Biokeemia II EKSAMiks kordamine (0)
Aminohapete biosünteesDefineerige mis on lämmastiku fikseerimine ja millised organismid on võimelised seda protsessi läbi viima. Kirjeldage milline on lämmastiku tsükli üldskeem looduses ja millisel kujul on meie organism võimeline lämmastikku kasutama biosünteetilistes protsessides.
Molekulaarne lämmastik N2
muundatakse redutseeritud või oksüdeeritud vormiks. Atmosfääris leiduv N2
on keemiliselt väga inertne ning metabolismis kasutamiseks tuleb see
redutseerida NH3 kujule . Toimub UV kiirguse ja välgu kaasabil maa atmosfääris. Eluslooduses on lämmastikku fikseerima võimelised vähesed mikroorganismid , kes redutseerivad elementaarse lämmastiku ammooniumiks. Mõned sellistest bakteritest on vabalt elavad, paljud on aga taimede,
eelkõige liblikõieliste taimede, sümbiondid. Valdav enamus
organisme on võimeline omastama lämmastikku NH4+
vormis.
Summaarne reaktsioon
N2
+ 10H+
+ 8e-
+ 16ATP Z 2NH4+
+ 16ADP + 16 Pi + H2
Kirjeldage reaktsiooni, mida katalüüsib nitrogenaasi kompleks , pöörates tähelepanu üldisele stöhhiomeetriale ning energia tarbimisele . Selgitage, millised on reduktaasi ja nitrogenaasi biokeemilised funktsioonid.
Nitrogenaas
katalüüsib õhulämmastiku fikseerimist. Koosneb dinitrogenaasist
ja dinitrogenaasi reduktaasist. Taandab õhus sisalduva N2
ammooniumiks.
Kasutab ATP hüdrolüüsil vabanevat energiat N2-s
Sisalduva kolmiksideme lõhustamise reaktsiooni aktivatsioonibarjääri
ületamiseks. Inaktiveerub õhuhapniku toimel.
Selgitage milline on glutamaadi ja glutamiini funktsioon ammooniumi assimileerimisel. Kirjeldage reaktsioonid, mida katalüüsivad glutamaadi dehdrogenaas, glutamiini süntetaas ja glutamiini süntaas.
Nende
reaktsioonidega toimub anorgaanilise lämmastiku sisenemine orgaaniliste ühendite koosseisu.
Glutamaadi
dehüdrogenaas kasutab NADPH redutseerivaid ekvivalente ammooniumi
sidumiseks α-ketoglutaraadiga.
Glutamiini
süntetaas on põhiline ensüüm mida kasutatakse ammooniumi
fikseerimiseks. Kasutab ATP energiat reaktsiooni läbiviimiseks. Substraadiks glutamaat.
Asendatavad ja hädavajalikud aminohapped .
Asendatavad
aminohapped on sellised mille biosünteesi rajad on loomadel olemas.
Biosünteesi rajad lihtsamad. Hädavajalikud aminohapped
produtseeritakse taimede ja bakterite poolt. Biosünteesi rajad on pikemad ja keerukamad.
Hädavajalikud:
Histidiin, Isoleutsiin, Leutsiin , metioniin , fenüülalaniin, treoniin , trüptofaan, valiin.
Asendatavad: alaniin , asparagiin, aspartaat , tsüsteiin, glutamaat, glütsiin, proliin , seriin , türosiin(moodustub fenüülalaniinist, mida ei saa asendada ).
Asendamatud
aminohapped on saadavad ainult toidust. Asendatavad aminohapped on
inimese organismis sünteesitavad.
Aminohapete kuus biosünteetilist perekonda ja seitse eellasmolekuli.
1. 3-fosfoglütseraadi perekond Seriin
2. α-ketoglutaraadi perekond Glutamaat
3. Oksaalatsetaadi perekond asparataat,
treoniin
4. Püruvaadi perekond alaniin
5. Riboos -5- fosfaadi perekond Histidiin
6. fosfoenoolpüruvaat + erütroos-4- fosfaat fenüülalaniin
Alaniini, aspartaadi ja glutamaadi üheetapiline biosüntees.
Kõik
aminohapped on sünteesitavad glükolüüsi, TCA tsükli või
pentoosfosfaadi raja vaheühenditest. Süntees leiab aset tsütosoolis
ja/või mitokondris .
Substraatideks
on oksaalatsetaat, püruvaat ja alfa-ketoglutaraat. Aspartaadi
aminotransferaasi abil viiakse aminorühm glutamiinilt
oksaalatsetaadile ja tekib aspartaat ja alfa-ketoglutaraat. Alaniini
aminotransferaas viib aminorühma glutamiinilt püruvaadile ja tekib
alatiin ja alfa-ketaglutaraat. Kõik käib läbi PLP.
Glutamaadi perekonna aminohapete biosüntees.
α-ketoglutaraat
on tsitraaditsükli vaheühend, mille kaudu on glutamaadi süntees
seotud tsitraaditsükliga.
Glutamaadi süntaas – peamine rada bakterites ja taimedes; puudub loomadel.
L-glutamaadi dehüdrogenaas (kõigis organismides)
α-ketoglutaraadi transamineerimine
Püridoksaalfosfaat aminohapete biosünteesi reaktsioonides.
Kofaktor transamineerimise reaktsioonis. Vit B6. Püridoksaalfosfaat osaleb
reaktsioonides, mis on seotud α-aminohapete metabolismiga. Vastav
aminorühm moodustab katalüütilise tsükli käigus omakorda
koensüümiga Schiffi aluse, mis stabiliseerib mitmesuguseid
vaheolekuid.
THF struktuur, derivaadid , tekkereaktsioonid, funktsioonid metabolismis.
Tetrahüdrofolaat
THF on koensüüm. Folaat konverteeritakse tetrahüdrofolaadiks
dihüdrofolaadi reduktaasi toimel. (Metüül-THF on põhiline veres ringlev vorm.) Teostab ühesüsinikuliste jääkide ülekannet
paljude biomolekulide sünteesil. (Glütsiin, seriin, trüptofaani
lagundamine, histidiini lagundamine, puriini ja pürimidiini
biosüntees.)
S-adenosüülmetioniin, struktuur, funktsioonid metabolismis.
Kasutatakse
metüüli doonorina või osalisena polüamiinide sünteesis.
S-adenolüülmetioniinist tekkiv homotsüsteiin kasutatakse
tsüsteiini produtseerimiseks.
B12 vitamiini ehk metüülkoobalamiini funktsioon metabolismis.
B12
vajatakse Thr, Ile, Val metabolismiks . vajatakse foolhappe metabolismis, nukleiinhapete sünteesiks, koliini (B4)
sünteesiks, pantoteenhappe ja C vitamiini funktsioneerimiseks,
erütrotsüütide arenguks, müeliini sünteesiks, naha normaalseks
arenguks.
AMINOHAPETE KATABOLISM JA UUREA TSÜKKEL
Kirjeldage mis juhtub organismis toiduga saadud aminohapetega juhul, kui neid ei kasutata valkude biosünteesiks.
Toidust
saadavate valkude lagundamine algab maos, kuhu sekreteeritakse
proensüümi pepsinogeeni. Pepsinogeen konverteeritakse pepsiinA-ks.
Enamus lagundmisest toimub kaksteistsõrmikus pankrease poolt
sekreteeritud ensüümide poolt. Nende proteaaside hulgas on nii ekso - kui endoensüüme ja nende kombineeritud toimel tekivad
aminohapped, dipeptiidid ja tripeptiidid. Kõik need hüdrolüüsi produktid adsorbeeritakse limaskesta rakkude poolt.
Kirjeldage kus toimub aminohapete degradeerimine imetajate organismis.
Algab
maos. Enamus lagundamisest toimub kaksteistsõrmikus pankrease poolt
sektreteeritud ensüümide poolt.
Analüüsige aminotransferaaside poolt katalüüsitavat reaktsioone. Katalüüsis osalev kofaktor ja reaktsioonietapid. Schiffi aluse struktuur. Seletage kuidas toimub α-aminorühma eemaldamine seriini ja treoniini koosseisust.
Aminohapete
koosseisust kantakse lämmastik glutamaadi koosseisu transaminaaside
abil, kust järgnevalt eemaldatakse glutamaadi dehüdrogenaasi poolt.
Transaminaaside tulemusel muutuvad aminohapped ketohapeteks.
