudest, mida katab sarkolemm (= plasmamembraan)
- Iga kiud sisaldab sadu müofibrille (diam 1-2 μm)
- Iga müofibrill koosneb järjestikku asetsevatest sarko-meeridest
- Iga sarkomeer on otstest varustatud ristiasetseva tuubuliga (t-tuubuliga), mis on sarkolemmi pikendus.
- Sarkomeeride pinda katab sarkoplasmaatiline retiikulum
Monosahhariidide
klassifikatsioon
trioosid
(C3), tetroosid
(C4), pentoosid
(C5), heksoosid (C6)
jne NB! Heksoosid
looduses kõige levinumad!
aldoosid
– sisaldavad aldehüüdrühma
ketoosid
– sisaldavad ketorühma
- Tsükli ehituse järgi (tsüklilise vormi puhul)
püranoosid
( formaalne sarnasus püraani
tsükliga)
furanoosid
(formaalne sarnasus furaani
tsükliga)
Oligosahhariidid
on liitsuhkrud , mis koosnevad väikesest
arvust (2,3,4...) mono- sahhariidi molekuli jääkidest, mida
seovad glükosiidsidemed.
Polüsahhariidid
e. Polüoosid
koosnevad tuhandetest
glükosiidsidemetega ühendatud monosahhariidi ( monoosi ) molekuli
jääkidest
*
Lineaarsed ahelad - tselluloos , amüloos, pektiin, kitiin
*
Hargnenud ahelaga - glükogeen,
amülopektiin
Klassifikatsioon
funktsiooni
järgi ja esindajad
- Energiavaru: tärklis, glükogeen, dekstraan, inuliin
- Struktuurne e. ehituslik: tselluloos, kitiin, mannaan, ksülaan, galaktaan, peptidoglükaanid (bakterite rakukestades)
- Molekulaarne äratundmine: rakupinna polüsahhariidid (glükoproteiinid, proteoglükaanid, lipopolüsahhariidid)
Steroidid – polütsükli-lised ühendid,
sisaldavad 3 tsükloheksaani ja 1 tsüklopentaani tuuma ehk steraani
skeletti.
Kolesterool - levinuim steroid loomsetes
organismides, kõikide loomsete
steroidide lähteühend.
Glütserofosfolipiidid
e fosfatiidid - Polaarsed lipiidid,
kus glütserooli C-1 ja C-2 juurde on estersidemega seotud rasvhapped
ja C-3 juurde fosfodiestersidemega
polaarne alkohol .
Triatsüülglütseroolid
e rasvad on kolmealuselise alkoholi
glütserooli ja
kolme rasvhappe estrid .
SPONTAANSELT
FORMEERUVAD LIPIIDSTRUKTUURID
Monokiht
- tekib vee pinnal väikese koguse rasvhapete lisamisel vette; COOH-rühmad kontakteeruvad veega,
hüdrofoobsed sabad suunatud õhku.
Kaksikkiht - moodustub polaarsetest
lipiididest( fosfolipiidid ) polaarses solvendis (vees); hüdrofoobsed
sabad on peidetud kaksikkihi sisse
Pöördmitsellid
- tekivad aamfi-paatsetest
molekulidest apolaar-setes solventides.
Normaalsed
mitsellid
- tekivad vees amfipaatsete molekulide kõrgemate kontsentratsioonide
korral.
ATPaasid on katalüütilised membraanivalgud (“ pumbad ”), mis on võimelised ATP hüdrolüüsi läbi viima ja kasutama vabanevat
energiat, et muuta valgu konformatsiooni.
NUKLEEINHAPPE
KOOSTISOSAD
LÄMMASTIKALUSED
a)
Pürimidiinalused b) Puriinalused
U uratsiil (RNA) G guaniin (DNA, RNA)
T tümiin (DNA)
C
tsütosiin (DNA, RNA) A adeniin (DNA, RNA)
PENTOOSSUHKRUD
(esinevad furanoosi kujul)
- b,D- riboos (RNA)
- b,D-2-desoksüriboos (DNA)
FOSFORHAPPEJÄÄK
Nukelosiidid
= N – alus + suhkur.
Nukleosiidide
nimetused tulenevad N-aluste nimetustest, lisades lõppu
-idiin (pürimidiinid)
või-osiin
(puriinid).
Tsütidiin Adenosiin
Uridiin Guanosiin
Tümidiin
Nukleotiidid
= N- alus + suhkur + 1..3 fosforüüli.