Sellistes reaktsioonides osaleb kofaktorina PLP. Püridoksaalfosfaat
osaleb reaktsioonides, mis on seotud α-aminohapete metabolismiga.
Vastav aminorühm moodustab katalüütilise tsükli käigus omakorda
koensüümiga Schiffi aluse, mis stabiliseerib mitmesuguseid
vaheolekuid.
Kirjeldage glutamaadi dehüdrogenaasi reaktsiooni, regulatsiooni ja analüüsige rolli metabolismis. NAD+ sidusfunktsioon lämmastiku metabolismis ja energia genereerimisel.
Kõige
olulisem reaktsioon , millega vabastatakse inimese organismis
aminohapete koostisest ammoonium , on glutamaadi dehüdrogenaasi
reaktsioon. Glutamaadi koosseisu liidetakse lämmastik mitmesuguste
aminotransferaassete reaktsioonide tulemusel, (seetõttu on
praktiliselt kõigi aminohapete koosseisust ammooniumi vabastamine
võimalik üle glutamaadi. Glutamaadi dehüdrogenaasi reaktsioon on
sisuliselt oksüdatiivne deamineerimine.) Reaktsiooni käigus
moodustub Schiffi alus, mis hüdrolüüsitakse α-ketoglutaraadi
moodustumisega. Vaba ammoonium on toksiline , seetõttu on glutamaadi
dehüdrogenaasi reaktsioon hästi kontrollitud. Glutamaadi
dehüdrogenaasi positiivseks allosteeriliseks effektoriks on ADP,
inhibiitoriteks aga GTP ja NADH.
Püridoksaalfosfaadi struktuur, funktsionaalsed rühmitused.
Kofaktor
transamineerimise reaktsioonis. Funktsioneerib vaheühendi kandjana.
Vit B6.
Erinevad lämmastiku metabolismi jääkproduktid eluslooduses.
Karbamiid,
NH4+, kusihape
Karbamiidi molekuli lämmastiku ja süsiniku aatomite päritolu. Uurea tsükli adaptermolekul. Miks võime seda molekuli nimetada katalüsaatori funktsiooni kandvaks
N
– üks lämmastiku aatom tuleb aspartaadist, teine NH4+-st.
C
– CO2-st
Uurea tsükli ensüümid ja vaheühendid. ATP tarbimine. Reaktsioonide rakusisene lokalisatsioon.
Uurea
tsükli toimumisks on vajalikud 5 reaktsiooni.
Karbamoüülfosfaadi
süntetaas I on mitokondriaalne ensüüm, mis katalüüsib karbamoüülfosfaadi teket
ammooniumist ja vesinikkarbonaadist. Selle reaktsiooni tulemusena
toimub ammooniumi fikseerimine. Karbamoüül
fosfaadi süntetaasi I reaktsioon on kogu uurea tsükli jaoks kiirust
limiteeriv etapp.
karbamoüülfosfaadi
süntetaas II,
paikneb tsütosoolis ja kasutatakse pürimidiinide biosünteesi
esimeses etapis . Kasutab lämmastiku allikana glutamiini (I kasutab
vaba ammooniumi).
Ülejäänud
4 reaktsiooni on kitsamalt võetult uurea tsükli reaktsioonid.
Tsükkel
algab karbamoüülfosfaadi liitmisega ornitiinile. Reaktsiooni
katalüüsib ornitiini
transkarbamoülaas ja
produktiks on tsitrulliin. Tsitrulliin liigub mitokondrist välja
spetsiifilise transporteri vahendusel, tsükli ülejäänud
reaktsioonid toimuvad tsütosoolis.
Teise
reaktsioonina toimub ATPst sõltuvas reaktsioonis tsitrulliini ja
aspartaadi vaheline reaktsioon, milles tekib arginiinosuktsinaat.
Reaktsiooni katalüüsib arginiinosuktsinaadi
süntetaas.
ATPst moodustub AMP ning pürofosfaat.
Kolmandas
reaktsioonis, mida katalüüsib arginiinosuktsinaas,
tekib arginiinosuktsinaadi lagunemisel arginiin ja fumaraat.
Neljandas
reaktsioonis, mida katalüüsib arginaas
vabaneb
uurea ja regenereerub ornitiin. Ornitiini jaoks on samuti olemas
spetsiifiline transporter, mis võimaldab tsükli lõpetamiseks
ornitiinil taas mitokondrisse siseneda.
Seitse aminohapete süsiniku katabolismi produkti .
Atseetoatsetaat,
AcCoA, püruvaat, oksaalatsetaat, ketoglutaraat, suktsinüülCoA,
fumaraat.
Glükogeensed ja ketogeensed aminohapped.
Vastavalt
katabolismi produktide jaotatakse aminohapped 2 klassi:
Glükogeensed
aminohapped – süsinikuskelett on konverteeritav
glükoneogeneetiliseks substraadiks ehk TCA tsükli vaheühendiks.
Nende aminohapete arvel on võimalik sünteesida glükoosi.
Ketogeensed
aminohapped – süsinikuskelett on konverteeritav AcCoA-ks,
atseetoatsetüülCoA-ks või atseetoatsetaadiks. Ketogeensed
aminohapped on vastavalt nende nimele potentsiaalselt ketokehade
alikaks. Samas ei saa puhtalt ketogeensete aminohapete arvel glükoosi
sünteesida. Paljud aminohapped kuuluvad aga korraga mõlemisse
kategooriasse.
Puhtalt
ketogeensed: Lüsiin, leutsiin
Nii
ketogeensed kui glükogeensed: isoleutsiin, treoniin, fenüülalaniin,
trüptofaan, türosiin
Ülejäänud
on glükogeensed.
Püruvaadi perekonna aminohapped.
Alaniin,
valiin, leutsiin.
Oksaalatsetaadi perekond.
Aspartaat,
asparagiin, metioniin, treoniin, isoleutsiin, lüsiin.
Fumaraadi perekond.
Türosiin,
fenüülalaniin.
α-ketoglutaraadi perekond.
Glutamiin ,
proliin, arginiin.
SuktsinüülCoA perekond.
AcCoA ja atseetoatsetüülCoA perekond.
Lüsiin,
leutsiin.
Monooksügenaasid ja dioksügenaasid. Hapniku ja glutatiooni roll aromaatsete aminohapete katabolismis.
Monooksügenaas
liidab substraadiga hapnikuaatomi, dioksügenaas liidab substraadiga
hapnikumolekuli.
Fenüülketonuuria jt aminohapete metabolismi defektid
Fenüülalaniini
hüdroksülaasi puudulikkus põhjustab fenüülketonuuriat, mis on
suhteliselt sageli esinev gen. defekt . sellise defekti puhul akumuleeruvad organismis mitmesugused fenüülketoonid, nt
fenüülpüruvaat, mis on uriinis detekteeritavad. Fenüüdketoonid
takistavad aju normaalset arengut. U 10 a vanusest alates kui aju
areng on praktiliselt lõppenud, pole nii range kontroll enam
vajalik.
NAD+, THF, CoA, FAD, biotiini, B12 ja TPP aminohapete metabolismis.
NAD+ ja NADP+ – Kahe elektroni ülekandega seotud redoksreaktsioonid. PDH kompleksis – NAD+ poolt reoksüdeeritakse FADH2, tekib NADH.
Biotiin on vajalik hargnenud ahelaga aminohapete katabolismis. SuktsinüülCoA süntees propionüülCoA-st vajab kofaktorina biotiini. Samuti on biotiin vajalik β-metüülkrotonüülCoA karboksülaasi jaoks. Töötab leutsiini lagundamise rajas.
THF
teostab ühesüsinikuliste jääkide ülekannet paljude biomolekulide
sünteesil. Glütsiin, seriin, trüptofaani lagundamine, histidiini
lagundamine, puriini ja pürimidiini biosüntees.
CoA
- Atsüülrühmade ülekanne. Atsetüül- lipoamiid loovutab atsetüüli CoA koosseisu, tekib dihüdroksülipoamiid.
FAD
- Nii ühe- kui kaheeletroniliste ülekannetega seotud
redoksreaktsioonid. FAD
redutseeritakse dihüdrolipoamiidi poolt, regenereerub vaba
lipoamiid.
B12
- Metüülrühmade ülekanne.
TPP
- Kahesüsinikuliste karbonüülrühma sisaldavate
fragmentide ülekanne.
FOTOSÜNTEES
Kirjeldage lühidast PSI ja PSII funktsioone.