Funktsioonid:
- substraatideks RNA molekulide sünteesil
- vabade nukleotiididena operatiivseteks energiakandjateks rakkudes
ATP
- keskne molekul raku energeetikas
GTP
- peamine energiaallikas valgu sünteesis
CTP
- oluline metaboliit fosfolipiidide sünteesis
UTP
- suhkrute
aktiveerija polüsahhariidide sünteesis
- Desoksünukleosiid-5’-trifosfaadid (dNTP) on substraati- deks DNA molekulide sünteesil.
Nukleiinhapped
= polünukleotiidid. Biopolümeerid, mille monomeersed ühikud –
nukleosiidmonofosfaadid – on ühendatud 3’ – 5’
fosfodiestersidemetega.
DNA
- Antiparalleelne kaksikheeliks
- Aluspaarid: A -T ja G - C
- Molekul lineaarne (eukarüootidel) või tsirkulaarne (prokarüootidel, eukarüootidel mitokondrites)
- Kaksikspiraali diameeter ~ 2 nm (20 Å)
- Pikkus 1,6×10 9 nm = 1,6×106 mm (E. coli)
- Kompaktne ja tihedalt pakitud (E. coli raku pikkus ainult
2 mm)
- Eukarüootne DNA on keritud ümber histoonvalkude, moodustades nukleosoome
Lahtikeerdunud
kaksik-heeliksi segment , mis näitab komplementaarsete
N-aluste antiparalleelset orientatsiooni.
RNA
Molekul
koosneb ühest vabakujulisest või
osaliselt iseenda ümber spiraliseerunud
polünukleotiidahelast
Põhitüübid:
- Matriits RNA (mRNA) – vahendab geneetilist koodi
- Ribosoomne RNA (rRNA) – ribosoomi struktuuri ja funktsiooni alus; sisaldab ebaharilikke N-aluseid ( inosiin jt)
- Transpordi RNA (tRNA) – aminohapete transport valgu
sünteesis;
väike molekul - sisaldab 73 kuni 94
nukleotiidi
Minoorsed:
- Väike tuuma RNA ( snRNA )- eukarüootsete geenide esmaste transkriptide protsessing küpseks mRNA-ks; 100-200 nukl.-i
- Väike interfereeriv RNA ( siRNA ) – osaleb transkriptsiooni-järgses geenide vaigistamises
DNA
ja RNA erinevused
Miks
DNA sisaldab tümiini (5-metüül-U),
aga RNA uratsiili?
Sellepärast,
et vastavad ensüümid eristaksid DNA
natiivseid U jääke neist U-dest, mis tekivad C spontaansel
muteerumisel C ®
U. Viimased kuuluvad asendamisele C-ga.
Miks
on DNAs
2'-desoksüriboos, aga
RNAs riboos?
Riboosi molekulis on kõrvuti asetsevad (vitsinaalsed)
2' ja 3' OH-rühmad, mis muudavad RNA
vastuvõtlikuks hüdrolüüsile.
NB!
RNA molekulid on loodud
peale kasutamist hävitamiseks.
DNA-l puudub 2'-OH,
mistõttu ta on stabiilsem.
NB!
Geneetiline materjal peab olema
stabiilne!
- on vastupidav lahjades hapetes
- hüdrolüüsub lahjas leelises
-
on vastupidav leeliste suhtes
-
lahjades hapetes depurineerub,
st puriinnukleotiidides β,N-glükosiidside
hüdrolüüsub
Eksonukleaasid
– hüdrolüüsivad otsmisi (terminaalseid) fosfodiestersidemeid;
Endonukleaasid
– hüdrolüüsivad ahelasiseseid fosfodiestersidemeid.
Restriktaasid
- II ja III tüüpi restriktaasid lõikavad DNA mõlema ahela teatavaid fosfodiestersidemeid
- Võivad potentsiaalse lõikamispunkti (saidi) juures ära tunda 4...6 ("six-cutter“) või rohkem aluseid
- Leiavad laialdast kasutamist geenitehnoloogias
DNA
SEKUNDAARSTRUKTUUR
Kaksikspiraal,
mida fikseerivad vesiniksidemed
komplementaarsete lämmastikaluste vahel.
DNA TERTSIAARSTRUKTUUR e superspiraalid
(a)
DNA kaksikheeliks on keerdunud spiraaliks ümber
imaginaarse toroidi.
(b)
DNA on keerdunud ümber iseenda.
(c)
Eukarüootne DNA (pikk, lineaarne ahel) on keerdunud ümber
iseenda (kromosomaalse DNA mudel).
Topoisomeraasid
ja güraasid - ensüümid,
mis võivad tekitada või kõrvaldada
superspiraale.
Kromosoomid
Kromosoomid on kromatiini struktureerunud vormid.
NB! 1DNA molekul + valgud = kromosoom
Kromatiin
= nukleoproteiinkompleks, koosneb DNAst, histoonidest ja
mittehistoonsetest valkudest.
- DNA keritakse ümber histoonvalgu poolide
- Histoonid on oligomeersed aluselised valgud; seostuvad tugevalt DNAga
- Tekib nukleosoom ehk “helmekee”. See on kromo -soomi formeerumise esimene etapp.
- Nukleosoomid pakitakse helikaalseteks kiududeks – solenoidideks.
Ribosoomide koostises on ~65%
rRNAd
ja ~35% valke
- rRNA toimib toena ribosoomsetele valkudele
- Sisaldab palju kaheahelalisi spiraliseerunud lõike
(hairpin- struktuurid ).
Tänu kõrgele ahelasiseste
järjestuste komplementaarsusele saavad
tekkida
aluspaarid.
- rRNA võib olla katalüütiliselt aktiivne.
METABOLISM
= KATABOLISMI JA ANABOLISMI INTEGRATSIOON
Katabolism:
- Degradatiivne (lagundav)
- Energiat tootev (ATP, NADH, FADH2)
- Rajad on konvergentsed, st koonduvad vähesteks lõppproduktideks .
Anabolism :
- Sünteesi rajad
- Energiat tarbiv
- Rajad on divergentsed, st hargnevad paljudeks erinevatekS biomolekulideks.
KATABOLISMI
3 ASTET
I
aste: Suured bio-molekulid lõhutakse
monomeerideks e. Ehitusblokkideks.
II
aste: Ehitusblokid lagundatakse
keskseteks ühenditeks: püruvaat, atsetüül-CoA.
III
aste: Keskse metaboliidi atsetüül-CoA
lõplik lagunda-mine.Tekivad 3 väikest lõpp-produkti: vesi, NH3,
CO2.
Süsinikuallika
järgi
* autotroofid
– kasutavad raku koostisainete
sünteesiks CO2
* heterotroofid
– kasutavad raku koostisainete
sünteesiks orgaanilisi ühendeid
Energiaallika
järgi
* fototroofid
– absorbeerivad valgusenergiat
* kemotroofid
– kasutavad
orgaaniliste (glükoos jt) või anorgaaniliste ainete (H2S;
S; NO2-;
NH4+
jt) redokSreaktsioonidel vabanevat keemilist energiat.
- Aeroobid – kasutavad hapnikku elektronide aktseptorina.
- obligatoorsed aeroobid – O2 on eluks vältimatu
- Obligatoorsed anaeroobid - ei talu üldse hapnikku (Clostridium botulinum )
- fakultatiivsed anaeroobid – võimelised kohanema anaeroobsete tingimustega, kasutades siis teisi elektronide aktseptoreid (Escherichia coli)
MAKROERGILISED
e. Energiarikkad molekulid.
*
Operatiivsed energiaallikad rakkudes
*
Peamiselt mitokondrites toodetava energia kohaletoimetajad
* Sisaldavad ühte või mitut kovalentset sidet, mille hüdrolüüsireaktsiooni ΔGo’
£
-30 kJ/mol
NB! Seda loetakse makroergilisuse
kriteeriumiks
Makroergiliste
ühendite esindajad:
*
Nukleosiidtrifosfaadid
(NTP) ATP;
GTP;UTP;CTP ΔGo’@-30
kJ/mol
* Enoolfosfaadid:
fosfoenoolpüruvaat (PEP) ΔGo’
@
-62 kJ/mol
* Atsüülfosfaadid:
1,3-difosfoglütseraat (1,3-BPG) ΔGo’
@
-50 kJ/mol
*
Tioolestrid: CoA-ga
aktiveeritud atsüülid ΔGo’
@
-30 kJ/mol
ATP
hüdrolüüs, millega kaasneb suur negatiivne vabaenergia muut (-ΔG)
on võimalik tänu
- elektrostaatilistele tõukejõududele positiivse osalaenguga fosfori aatomite vahel
- produktide stabiliseerimisele ionisatsiooni ja resonantsi teel
- entroopia kasvule hüdrolüüsi ja ionisatsiooni tulemusel
Glükolüüs
on ensüümireaktsioonide ahel, mille käigus glükoosi
molekul muundatakse 2
püruvaadi molekuliks.
Glükoos
+ 2 NAD+
+ 2 ADP + 2 Pi
→ 2
Püruvaat + 2 NADH + 2 ATP + 2 H2O
GLÜKOOSI
I FAAS
- See on energia investeerimise faas
- Tarbitakse 2 ATP molekuli, et hiljem toota 4 ATP molekuli.