PSI
– tema pigmendid osalevad NADPH2
moodustamisel. Reaktsioonide tulemusena saadakse ATP ja NADPH2
molekulid mida vajatakse fotosünteesi pimedusstaadiumi
reaktsioonides.
PSII
– valgustneelav kompleks. Asub tülakoidide membraanides. Kasutab valgusenergiat vee molekulide lagundamiseks ja plastokinooni
redutserimiseks. Vee lagundamisel saadud prootonid aitavad tekitada
prootongradienti, mida kasutab ATP süntaas. Varustab elektrontransportahela elektronidega.
Kirjeldage lühidalt fotosünteetilist elektronide ülekandeahelat, selle peamisi komponente ning tsüklilist ja mittetsüklilist protsessi.
Reoksüdeeritakse
kofaktorid. Konverteeritakse energia sellisele kujule mis on
kasutatav ATP sünteesiks. Elektronide
ülekandeahela ja ATP sünteesi side ei ole otsene, vaid toimub
vahendatuna elektrokeemilise gradiendi poolt.
Kompleks
I – sisaldab vähemalt 42 polüpeptiidi, FMN ja 5-7 Fe-S klastrit.
NADH dehüdrogenaasi kompleks. Toimub elektronide ülekanne NADH-lt
CoQ-le. Iga NADH oksüdeerimisega antakse edasi 2 elektroni ja
pumbatakse välja 4 prootonit. Rotenoon on inhibiitor , ubikinooni
konkurentne, ei võimalda kompleksil I siduda elektronide
ülekandeahela järgmist mobiilset komponenti.
Kompleks
II – sisaldab 7-8 polüpeptiidi, FAD, 3Fe-S klastrit ja tsütokroomi
b560. Suktsinaadi dehüdrogenaas. Ei toimu prootonite pumpamist.
Kompleks
III – sisaldab tsütokroomi b, tsütokroomi c1 ja Fe-S valku.
Redokstsentriteks on kaks b tüüpi heemi. Kompeks III baasil toimub
Q tsükkel – aluseks on ubikinoonilt pärit elektronide lahknemine kahte erinevat rada pidi.
Kompleks
IV – sisaldab tsütokroomi a, tsütokroomi a3 ja 2 Cu iooni
sisaldavat tsentrit. Tsütokroomi c oksüdaas. Tema funktsiooniks on
hapniku redutserimine tsütokroom c arvel.
Elektronide pumpamine maatriksist membraanidevahelisse ruumi toimub kompleksides
I,III ja IV. Olulised on ka NADH ja suktsinaat , CoQ – elektronide
kandja, mis vahendab elektrone primaarsete dehüdrogenaaside ja
kompleks III tsütokroomi b vahel. Tsütokroom c.
Kirjeldage Calvini eksperimente, mida ta viis läbi kasutades Corella kultuuri ja 14CO2.
Chlorella
kultuuri märgiti 14CO2
abil lühikeste pulssidega ja analüüsiti esimesi CO2
fikseerimise produkte paberkromatograafia ja autoradiograafia abil.
Avastas calvini tsükli.
Kirjeldage 3-fosfoglütseraadi moodustamise protsessi ribuloos 1,5-bisfosfaadi karboksülaasi reaktsioonis.
Ribuloos
bisfosfaadi karboksülaas katalüüsib CO2 fikseerimist:
Ribuloos-1,5-bisfosfaat
+ CO2 → 2 3-fosfoglütseraati.
Alternatiivina
katalüüsib sama ensüüm oksügenaasi reaktsiooni, seetõttu nim
teda RuBP karboksülaas/oksügenaas ( RuBisCO ).
Kirjeldage kuidas moodustub fosfoglükolaat Rubisco oksügenaasi reaktsioonis. Defineerige mis on fotorespiratsioon.
Ribuloos
bisfosfaadi karboksülaas katalüüsib oksügenaasi reaktsiooni,
seetõttu nim teda RuBP karboksülaas/oksügenaas (RuBisCO).
Fotorespiratsioon
– valgushingamine. Valgusest sõltuv O2 neeldumine ja CO2
eraldumine.
Joonistage skeem, mis kirjeldab 3-fosfoglütseraadi konverteerimist fruktoos -6-fosfaadiks ja ribuloos 1,5-bisfosfaadi regenereerimist.
PG kinaas GAP dehüdrogenaas
3-PG –(ATPADP)
1,3-BPG -(NADPHNADP++
Pi)
GA-3-P
trioosfosfaadi isomeraas
GAP
–enediool------------------
DHAP
aldolaas
GAP + DHAP ------------
fruktoos-1,6-fosfaat
fruktoos-1,6-bisfosfataas
fruktoos-1,6-bisfosfaat
-------------------------
fruktoos-6-fosfaat
Kirjutage Calvini tsükli tasakaalustatud võrrand koos kulutatud ATP ja NADPH stöhhiomeetriaga.
Hinnake kui efektiivne on fotosüntees.
Kirjeldage tioredoksiini rolli fotosünteesi regulatsioonis.
FBP,
SBP ja NADP+ aktiivsust kontrollib proteiinide süsteem –
tioredoksiinid. Mõned tioredoksiinid reguleerivad kloroplastides
malaadi dehüdrogenaasi, mõned aktiveerivad
fruktoos-1,6-bisfosfaati.
Kirjeldage C4 rada ja selle tähtsust troopilistel taimedel. Selgitage kuidas võimaldab CO2 transport inhibeerida Rubisco oksügenaasi reaktsiooni.
GLÜKOGEEN
Kirjeldage glükogeeni struktuuri ja glükogeeni funktsioone maksas ja lihastes.
Glükogeen
koosneb glükoosijääkidest. Maksas polüsahhariidne tagavara vere
gükoositaseme reguleerimiseks. Lihastes tagavara kiireks glükoosi
allikaks.
Iseloomustage glükogeeni graanulite füsikokeemilisi omadusi ja rakusisest lokalisatsiooni.
Graanulid
tsütosoolis. Glükogeen moodustab tihedaid graanuleid rakkudes, kus
teda deponeeritakse. Glükogeeni graanulid sisaldavad glükogeeni,
sünteetilisi ja degradatiivseid ensüüme ja regulatoorseid valke.
Selgitage millise eelise annab glükogeeni fosforolüüs võrreldes hüdrolüüsiga.
Glükogeeni
fosforolüütiline lagundamine on energeetiliselt kasulikum kui
hüdrolüüs. See võimaldab säästa ATP kulutamist glükoosi
kulutamiseks, sest vajaminev G6P on tekkinud juba Pi-ga reageerides.
Kirjeldage milliste ensümaatiliste reaktsioonide tagajärjel toimub glükogeeni degradatsioon . Kirjutage glükogeeni fosforülaasi, transferaasi ja α-1.6-glükosidaasi (hargnemisi kõrvaldav ensüüm) reaktsiooniskeemid.
Võrrelge fosfoglükomutaasi ja fosfoglütseromutaasi reaktsioonide mehhanisme.
Fosforülaasi
toimel tekkinud glükoos-1-fosfaat konverteeritakse
glükoos-6-fosfaadiks fosfoglükomutaasi reaktsioonis. See ensüüm
nagu ka fosfoglütseraadi mutaas sisaldab fosforüülitud aminohappe
jääki aktiivtsentris. Fosfoglükomutaasil on fosforüülitud
jäägiks Ser. Fosfoglükomutaasi protsess on täielikult pöörduv.
Selgitage millise olulise funktsiooniga on maksas glükoos 6-fosfataas ning millised tagajärjed on meie organismi metabolismile selle ensüümi puudumine lihastes ja ajus.
Eemaldab
fosfaadi. Sellega on võimalik tekkinud glükoosi transport vere
kaudu teistesse kudedesse. Lihaskoes puudub glükoos-6-fosfataas,
seega on glükoos-6-fosfaat lihasrakkudes kinni ja glükoosi verre ei
saadeta.
Võrrelge erinevusi glükogeeni lagundamisel ja sünteesil. Kujutage UDP-glükoosi struktuur ja selgitage mis on selle ühendi funktsioon.
UDP-glükoosi
süntees UDP-glükoosi fosforülaasi reaktsioonis. Glükogeeni
sünteesiks on vajalik praimer (glükogeniin või glükogeeni fragment ). C-4 on ahela mitteredutseeriv ots, kuhu uued glükoosi
jäägid alati lisatakse. Reguleeritud ensüüm: glükogeeni süntaas.
(UDP-glükoos substraadiks).