- Glükoosi (C6) molekulist saadakse 5 keemilise reaktsiooni abil kaks glütseeraldehüüd-3- fosfaadi (C3) molekuli.
GLÜKOOSI II FAAS
- See on energia genereerimise faas
- 1 glükoosi molekuli kohta:
- tekib 2 püruvaadi molekuli
- tekib 2 NADH ja 4 ATP molekuli
- Osaleb 2 makroergilist fosfaati:
- 1,3-Difosfoglütseraat
- Fosfoenoolpüruvaat (PEP)
Miks
püruvaat on glükolüüsi tinglik lõpp- produkt ? Sest, et tema
metabolism jätkub.
Anaeroobsetes
tingimustes jätkub glükolüüsis formeerunud püruvaadi metabolism
fermentatsiooni
e. käärimisega.
OKSÜDATIIVNE
FOSFORÜÜLMINE on ADP ensümaatiline
fosforüülumine ATP-ks, mis toimub konjugeeritul O2
taandamisega H2O-ks
nende elektronide arvel, mis vabanevad taandatud koensüümide NADH
ja FADH2 reoksüdeerumisel.
Tsütokroomid
on valgud, mille prostee-tilisteks
rühmadeks on
erinevad heemid,
st nad on hemoproteiinid.
Translokaas
– ensüüm,
mis transpordib ATP maatriksist välja ja ADP sisse
Mida
näitab suhe P/O?
Näitab,
mitu ATP molekuli sünteesitakse iga ½O2
taandamisel H2O-ks,
st ühe elektronpaari (2e-)
ülekande käigus.
Fotosüntees
on süsivesikute süntees süsinikdioksiidist valguse energia arvel. 6 CO2
+ 6 H2O
® C6H12O6
+ 6 O2
KLOROPLASTIDE
EHITUS:
Tülakoidid
– volditud membraanidest
koosnevad struktuurid.
Tülakoidi
luumen – tülakoidvesiikulite siseruum
Graan
- kokku pakitud tülakoidvesiikulite kogum.
Strooma
– struktuuride-väline kolloidne lahus
FOTOSÜNTEES KAKS
FAASI:
Valgusreaktsioonid
-
rakud püüavad päikese
valgus-energiat ja muundavad selle keemiliste sidemete energiaks:
sünteesitakse ...
Vee
lagunemisel vabaneb O2
Pimereaktsioonid
e. süsiniku fikseerimise reaktsioonid - endergoonilised protsessid, kus CO2–st
sünteesitakse heksoose jt orgaanilisi
molekule
kasutades
- NADPH kui redutseerijat
- ATP kui energiakandjat
Klorofüllid
on fotosünteesi põhipigmendid,
mis neelavad nähtavat valgust.
Fotofosforüülimine
on ATP süntees
valgusenergia arvel
- Fotoindutseeritud elektronide voog H2O-lt NADP+-le pumpab H+ läbi tülakoidi membraani stroomast luumenisse. Tülakoidi membraanis moodustub elektrokeemiline gradient .
- ATP sünteesi juhib tülakoidi luumenisse pumbatud H+ voolamine tagasi stroomasse
- ATP sünteesi eest kloroplastides vastutab ensüüm ATP süntaas, mis koosneb membraani läbivast prootonikanalist CF0 ja katalüütilisest perifeersest membraanivalgust CF1.
Süsivesikute
süntees Calvini tsüklis – pimereaktsioonid.
See
on fotosünteetiline CO2 sidumise ja C taandamise tsükkel.
Calvini
(e. Calvin -Bensoni) tsüklis eristatakse 4 etappi :
I
etapp: CO2
sidumine aktseptorile, so pentoossuhkrule ribuloos-1,5-difosfaadile
ning trioosi 3-fosfoglütseraadi teke
II
etapp: 3-fosfoglütseraadi konversioon
glütseeraldehüüd- 3-fosfaadiks
III
etapp: Süsivesikute
süntees glütseeraldehüüd-3-fosfaadi
baasil
IV
etapp: ribuloos-1,5-difosfaadi
regenereerimine
Glükogenees
on uute glükoosi molekulide süntees
metaboliitidest, mis pole süsivesikud.
Inimene
vajab min 160 ±
20 g glükoosi päevas, sellest ~75%
tarbib aju.
Kust
glükoosi saab?
- toidust tärklise ja glükogeeni hüdrolüüsi tulemusena; süsivesikute vajadus 350 – 400 g/ööp
- sünteesitakse kehas - süsivesikutevaese dieedi, nälgimise, väga raske füüsilise koormuse puhul
Glükoneogenees
toimub maksas
(90%) ja neerudes
(10%)
- Soovitavalt moodustavad triglütseriidid 25...30% toidu-energiast
- Triglütseriidid on peamine energiavaru organismis (~85%)
- Toidurasvade hüdrolüüs toimub pankrease lipaaside toimel
- Koerasvade hüdrolüüs toimub hormoon -reguleeritava lipaasi toimel
- Hormoonid - glükagoon, epinefriin ja adrenokortikotroopne hormoon - käivitavad rasvadepoodes (adipotsüütides e. adipoosrakkudes) olevate rasvade hüdrolüüsi (rasvhapete vabastamise).
Rasvhapete
biosünteesi ja degradatsiooni radade 4 peamist erinevust:
Süntees toimub tsütosoolis, lagundamine mitokondrites.
2.
Selgroogsetes esineb sünteesiensüümide
kompleks ühe polü-peptiidina (6
aktiivsust), degradatsiooni ensüümid aga on eraldi
valkudena
3.
Biosüntees kasutab
redutseerijana NADPH
, lagundamine produtseerib
NADH ja
FADH2
kui potentsiaalseid energia- kandjaid ,
mis reoksüdeeritakse hingamisahelas.
4.
Rasvhapete sünteesi vaheühendid on seotud atsüülikandva
valguga (ACP-ga)
fosfopanteteiini SH -rühma kaudu,
degradat-siooni vaheühendid on seotud CoA-ga
fosfopanteteiini SH-rühma
kaudu.
Kolesterooli
biosüntees:
- Toimub peamiselt maksarakkudes
- Algab raku tsütosoolis 2 atsetüül-CoA molekuli
kondensatsiooniga
- Kulgeb üle mevaloonhappe sünteesi NB! See etapp reguleerib kogu protsessi kiirust!
- Jätkub skvaleeni sünteesiga
- Kolesterooli süntees lõpeb endoplasmaatilise retiikulumi
membraanis,
kus skvaleen konverteerub lanosterooliks,
millest üle mitme etapi tekib kolesterool.
Lipoproteiinid
– lipiididest ja valkudest koosnevad agregaadid,
mis transpordivad vees lahustumatuid lipiide
vereringes.
- Lämmastiku põhilised anorgaanilised vormid on : N2 atmosfääris, NO2- ja NO3- pinnases ja merevees. Need on lämmastiku oksüdeeritud vormid.
- Lämmastiku omastamine tähendab oksüdeeritud vormide
N2,
NO2-
ja NO3-
taandamist NH4+
-ks
- Mikroorganismid ja taimed omastavad oksüdeeritud vormis olevat lämmastikku ja redutseerivad seda.
- Kõikides biomolekulides on lämmastik redutseeritud vormis.
ASENDAMATUD:
Arginiin *
(väikelastele)
Histidiin *
Isoleutsiin
Leutsiin
Lüsiin
Metioniin
Fenüülalaniin
Treoniin
Trüptofaan
Valiin
- Aminohappeid ei kasutata energiaallikana, va nälgimine või kui toiduvalkude kogus ületab biosünteesi vajadused.
NB! Imetajatel pole aminohapete/valkude varu ja neid ei väljutata
organismist ka ilma degradeerimata (=lagundamata)
- Aminohapete katabolism erineb süsivesikute ja rasvhapete katabolismist selle poolest, et esmalt elimineeritakse aminorühm (desamineerimine) ja tekib süsinikuskelett, mis lagundatakse
- Desamineerimine toimub reeglina transamineerimise teel; aminorühm kantakse aminohappelt üle α-ketohappele (α-ketoglutaraat® glutamaat).
- Aminohappe desamineerimisel tekkinud süsinikuskelett transformeerub kas atsetüülCoA-ks või püruvaadiks, mida kasutatakse biosünteesides või lagundatakse TCA tsüklis lõplikult
- Glutamaat transamineerib oksaalatsetaadi aspartaadiks, mis siseneb uurea tsüklisse. Glutamaadi dehüdrogenaas vabastab glutamaadist NH4+, mis siseneb uurea tsüklisse karbamoüülfosfaadi koosseisus .
Desoksüribonukleotiidide
ainus roll: olla DNA sünteesi
lähteühendeiks.
Enamikus
organismides on substraatideks vastavad nukleosiiddifosfaadid (NDP-d)
2’-OH asendamist
hüdriidiga katalüüsib ensüüm ribonukleotiidi
reduktaas
DNA
replikatsioon
Uute
polünukleotiidahelate süntees, st DNA
(ema) molekuliga identsete koopiate
(tütarmolekulide) süntees. Baseerub lämmastikaluste
komplementaarsuse printsiibile.