Lagundamine
ei ole lihtsalt sünteesi pöördprotsess. Glükogeen → G1P.
Degradeeritakse glükoosi ahelaid mitteredutseerivast otsast kuni
igale ahelale jääb enne hargnemist 4 glükoosi jääki. Hargnemised
kõrvaldatakse glükosüüli transferaasi (kõrvaldab 3 neljast
allesjäänud glükoosi jäägist) ja α-amüloglükosidaasse
aktiivsuse poolt (kõrvaldab allesjäänud α16
sidemega seotud glükoosi jäägi).
UDP-glükoos on kastatav mitmes erinevas metaboolses reaktsioonis, muuhulgas galaktoosi sünteesil ja glükuroonhappe produtseerimisel. Enamus UDP-glükoosist kasutatakse glükogeeni sünteesiks. Galaktoos – kasutab UDP-glükoosi UMP doonirina.
Glükogeeni süntaas ei ole võimeline glükogeeni sünteesima ilma juuretiseta (praimerita). Uued polümerisatsioonitsentrid sünteesitakse spetsiifilisel valgul, glükogeniinil. Glükogeniin glükosüleeritakse türosiini jäägil ja töötab siis autokatalüütiliselt lisades mitu glükoosi jääki esimesele valguga seotud suhkrule, enne kui glükogeeni süntaas katalüüsi üle võtab. Substraadiks kasutatakse selles protsessis samuti UDP-glükoosi.
Loetlege glükogeeni sünteesiks vajalikud reaktsioonid.
3
reaktsiooni:
Fosfoglükomutaas
– konverteerib omavahel G6P ja G1P. Kui glükogeeni lagundatakse,
konverteerib glükomutaas tekkiva G1P G6P-ks.
UDP-glükoosi
pürofosforülaas – katalüüsib UTP liitumist G1P-ga, millega
kaasneb pürofosfaadi teke.
Glükogeeni
süntaas – kasutab substraadina UDP-glükoosi ja tema poolt
katalüüsitava reaktsiooni tulemuseks on omavahel seotud
glükoosijääkide polümeer. Ühe katalüütilise reaktsiooni
tulemusena vabaneb UDP ja tekib ühe monomeeri jäägi võrra
pikendatud polümeer.
Hargnemist
sünteesiv ensüüm katalüüsib lühikeste α-1-4-glükosiidsidet
sisaldavate glükoosi polümeeride ülekannet α-1-6-glükosiidsideme
külge.
Selgitage mis on glükogeniin ja kuidas see funktsioneerib.
Glükogeeni
süntaas ei ole võimeline glükogeeni sünteesima ilma juuretiseta e
praimerita – selleks praimeriks ongi glükogeniin.
GLÜKOGEENI
SÜNTEESI JA LAGUNDAMISE REGULATSIOON
Võrrelge glükogeeni sünteesi ja lagundamise kontrolli.
Glükogeeni
süntaas on põhiline kontrollreaktsioon glükogeeni sünteesil
loomsetes rakkudes.
Kirjeldage, kuidas mõjutavad glükogeeni metabolismi lihastes ja maksas insuliin , glükagoon ja epinefriin .
Insuliin
– stimuleerib glükogeeni sünteesi.
Glükagoon
ja epinefriin – stimuleerivad lagundamist.
G-valkudega seotud retseptorid ning signaaliülekande kaskaad, mis reguleerib glükogeni süntaasi aktiivsust.
G-valkudega
seotud retseptorid käivitavad sündmuste ahela, mis viib rakus ühe
või mitme rakusisese käskjälgmolekuli kontsentratsiooni
muutumisele. Tähtsamad rakusisesed käskjalgmolekulid, mis mõjutavad
paljusid rakusiseseid protsesse on: cAMP , Ca- ioonid ,
diotsüülglütserool (DAG), cGMP , ionistool-trisfosfaat.
Joonistage cAMP struktuur ja selgitage kuidas see ühend tekib adenülaadi tsüklaasi reaktsioonis.
Adenülaadi tsüklaas katalüüsib cAMP teket ATPst. Signaali tansduktsiooni protsessiga kaasneb hormooni sidumise efekti amplifikatsioon. Ühe hormooni molekuli sidumise tagajärjel tekib palju cAMP molekule.
Fosforülaas a ja fosforülaas b, T ja R vorm, allosteeriline aktiivsuse kontroll.
Fosforülaasi kinaasi ja valgu (glükogeeni) fosfataasi aktiivsused
Glükolüüs
SISSEJUHATUS
Defineerige glükolüüs. Selgitage milline on glükolüüsi roll energeetilises metabolismis.
Glükolüüs
on rada, millega glükoos konverteeritakse püruvaadiks. Selles
protsessis moodustub 2 ATP-d. Glükoos aktiveeritakse fosforüülimise
teel. Fosforüülitud vaheühedid konverteeritakse makroergilisteks
ühenditeks. Makroergiliste ühendite energiat kasutatakse ATP
sünteesiks. Summaarne reaktsioon: Glükoos + 2ADP
+ 2Pi + 2NAD+ 2Püruvaat
+ 2NADH + 2ATP + 2H2O + 4H+
Kirjeldage 3 erinevat teed glükolüüsi raja reaktsioonide lõpetamiseks. Kirjutage vastavad summaarsed reaktsioonivõrrandid.
Loetlege reaktsioonide tüübid, mis esinevad glükolüüsi rajas. Loetlege glükolüüsi raja vaheühendid.
Tüübid:
fosforüülimised – kinaaside reaktsioonid, isomerisatsioonid,
aldolaasi reaktsioon –C-C sideme katkemine, redoksreaktsioon,
dehüdratatsioon.
Heksokinaas
– ATPst sõltuv glükoosi fosforüülimine glükoos-6-fosfaadiks
(glükolüüsi raja I reakts.)
Glükoos-6-fosfaadi
isomeraas – II reaktsioon. G6P konverteeritakse
fruktoos-6-fosfaadiks.
Fosfofruktokinaas-1
– III reaktsioon. ATP energiat kasutatakse F6P konverteerimisel
fruktoos-1,6-bisfosfaadiks. Katalüüsib fosfofruktokinaas-1.
Aldolaas
– katalüüsib fruktoos-1,6-bisfosfaadi lagunemist kaheks 3C
produktiks, dihüdroksüatsetoonfosfaadiks ja
glütseeraldehüüd-3-fosfaadiks.
Trioosfosfaadi
isomeraas
Glütseeraldehüüd-3-fosfaadi
dehüdrogenaas
Fosfoglütseraadi
kinaas
Fosfoglütseraadi
mutaas ja enolaas
Mutaas:
Enolaas:
Püruvaadi
kinaas – PEP konverteeritakse püruvaadiks ensüümi püruvaadi
kinaasi poolt.
GLÜKOLÜÜSI
ETAPID
Glükolüüsi raja etapid: raja reaktsioonide grupeerimine kaheks või kolmeks staadiumiks.
Kirjeldage glükoosi muundamist fruktoos-1,6-bisfosfaadiks. Nimetage vaheühendid, ensüümid. Nimetage reaktsioonid, kus tarbitakse ATP.
Glükolüüsi
esimene faas – kasutatakse 2 ATPd glükolüüsi konverteerimisel
fruktoos-1,6-bisfosfaadiks. Glükoos + ATP
G6P + ADP + H+
(heksokinaas)
G6P
F6P (glükoos-6-fosfaadi isomeraas)
F6P
+ ATP
Fruktoos-1,6-bisfosfaat. (fosfofruktokinaas-1)
Loetlege reaktsioonid, mille tulemusel toimub fruktoos-1,6-bisfosfaadi (heksoosi derivaadi) konverteerimine glütseeraldehüüd-3-fosfaadiks (trioosi derivaadiks).
F6P
+ ATP
Fruktoos-1,6-bisfosfaat. (fosfofruktokinaas-1)
Fruktoos-1,6-bisfosfaat
dihüdroksüatsetoon fosfaat (DHAP) + glütseeraldehüüd-3-fosfaat
(GAP) (aldolaas)
DHAP
GAP (trioosfosfaadi isomeraas) reaktsioon kulgeb üle enediooli
(vaheühend).
Kirjeldage reaktsioonid, mille tulemusel toimub glütseeraldehüüd-3-fosfaadi konversioon püruvaadiks. Nimetage vaheühendid, ensüümid, kofaktorid. Nimetage reaktsioonid, kus toimub ATP tootmine.