DNA
kaksikheeliks (dsDNA) peab lahti keerduma, et tagada
DNA-polümeraasile
juurdepääs üheahelalisele ( ssDNA )
templeit- ehk šabloonahelale.
DNA
replikatsioon on
- semi- e. poolkonservatiivne (semiconservative), st tütarmolekulis üks ahel pärineb emamolekulist (“vana”), teine on sünteesitud (“uus”)
- kahesuunaline (bidirectional) - sisaldab kahte replikatsioonikahvlit ehk replikatsiooniharki, mis liiguvad vastassuunas
- poolkatkendlik (semidiscontinuous) – üks ahel (nn juhtiv ahel) kopeerub katkematult, mahajääv ahel kopeerub segmentide kaupa
(Okazaki fragmendid ), mis
seejärel omavahel ühendatakse
Replikatsiooni
ensüümid:
- DNA polümeraasid - katalüüsivad 3’®5’ fosfodiester- sidemete sünteesi :
- DNA polümeraas III - peamine replikatsiooni ensüüm, vajab RNA praimereid ; 10 subühikut, kiirus kuni 1 kb/s
- DNA polümeraasid I, II ja V - osalevad peamiselt vigade parandamisel
- DNA Polümeraas I – lõikab praimerid välja ja täidab lüngad
- Helikaasid – kaksikheeliksi lahtikeeramine
- DNA güraas e. topoisomeraas – lahtikeerdumisest tingitud pingete kompenseerimine, st DNA ahela läbilõikamine ja taas-ühendamine
- DNA primaas – oligonikleotiidsete RNA-praimerite süntees
- DNA ligaas – ühendab Okazaki fragmendid
DNA
polümeraas I liidab
desoksüribonukleosiid-monofosfaadi (dNMP) ühikud praimeri (ssDNA)
3’-otsa.
Telomeerid
– eukarüootsete kromosoomide lõpus paiknevad G-rikkad,
5...8 bp koosnevad
korduvjärjestused
(inimesel 1-12 tuhat bp). Kaitsevad DNA molekulide lõppe.
Selgroogsetel järjestus TTAGGG.
Telomeraas
on
RNA-sõltuv polümeraas
(ribonukleoproteiin, toimib kui pöördtranskriptaas), mis pikendab
3’-otsa korduvjärjestuste lisamisega
DNA
on asendamatu ja järjestus peab püsima muutumatuna –
põhimõtteline
erinevus võrreldes RNA, valkude, lipiidide
jt biomolekulidega
Millega
DNA muutumatus tagatakse
?
- Töökindla replikatsioonimehhanismiga – vigu 1/105… 106 bp
- Vigade parandamise süsteemidega puuduva aluse lisamiseks ja vale
või modifitseeritud aluse asendamiseks.
DNA
vigade tüübid :
*
replikatsioonivead
*
kühmud liigsete või puuduvate jääkide tõttu
*
UV-kiirguse indutseeritud muutused
Vigade
parandamise kaks põhimehhanismi :
- vale paardumise korrigeerimine
- meetodid keemiliste kahjustuste kõrvaldamiseks vigaste
lõikude
väljalõikamise teel
Vigade
parandamise süsteemid skaneerivad DNA duplekse vale
paardumise identifitseerimiseks, lõikavad vastava piirkonna välja
ja asendavad õigega
- Metüül-juhitav rada on E. coli rakkudes üheks meetodiks replikatsioonivigade kõrvaldamisel
Metüleerimine
toimub pärast replikatsiooni, seega vigu parandavad valgud
(ensüümid)
1)
identifitseerivad metüleeritud ahela (= vana ahel),
2)
eemaldavad uuest ahelast valesti paardunud alused,
3)
asendavad need õigete alustega.
- Keemiliste kahjustuste parandamine aluste väljalõikamise teel
Vigade
parandamisel osalevad ensüümid:
*
Endonukleaas * Eksonukleaas * DNA polümeraas III * Ligaas
DNA rekombinatsioon on
geneetilise informatsiooni ümbergrupeerumine kas ühe DNA molekuli
piires või kahe DNA molekuli vahel.
DNA
rekombinatsiooni klassifikatsioon
- Homoloogiline = üldine rekombinatsioon : võib toimuda iga kahe DNA molekuli vahel, millel esineb järjestuste homoloogiat.