DHAP
GAP (trioosfosfaadi isomeraas) reaktsioon kulgeb üle enediooli
(vaheühend).
GAP
+ NAD+
+ Pi
1,3-bisfosfoglütseraat + NAD3H
(glütseeraldehüüd-3-fosfaadi dehüdrogenaas)
1,3-bisfosfoglütseraat
+ ADP
3-fosfoglütseraat + ATP (fosfoglütseraadi kinaas)
3-fosfoglütseraat
2-fosfoglütseraat
2,3-bisfosfoglütseraat (fosfoglütseraadi mutaas)
2-fosfoglütseraat
fosfoenoolpüruvaat (fosfoglütseraadi enolaas)
Fosfoenoolpüruvaat
(PEP) + ADP
enoolpüruvaat
püruvaat (püruvaadi kinaas)
FRUKTOOS
JA GALAKTOOS
2 rada glütseeraldehüüd-3-fosfaadi saamiseks fruktoosist.
Glükoos-6-fosfaadi teke galaktoosist. UDP- suhkrud .
Galaktoos
galaktoos-1-fosfaat (galaktokinaas)
Galaktoos-1-fosfaat
glükoos-1-fosfaat (galaktoos-1-fosfaadi uridüültransferaas)
Glükoos-1-fosfaat
glükoos-6-fosfaat (fosfoglükomutaas)
Galaktoseemia ja selle biokeemilised põhjused.
Galaktoosi
kinaasi defitsiit. Seda põhjustab ükskõik millise ensüümi
puudujääk neist kolmest. Enamasti peetakse siiski silmas
galaktoos-1-fosfaadi uridüültransferaasi puudujääki.
GLÜKOLÜÜSI
RAJA KONTROLL
Nimetada glükolüüsi rada reguleerivad võtmeensüümid.
Heksokinaas,
glükoos-6-fosfaadi isomeraas, fosfofruktokinaas-1, aldolaas,
troosfosfaadi isomeraas, glütseraadi kinaas, fosfoglütseraadi
mutaas ja enolaas, püruvaadi kinaas.
Kirjeldage fosfofruktokinaasi allosteerilist regulatsiooni.
Fruktoos-2,6-bisfosfaadi roll fosfofruktokinaasi regulatsioonil . Fruktoos-2,6-bisfosfaadi moodustumine ja lagunemine .
Heksokinaasi regulatsioon. Glükokinaasi ja heksokinaasi füsioloogilised funktsioonid inimese organismis.
Heksokinaasid
I, II ja III on allosteeriliselt inhibeeritud produkti G6P
akumuleerumisel, glükokinaas ei ole. See võimaldab akumuleerida
maksal glükoosi varu glükogeenina sel ajal, kui glükoos on liias
ning samas soodustada gükoosi perifeerset tarbimist siis, kui
glükoos on vajalik energiaallikana perifeersetes kudedes.
Püruvaadi kinaasi regulatsioon.
PÜRUVAADI
EDASINE KONVERSIOON
Etanooli, laktaadi ja AcCoA moodustumine.
Alkohoolse fermentatsiooni korral püruvaat dekarboksüleeritakse
atseetaldehüüdiks, mis omakorda redutseeritakse etanooliks.
NADH
moodustub glükolüüsil (eukarüootse raku tsütosoolis).
Anaeroobsetes tingimustes konverteeritakse tagasi NADH NAD+-ks,
see toimub samaaegselt püruvaadi konverteerimisega laktaadiks.
Glükolüüsi
käigus tekib glükoosist kaks 3C molekuli,
glütseeraldehüüd-3-fosfaati. Anaeroobsetes tingimustes
oksüdeeritakse glütseeraldehüüd-3-fosfaat püruvaadiks. Hapniku
puudusel, konverteeritakse püruvaat laktaadiks. Aeroobsetes
tingimustes tekib püruvaadist atsetüülCoA.
NAD+ retsükleerimine alkohoolse fermentatsiooni ja laktaadi tekkereaktsiooni tulemusel.
Koensüümi
NAD+ on rakkudes limiteeritud hulgal. Kuivõrd nii glükolüüsil kui
TCA tsüklis toimub energia esialgne salvestamine NAD+
konverteerimisega NADHks, on see vaja retsükleerida. Vastasel juhul
seiskub glükolüüsi glütseeraldehüüd-3-fosfaadi dehüdrogenaasi
reaktsioon, kus NAD+ tarbitakse. Anaeroobsetes tingimustes
redutseeritakse püruvaat laktaadiks; samaaegselt reoksüdeeritakse
NADH NAD+ks.
GLÜKOLÜÜTILISTE
ENSÜÜMIDE STRUKTUUR JA KATALÜÜSI MEHHANISM
Kirjeldage NAD+ sidumistsentri struktuuri dehüdrogenaaside molekulides.
Heksokinaasi molekuli struktuursed muutused (induced-fit).
Induced
fit seisneb ulatuslikus struktuurses muutuses, mis järgneb
substraadi sidumisele. See on vajalik kuna väheneb keskkonna polaarsus aktiivtsentris.
Olulisemad mehhanismid glükolüütiliste reaktsioonide katalüüsis:
Aldolaas – Schiffi alus
Substraat seondub . FBP karbonüül reageerib Lys aminorühmaga, tekib
imiinimkatioon (Schiffi alus). C3-C4 side katkeb, tekib enamiin ja
vabaneb GAP. Enamiin protoneerub, moodustub imiiniumkatioon.
Imiiniumkatioon hüdrolüüsub, vabaeb DHAP.
2
aldolaaside klassi – klass I loomad, taimed – vaheühendiks
schiffi alus. Klass II aldolaas – seened vetikad . Ei moodusta
schiffi alust.
Glütseeraldehüüd-3-fosfaadi dehüdrogenaas – tioestri moodustumine
GAP
seondub ensüümiga. Nukleofiilne SH atakeerib aldehüüdi, moodustub
tiohemiatsetaal. Tiohemiatsetaal oksüdeeritakse elektronide
ülekandega NAD+ koosseisu, tekib NADH. NADH eraldub ja asendatakse
NAD+ poolt. Tioestrit atakeerib Pi, tekib 1,3 BPG.
Püruvaadi kinaas- keto - enoolne tasakaal
Teise
ATP moodustumine.
GLÜKONEOGENEES
Selgitage mis on glükoneogeneesi raja füsioloogiline tähtsus. Loetlege glükoneogeneesi prekursormolekulid.
Glükoneogenees
– protsess, milles mitmesugused eellasmolekulid ( laktaat , püruvaat,
glütserool, aminohapped) muudetakse glükoosiks. Vajalik nälgimise
korral kui glükoosi tase langeb. Glükoos on ainukeseks energia
allikaks ajule, testistele, erütrotsüütidele ja neeru säsile.
Prekursormolekulid:
Laktaat, glükogeensed aminohapped (mitte ainult leutsiin ja lüsiin),
glütserool, püruvaat.
Loetlege glükolüüsi pöördumatud reaktsioonid ja kirjeldage reaktsioonid, mille abil toimuvad vastavad pöördprotsessid glükonepgeneesi rajas.
Glükolüüsi
pöördumatud reaktsioonid – heksokinaasi, fosfofruktokinaasi ja
püruvaadi kinaasi reaktsioonid.
Ringtee I (püruvaadist fosfoenoolpüruvaadiks) – esimene reaktsioon on
ATPd tarbiv püruvaadi karboksülaasi reaktsioon. Püruvaat
karboksüleeritakse oksaalatsetaadiks. PEP karboksükinaasi
reaktsioonis moodustub fenoolpüruvaat (PEP).( PEP karboksükinaasi
reaktsioon tarbib oksaalatsetaadi dekarboksüleerimiseks ja ühtlasi
fosforüülimiseks GTP hõdrolüüsi energiat.)
Püruvaat
+ ATP + GTP + H2O
PEP +ADP + GDP + Pi + 2H+
Ringtee
II (fruktoos-1,6-bisfosfaadist fruktoos-6-fosfaadini) – lihtne
hüdrolüütiline reaktsioon, mida katalüüsib
fruktoos-1,6-bisfosfataas.
Ringtee
III (glükoos-6-fosfaadist glükoosiks) – G6P konverteeritakse
glükoosiks glükoos-6-fosfataasi poolt katalüüsitud hüdrolüüsi
reaktsioonis. Sarnaneb ringtee II-le.
Nimetage koed /organid, kus toimub glükoneogenees meie organismid. Millistes rakuosades toimuvad individuaalsed glükoneogeneesi reaktsioonid.
Maksas,
neerudes (säsi). Protsess algab mitokondris, põhiprotsess toimub
tsütoplasmas. Mitokondris – oksaalatsetaadi moodustumine, ta
redutseeritakse malaadiks NADH-d kasutades, see on vajalik
mitokondrist välja transportimiseks. Ülejäänud protsessid on kõik
tsütoplasmas.
Kirjeldage detailselt reaktioone, mille abil tekib püruvaadist fosfoenoolpüruvaat: ensüümid, vaheühendid, koensüümid.
Püruvaadi karboksülaas katalüüsib ATP sõltuvat oksaalatsetaadi formeerumist püruvaadist ja CO2-st. (CO2 saadakse vesinikkarbonaadi ( HCO3 ) kujul.)
PEP karboksükinaas konverteerib oksaalatsetaadi PEP-ks kasutades GTP-d.
Iseloomustage biotiini struktuuri, katalüüsitavat protsessi ja püruvaadi karboksülaasi reaktsiooni, mis toimub biotiini osalusel.
Püruvaat oksaalatsetaat – vajab kofaktorina biotiini.
Analüüsige, millise energiakuluga on seotud glükoneogeneesi rada.
Kirjeldage kuidas toimub glükolüüsi ja glükoneogeneesi radade koordineeritud kontroll ning milline on selles regulatsioonis fruktoos-2,6-bisfosfaadi roll.
Fosfofruktokinaas
ja fruktoos-1,6-bisfosfataas reguleeritakse koordineeritult. Selles
protsessis tsitraat inhibeerib fosfofruktokinaasi ja stimuleerib
fruktoos-1,6-bisfosfaati.
Kirjeldage Cori tsükli koosseisu kuuluvaid metaboolseid protsesse ning organite vahelist metaboliitide transporti.
Püruvaat
redutseeritakse lihastes laktaadiks anaeroobse glükolüüsi
tingimustes, seda katalüüsib laktaadi dehüdrogenaas. Lihastes
tekkiv laktaat võidakse suunata vereringesse ja transporditakse
maksa. Maksas toimub laktaadi konversioon glükoosiks. Järgnevalt
transporditakse moodustunud glükoos tagasi lihastesse, kus teda
kasutatakse energiaallikana või glükogeeni varude taastamiseks.
Sellist protsessi nim cori tsükliks.
Oksüdatiivne
fosforüülimine
SISSEJUHATUS
Defineerige oksüdatiivne fosforüülimine ja hingamine .
Oksüdatiivne
fosforüülimine – metaboolne rada, mis võimaldab enamikul
biosfääri organismidel biosünteesida orgaanilistest ainetest
vabanenud energia arvelt ja ortofosforhappest ATP.
Hingamine
– orgaaniliste molekulide oksüdatsioon kasutades elektronide
akseptorina anorgaanilist ühendit.
Kirjeldage mitokondri ehitust (membraanid ja kompartmendid) ning hingamisahela komponentide paiknemist mitokondris.
Mitokondri
sisemembraan – barjäär metaboliitidele. Sisaldab suurel hulgal
valke, mille funktsiooniks on metaboliitide transport.
Välismembraan
– vabalt läbilaskev väikestele molekulidele ja ioonidele.
Sisemembraan
– läbilaskev enamikele väikestele molekulidele ja ioonidele,
kaasaarvatud H+. Sisaldab:
-
respiratoorsed elektronkandjad ( kompleksid I-IV).
-
ADP-ATP translokaas
-
ATP süntaas
-
teised membraansed transporterid
Maatriks – sisaldab: püruvaadi dehüdrogenaasi kompleks, tsitraadi tsükli
ensüüme, rasvhappe beeta-oksüdatsiooni ensüüme, ainohapete
oksüdatsiooni ensüüme, DNA, ribosoomid , ATP, ADP, Pi, Mg2+,
Ca2+,
K+.
HINGAMISAHEL
Nimetage hingamisahela komponendid ja nende töös osalevad elektronide ülekandes osalevad rühmitused.
Komponendid
– tsütokroomc, NADH – Q reduktaas, tsütokroomi oksüdaas,
ubikinoon, tsütokroomi reduktaas.
Kompleks
I
–NADH dehüdrogenaasi kompleks. NADH + H+
+ UQ = NAD+
+ UQH2.
Samal ajal toimub prootonite pumpamine. Kasutab sisemist
kofaktoriteahelat elektronide ülekandeks NADH-lt UQ-le. UQH2
prootonid on pärit maatriksist. NADH oksüdeerumisega liigub 4
prootonit läbi membraani.
Kompleks
II
–Suktsinaadi dehüdrogenaas. Ei toimu prootonite pumpamist.
Suktsinaat + UQ = UQH2.
Kompleks
III
– tsütokroom bc1.
UQH2
+ 2cytc(Fe3+)
UQ + 2H+
+ 2cytc(Fe2+).
Redokstsentriteks on kaks b tüüpi heemi. CytbL
ja cytbH.
Kompeks III baasil toimub Q tsükkel – aluseks on ubikinoonilt
pärit elektronide lahknemine kahte erinevat rada pidi –
aktiivtsentrisse tuleb koensüüm Q, loovutab 1 elektroni Fe
klastrile. Teine elektron liigub cytbL-le,
sealt cytbH-le
ja sealt teisele koensüümile Q mis on oksüdeeritud.
Kompleks
IV
– Tsütokroomi c oksüdaas. 4cytc(Fe2+)
+ 4H+
+ O2
4cytc(Fe3+)
+ 2H2O.
Tema funktsiooniks on hapniku redutserimine tsütokroom c arvel.
Elektronide
pumpamine maatriksist membraanidevahelisse ruumi toimub kompleksides
I,III ja IV. Olulised on ka NADH ja suktsinaat, CoQ – elektronide
kandja, mis vahendab elektrone primaarsete dehüdrogenaaside ja
kompleks III tsütokroomi b vahel. Tsütokroom c.
Kirjeldage kuidas elektronid sisenevad hingamisahelasse NADH-Q reduktaasi kaudu NADH koosseisust ning millised rühmitused osalevad kompleksi I töös.
Kompleks
I – sisaldab vähemalt 42 polüpeptiidi, FMN ja 5-7 Fe-S klastrit.
NADH dehüdrogenaasi kompleks. Toimub elektronide ülekanne NADH-lt
CoQ-le. Iga NADH oksüdeerimisega antakse edasi 2 elektroni ja
pumbatakse välja 4 prootonit. Rotenoon on inhibiitor, ubikinooni
konkurentne, ei võimalda kompleksil I siduda elektronide
ülekandeahela järgmist mobiilset komponenti.
Selgitage millise rolliga on koensüümQ elektronide vahendajana NADH-Q reduktasi ja tsütokroomi reduktaasi vahel.
koensüümQ
= ubikinoon. Vahendab ülekandeahela komplekside vahel elektrone
difundeerudes mitokondri sisemembraanis. Saab loovutada-liita
elektrone kahe või ühekaupa. Ubikinooni oksüdatsiooniga kaasneb
kahe elektroni ülekanne Fe-S tsentrilt tsütokroomi reduktaasile.
Kirjeldage kuidas elektronid sisenevad hingamisahelasse flavoproteiinidest (suktsinaadi dehüdrogenaas, glütserool-fosfaadi dehüdrogenaas, rasvhappe CoA dehüdrogenaas).
Suktsinaadi
dehüdrogenaas – elektronid liiguvad suktsinaadilt ubikinoonile.
Glütserool-fosdaadi
dehüdrogenaas – elektronid liiguvad UQ-le.
Rasvhappe
CoA dehüdrogenaas – loovutavad elektronid samuti UQle.
Kirjeldage tsütokroomi struktuuri ja omadusi. Tsütokroomid b, c1, a ja a3.
Tsütokroom
b ja c1 – heemi sisaldavad valgud . Kompleks III elektronide
ülekandjad. C1 paikneb membraani tsütosoolsel küljel. b –
koosneb umbes 400 aminohappest.
Tsütokroom
a ja a3 – heemid. kompleks IV. Cu tsentrilt liiguvad elektronid
heemile a ja siis heemile a3. Heem a3 ja CuB
moodustavad binukleaarse tsentri.
A
ja b tsütokroomid – integraalsed membraanivalgud. C tsütokroom –
integraalne või perifeerne .