Eukarüootides sagedane meioosis,
kus on oluline õige kromosomaalse segregatsiooni ja geneetilise
mitmekesisuse tagamisel . Kõikides
organismides roll replikatsioonis DNA vigade parandamisel.
- Asendispetsiifiline (site- specific ) rekombinatsioon: ensüümid rekombinaasid lõikavad DNA-d spetsiifiliste järjestuste juurest ning ligeerivad väljalõigatud lõigud teise DNA molekuli. Võib toimuda igas rakus. Funktsioonideks DNA integratsioon ja geeni ekspressiooni regulatsioon .
- Transpositsioon – mobiilsete DNA segmentide lülitamine uude askohta genoomis (nn “hüppavad geenid ”). Toimub nii kromosoomi piires kui kromosoomide vahel.
- Mutatsioonid – spontaansed või indutseeritud päritavad muutused kromosoomi nukleotiidide järjestuses
- Mutageenid – indutseeritud mutatsioonide esilekutsujad:
* ioniseeriv kiirgus * UV-kiirgus * keemilised
mutageenid
- Asendimutatsioonid – ühe aluspaari asendamine teisega
- Punktmutatsioonid - aluste ebaõige paardumise tõttu (üks alustest vales konformatsioonis või aluse analoog )
- Raamnihke mutatsioonid – nukleotiidi jääkide lisamine või eemaldamine
Pöördtranskriptaas
e. RNA-juhitav DNA
polümeraas on
retroviirustes esinev ensüüm, mis
sünteesib RNA ahelale komplementaarse DNA ( cDNA ) ahela.
Valgu
sünteesis osalevad mRNA, tRNA ja rRNA.
Eukarüootides
ja prokarüootides on regulatsioonil põhimõttelisi
erinevusi:
- Protsessid on ruumiliselt lahutatud - eukarüootidel toimub transkriptsioon tuumas, aga translatsioon tsütplasmas.
- Domineerib positiivse regulatsiooni mehhanism , st iga geen vajab transkriptsiooniks aktiveerimist
- Regulatsioon toimub regulatoorsete valkude vahendusel. Eukarüootsed regulatoorsed valgud on suured, keerulise ehitusega multimeersed kompleksid
- Kromatiin takistab regulatoorsete valkude juurdepääsu eukarüootsetele promootoritele.
Induktsioon ja
repression on operonide transkriptsiooni
kontrollimise meetodid
Induktsioon
- geenide ekspressiooni intensiivistumine vastuseks mingi metaboliidi
kontsentratsiooni tõusule; induktor
– aine, mis indutseerib ekspressiooni
Repressioon
– geenide ekspressiooni vähenemine
vastuseks metaboliidi kontsentratsiooni tõusule; repressor
– aine, mis represseerib geeni avaldumist valguna
Geneetiline
kood tähendab
nukleiinhappe ahela teatava lõigu
nukleotiidide järjestuse ja polüpeptiidahela aminohapete järjestuse
vastavust.
Geneetiline
kood sisaldab 64 (43)
koodonit.
Koodon
e.triplett
on 3
nukleotiidist koosnev järjestus mRNA
ahelas, mis kodeerib 1 aminohapet.
Geneetiline
kood on:
- kattumatu: iga nukleotiid kuulub ühe koodoni koostisse
- pidev (st mitte punkteeritud): aluste järjestust loetakse
fikseeritud
lähtepunktist alates katkematult
- degeneratiivne e. sünonüümne : enamikul juhtudel on
aminohape kodeeritud mitme erineva koodoniga e.
tripletiga
N:
GCU GCC GCA GCG º
Ala Sic! Tõstab koodi töökindlust!
- universaalne : koodon – aminohape vastavus on reeglina
sama
kõikides organismides.
Translatsioon
on protsess, mille käigus mRNA
molekuli nukleotiidide järjestus tõlgitakse polüpeptiidahela
aminohapete järjestuseks.
- Translatsiooni käigus sünteesitakse ribosoomikompleksides valgud.
- Valgu süntees prokarüootides, eriti E. colis, on enimuuritud.
- Valgu süntees prokarüootides on märksa lihtsam kui kõrgemates eukarüootides, kuid ka siin osaleb üle 100 erineva valgu ning palju erinevaid RNA molekule.