Kirjeldage tsütokroomi reduktaasi kompleksi struktuuri. Selgitage kuidas elektronid kantakse üle ubikinoolilt tsütokroomidele c1 ja b (b-566 ja b-562) ning lõpuks tsütokroomile c.
Esiteks
difundeerub täielikult redutseeritud ubikinoon membraani
tsütosoolsele poolele, kus ta seondub oksüdatsioonitsentrisse.
Ubikinooni 2 elektroni lahutatakse siin. Esimene elektron liigub
Rieske valgu Fe-S tsentrisse, teine liigub ühele b heemidest, nn BL
heemile – tsütokroom b-566. Nii Rieske valk kui ka BL tsütokroom
on võimelised aksepteerima vaid 1 elektroni korraga, kuid bc1
kompleksis sunnitakse ubikinoon liivutama korraga kahte elektroni.
Seetõttu peavadki need elektronid valima erineva raja.
Fe-S
valgule loovutatud elektron liigub edasi tsütokroom c1-le ja sealt
tsütokroom c-le. Seda elektroni kasutatakse kompleksis IV ehk
tsütokroomi oksüdaasi poolt hapniku redutseerimiseks. Teine nn
mitteproduktiivne elektron liigub BP heemilt BH heemile tsütokroom
b-562. Edasi antakse see elektron täielikult oksüdeeritud
ubikinoonile, mis on seotud N tsentrisse membraani maatriksi poolel.
Selgitage kuidas kahe-elektronilise ülekande vahendaja ubikinool interakteerub ühe-elektroni kandja Fe-S klastriga.
Vt
8.
Kirjeldage tsütokroomi oksüdaasi struktuuri.
170kDa
dimeer, 13 plüpeptiidi.
Kirjeldage kuidas toimub tsütokroomi oksüdaasi kompleksis hapniku redutseerimine veeks . Kirjeldage elektronide ülekannet a-CuA klastrilt klastrile a3-CuB ning pöörake tähelepanu Fe ja O oksüdatsiooniastmetele.
Kirjeldage tsütokroom c struktuuri ja interaktsioone tsütokroomi reduktaasi ning tsütokroomi oksüdaasiga.
Sekundaarstruktuuris
on alfa heeliksi ja beeta lehe struktuure minimaalselt. Sisaldab
heemi, kus Fe on seotud histidiini ja metioniini jääkidega. Valk on
vees lahustuv.
OKSÜDEERIMISE
JA FOSFORÜÜLIMISE SEOS
Kirjeldage oksüdatiivse fosforüülimise kemoosmootset mudelit ning seda toetavaid eksperimentaalseid andmeid.
Oksüdatiivne
fosforüülimine on ebaharilik protsess selle poolest et ta sõltub
mitokondri sisemembraani terviklikusest. Selle protsessi põhimõte
seletati nn kemoosmootse hüpoteesiga mis pakuti välja Peter
Mitchelli poolt. Ta ennustas et mitokondri sisemembraan on
prootonitele praktiliselt läbimatu ja prootonite voogu tagasi
mitokondrisse kasutatakse ATP süntaasi poolt selleks, et ADPd
fosforüülida. Eksperiment – rekonstrueeriti fosfolipiidsed
vesiiklid nii, et membraanis paiknes bakteriorodopsiin ja F0F1 ATPaas . Bakteriorodopsiin on valguse energiat kasutab prootonite pimp . F0F1 ATPaas oli mitokondriaalse päritoluga. Mõlemad
paigutati membraani orienteeritult. Valguse toimel hakkas
bakteriorodopsiin pumpama prootoneid vesiiklitesse ning selle
gradiendi arvel oli ATP süntaas võimeline sünteesima ATPd. See
eksperiment demonstreeris et ATP sünteesiks ei ole vaja
spetsiifilist kõrfe energiaga vaheühendit ega interaktsioone
elektronide ülekandeahela kompleksidega. Vaja oli lihtsalt
prootongradienti.
Seos erinevatel kompleksidel prootongradiendi moodustumise ning ATP saagise vahel. P:O suhe, spetsiifiliste inhibiitorite efekt, redoksreaktsioonide ΔGo’ hinnangud ja ATP saagis.
Hingamisahela töö tulemusel translokeeritavate prootonite päritolu hingamisahelas.
ATP süntaasi paiknemine rakus, struktuur ja funktsioonid.
Paikneb
mitokondri sisemembraanis. L konformatsioon : ADP ja Pi seonduvad. T:
ADP + Pi
ATP. O: ATP vabaneb. Kõikides konformatsioonides kasutatakse H+
gradiendi energiat konformatsiooni muutmiseks.
F1
– alfa3 beeta3 teisi1
Fo
– ab2c9-12
Alfa,beeta
subühikud moodustavad 6 osalise sfääri. Igal ab dimeeril on üks
aktiivsait, enamik substraadi kontakte on beeta subühikuga.
ATP sünteesi mehhanism, katalüüsi kooperatiivsus konformatsioonilised muutused katalüütilises tsüklis.
ATP
sünteesitsükkel läbib järgmised olekud:
L: (loose) seob ADP ja Pi nõrgalt. ADP ja Pi seonduvad -> (H+ grad .energia kasutatakse konformats.muutmiseks)
T: (tight) seob ADP ja Pi või ATP tugevalt. ADP + Pi-> ATP ->(H+grad.energia kasutatakse konformats.muutmiseks)
O: (open) ei seo nukleotiide . ATP vabaneb ->(H+grad.energia kasutatakse konformats.muutmiseks)
Tsükkel algab uuesti
MITOKONDRIAALSED
TRANSPORTSÜSTEEMID
Glütseroolfosfaadi ja malaadi-aspartaadi süstikud, nende töötamise mehhanism ja tähtsus tsütoplasmaatilise NADH oksüdatsioonil.
Glütserool-3-fosfaadi
süstik –baseerub
tsütosoolsel ja membraaniseoselisel glütserool-3-fosfaadi
dehüdrogenaasil, annab elektronid hingamisahelasse ubikinooni
tasemel st osa NADH pot energiast läheb kaotsi. Ei ole tasakaaluline
G
aminohapete biosüntees, asendatavad ja hädavajalikud aminohapped, THF, SAM, B12 vitamiin, aminohapete katabolism ja uurea süntees, Schiffi alus, püridoksaalfosfaat, uurea tsükkel, glükogeensed ja ketogeensed aminohapped, NAD, CoA, biotiin, FAD, TPP, Fotosüntees, fotosünteetiline elektronide ülekandeahel, Calvini tsükkel, tioredoksiin, glükogeen, UDP-glükoos, glükogeeni sünteesi ja lagundamise regulatsioon, cAMP, glükolüüs, fruktoos ja galaktoos, glükolüüsi raja kontroll, püruvaadi edasine konversioon, glükolüütiliste ensüümide struktuur ja katalüüsi mehhanism, glükoneogenees, oksüdatiivne fosforüülimine, hingamisahel, oksüdeerimise ja fosforüülimise seos, mitokondriaalsed transportsüsteemid, metabolismi integratsioon, nukleotiidide biosüntees, rasvhapete lagundamine ja süntees, ketokehad, tsitraaditsükkel,
Sarnased õppematerjalid
5
doc
BIOKEEMIA KORDAMISKÜSIMUSED JA VASTUSED
BIOKEEMIA KORDAMISKÜSIMUSED JA VASTUSED
1. Ühe glükoosi molekuli täielik aeroobne lõhustumine tagab kuni 38 ATP molekuli sünteesi. Kirjeldage, millistest
radades ja mil viisil sünteesitakse glükoosi täilikul lõhustumisel ATP-d.
Glükolüüsi energia saagis: Ühe glükoosi molekuli kaheks püruvaadi molekuliks konverteerumise käigus sünteesitakse kaks
ATP molekuli ning tekib kaks NADH molekuli. NADH molekulid transporditakse mitokondritesse, kus nad annavad oma
elektronid hingamisahelasse, millega kaasneb ATP süntees oksüdatiivse fosforüleerimise teel. Kuna nii glükoos-6-fosfaadi
sünteesimine glükoosist kui ka fruktoos-1,6-bisfosfaadi teke fruktoos-6-fosfaadist vajavad mõlemad reaktsioonid 1 ATP
molekuli, siis glükoosi lagundamine algab hoopiski energia kulutamisega. Energiat annavad glükoloosis kahe 1,3-
bisfosfoglütseraadi molekuli muutumine kaheks makroergilist sidet omavaks 3-fosfoglütseraadi molekuliks (2 ATP-d) ja kahe
fosfo
10
pdf
Glükolüüs
Glükolüüs
Süsivesikud toidus
Toidus olevatest süsivesikutest on olulisemad:
- monosahhariidid glükoos ja fruktoos
-disahhariidid sahharoos ja maltoos
-polümeersed tärklis (amüloos ja amülopektiin) ja glükogeen
-tselluloos kuulub paljude toiduainete koosseisu, kuid ei ole seeditav.