Staadiumid
Initsieerimine
: mRNA ja initsiaator aminoatsüül-tRNA sidumine
ribosoomi väikesele subühikule,
millele järgneb selle seondumine suurele subühikule
Elongatsioon:
peptiidsidemete süntees – korduv
tsükkel, mille käigus aminoatsüül-tRNAd lisanduvad ribosoom -mRNA
kompleksile ning polüpeptiidahel kasvab ühe aminohappejäägi võrra
Terminatsioon
:toimub ribosoomi jõudmisel "stop”-koodonini
RIBOSOOMID
- … on ribonukleoproteiinid (ca 2/3 rRNA + 1/3 valgud), mida leidub kõikide rakkude tsütosoolis, mitokondri maatriksis ja kloroplastide stroomas .
- … liiguvad / libisevad mööda mRNA ahelat , juhtides koodon- antikoodon interaktsioone mRNA ja aminoatsüül-tRNA-de vahel ning katalüüsides peptiidsidemete teket (kasutades ATP või GTP keemilist energiat
- … formeeruvad kahest subühikust - suurest ja väikesest
Hormoonid
on ...
- ...keemilised ühendid, mida toodetakse spetsialiseerunud näärmekudedes, sekreteeritakse otse verre või lümfi ja transporditakse sihtmärk-rakuni, millele toimides avaldub nende regulatoorne toime
- ...bioaktiivsed endogeensed ained, mida kesknärvisüsteemi kontrolli all sünteesitakse endokriinnäärmetes ja mis vere vahendusel reguleerivad metaboolseid protsesse ja füsioloogilisi funktsioone
- ... organismis tekkivad ained, mis edastavad signaali, et tekitada muutus sihtmärk-raku tasandil. Nad on primaarsed signaalmolekulid (primaarsed ülekandjad), mille sidumiseks on sihtmärk-rakul spetsiifilised retseptorid .
Hormoonide
klassid keemilise ehituse järgi:
- Steroidid – sünteesitud kolesteroolist; reguleerivad metaboolseid protsesse, soolade/vee tasakalu , põletikuprotsesse, seksuaalfunktsiooni
- Aminohapete derivaadid - epinefriin, jt.- reguleerivad silelihase kontraktsioone, vererõhku, südametegevust, lipolüüsi, glükogeeni fosforolüüsi
- Peptiidid /valgud – ( insuliin ) reguleerivad mitmeid funktsioone kudedes, kaasaarvatud teiste hormoonide vabanemine
- Eikosanoidid - (prostaglandiinid, tromboksaanid, leuko -trieenid) – rakuhormoonid, oluline regulatoorne roll kudede homöostaasis ning
põletiku
ja vähkkasvajate tekkes
Klassid
funktsiooni järgi:
- Endokriinne – endokriinnäärme rakud sünteesivad hormooni ja sekreteerivad selle verre, kus transporditakse sihtmärk-rakuni
- Parakriinne – hormoon sünteesitakse rakus ning toimib naaberraku retseptoritele
- Autokriinne - hormoon sünteesitakse rakus ning toimib sama raku retseptoritele
- Neurokriinne – hormoon ( neurotransmitter ) sünteesitakse närvirakus ning toimib naaberraku retseptoritele
- Neuroendokriinne – hormoon sünteesitakse närvilõpmetes ja sekreteeritakse rakkudevahelisse ruumi, kust vere vahendusel transporditakse sihtmärk-rakuni
Hormoon
on esmane (primaarne) signaali
ülekandja, kuid alati sellest ei piisa ja sihtmärk-rakus vajatakse sekundaarset ülekandjat
Sekundaarne signaali ülekandja ...
- ... vabaneb sihtmärk-rakus, kui hormoon seondub raku plasmamembraanil asuvale ekstratsellulaarsele retseptorile
- ...aktiveerib või inhibeerib tsütoplasmas või tuumas kulgevaid protsesse
- ... võib olla cAMP , cGMP , Ca2+, IP3, DAG, NO• jt;
- ... tuleb degradeerida või kõrvaldada rakust, kui signaal on edastatud NB! Oluline protsess!
- Retseptorvalgud (7-transmembraanse segmendiga retseptorid, 7-TMS); N: adrenaliini ja glükagooni retseptorid. Neil on
- Retseptorensüümid (1-transmembraanse segmendiga retseptorid, 1-TMS); N: insuliini retseptor
- ekstratsellulaarne hormooni (ligandi) sidumissait
- intratsellulaarne katalüütiline domeen – kas türosiini kinaas või guanülüültsüklaas (sünteesib cGMP)
- Oligomeersed ioonkanalid - valgukompleksid, mille subühikud koosnevad paljudest transmembraansetest segmentidest.
N:
atsetüülkoliini retseptor
- Tuumaretseptorid (steroidide retseptorid) – steroidhormooni sidumise järel mõjutavad teatud geenide transkriptsiooni;
N: östrogeeni retseptor
Kõik kommentaarid