Süsivesikute metabolismi esimene etapp on seeditavate polümeeride
lagundamine lihtsamateks, hästilahustuvateks ja soolestikus organismi
imenduvateks molekulideks. Süsivesikute lagundamine algab suus. Nõrgalt
happeline sülg (pH6.8) sisaldab amülaasi. Amülaas on esmane süsivesikuid
hüdrolüüsiv ensüüm. Süljes sisalduva amülaasi toime piirdub toidumassiga,
mis paikneb suus ja söögitorus, sest mao tugevalt happeline keskkond
inaktiveerib selle ensüümi praktiliselt täielikult. Mao happeline keskkond aitab
kaasa toidumassi seedimisele denatureerides makromolekulide struktuuri.
Spetsiifilised mao proteaasid ja lipaasid
15
doc
Biokeemia - ensüümid, hormoonid, ainevahetusrajad ning süsivesikute ja rasvhapete oksüdatsioon
Ensüümid
.. on bioloogilised katalüsaatorid, mille peamiseks ülesandeks elusorganismis
on keemiliste reaktsioonide kiirendamine.
.. on valgud
..ei saa käivitada termodünaamiliselt võimatut protsessi
.. ei mõjuta reaktsiooni kulgemise suunda
Ometi ensüümid kontrollivad ainevahetusprotsesside üldist suunda, sest nende
aktiivsus sõltub organismi vajadusest ja ühed reaktsioonid ei kesta kogu aeg vaid
muutuvad.
Ensüümide katalüüsivõime aluseks on nende omadus alandada reaktsioonide
aktivatsioonienergiat. Aktivatsioonienergia on energia, mis on vajalik
reageerivate ainete ergastamiseks.
Ensüümidele on iseloomulik spetsiifilisus:
Stereokeemiline spetsiifilisus (eristatakse D- ja L-isomeere)
Sidemespetsiifilisus (ensüümid võivad katalüüsida ainult teatud sidemete
tekkimist ja lagunemist nt a1,4 glükosiidside)
Rühmaspetsiifilisus (kindla funktsionaalse rühmaga toimuvad reaktsioonid)
Absoluutne spetsiifilisus (eelnimet
73
pdf
BIOKEEMIA harjutustunni küsimuste vastused II KT-ks
4. HARJUTUSTUND
SÜSIVESIKUD
Mono-, oligo- ja polüsahhariidid
1. Andke definitsioon järgmistele mõistetele:
a) süsivesinik (keemia alusel) - Biomolekul, mis koosneb vaid vesinikust, süsinikust ja
hapnikust. Süsivesikuteks loetakse polühüdroksüaldehüüde ja -ketoone või aineid, mis annavad
hüdrolüüsi käigus vastavaid ühendeid. Nimetus tuleb empiirilisest valemist (CH2O)n
b) Oligosahhariid - liitsuhkrud, mis koosnevad 2-10 glükosiidsidemega seotud
monosahhariidi jäägist. Jaotatakse redutseeruvateks - vaba hemiatsetaalrühm on olemas; ja
mitteredutseeruvateks - puudub vaba hemiatsetaalrühm.
c) Polüsahhariid - liitsuhkrud. Lihtsuhkrute polümeerid, mis koosnevad sadadest kuni
tuhandetest kovalentselt glükosiidsidemega seotud monosahhariidi jääkidest. Jaotatakse
kaheks: homopolüsahhariidid - koosnevad ühe monosahhariidi jääkidest; heteropolüsahhariidid
- koosneva
9
docx
Biokeemia MLK6008 eksami küsimused
Biokeemia MLK6008 eksami küsimused
1/2 Ühe glükoosi molekuli täielik aeroobne lõhustumine tagab kuni 38 ATP molekuli
sünteesi. Kirjeldage, millistes metaboolsetes radades ja mil viisil sünteesitakse
glükoosi täielikul lõhustumisel ATP-d. Kirjeldage nii üksiskasjalikult kui suudate
glükolüüsi.
Glükoosi esmane õhustumine., mille käigus saadakse glükoosisolev energia salvestada
sobivasse vormi( ATP, NADH)
*Osaline lõhustumine toimub anaeroobselt. Tekib laktaat( piimhape), intensiivselt töötavates
ihastes, toimub tsütoplasmas. Kui on aga hapnik olemas tekib kohe püruvaat mis läheb
tsitraadi tsüklisse.
*Lõplik lõhustumine toimub hapniku juuresolekul. Toimub mitokondrites tsitraaditsükli
vahendusel. Tekib Co2 ja H2O. See ei ole spetsiifiline ainult glükoosile.
1 glükoosi molekulist saab 2 püruvaadi molekuli. Hapniku juures olekul saab sellest CO2 ja
H2O. Hapniku puudumisel laktaat. Laktaadist lahti saamiseks on vaja see transportida maksa,
kus tehakse sellest
5
docx
Süsivesikute metabolism
Süsivesikute metabolism
Põhiküsimused
Süsivesikute metabolismi meditsiiniline tähtsus
· 50-60% inimkeha toiduenergia vajadusest
· Veresuhkru taseme tagamine
· Monosahhariidsete eelühendite teke (riboos-5-P ja aminosahhariidide süntees)
Glükoosi tähtsus
· Vesilahustuv
· Stabiilne struktuur ( keemiliselt inertne, ensüümse muundumise kontroll)
· Organismi energia põhiallikas (ajukoe, erütrotsüütide, neerupealiste, reetina, testiste ainus
kütus)
Glükoosi difundeerumine
1) Na-sõltuv ko-transport
2) Kergendatud difusioon valktransporterite (GLUT) kaudu.
Glükoosi aktiveerimine
Keemiliselt inertse Glc fosforüülimine Glc-6-P-iks
Glükoosi põhimetaboolsed rajad
Anaeroobse glükolüüsi põhiskeem ( Glc+2 ADP+2 Pi -> 2 laktaat+ 2 ATP+ 2H++ 2 H2O)
Anaeroobse glükolüüsi protsess
I osa (võtmeensüüm allosteeriline fosfofruktoosi kinaas-1)
Glc-i aktiveerimine Glc-6-P-iks (Mg2+- heksoosi kinaa
7
doc
Glükolüüs
GLÜKOLÜÜS
1. Mõisted.
Glükolüüs on ensümaatiliste reaktsioonide ahel, mille käigus glükoos muudetakse püruvaadiks.
a) Lähtesubstraat/substraadid - glükoos. Toidust saadavad süsivesinikud:
- Tärklis ja glükogeen: hüdrolüüsitakse glükoosiks amüloosi abil suus.
- Disahhariidid (maltoos, sahharoos, laktoos): hüdrolüüsitakse monosahhariidideks.
Maltoos + H2O 2 glükoos (maltaas)
Sahharoos + H2O glükoos + fruktoos (sahharaas invertaas)
Laktoos + H2O galaktoos + glükoos (laktaas)
b) Reaktsioonide toimumise koht rakus punased verelibled, rasvkoes, närvikoes, lihaskoes,
maks. Toimub raku tsütoplasmas.
c) Protsessi aeroobsus/anaeroobsus hapnikut tarbiv / mitte tarbiv. Anaeroobsetes rakkudes on
glükolüüs ainus ATPd tootev rada. Aeroobsetes rakkudes esimene etapp süsivesikute
oksüdatsioonil.
Anareoobse glükolüüs
12
pdf
Biokeemia II testiks
BIOKEEMIA II TESTIKS | Mihkel Heinmaa YAGB22 | TTÜ kevad 2010
XI SÜSIVESIKUD
1. Süsivesikuteks nim biomolekule, mis koosnevad vaid süsinikust, vesinikust ja hapnikust. Süsivesikuteks loetakse
polühüdroksüaldehüüde ja ketoone või aineid, mis annavad hüdrolüüsi käigus vastavaid ühendeid. Nimetus tuleb
empiirilisest valemist Cn(H2O)n
Süsivesikute bioloogiline roll. Väga mitmekesine ja looduses laialt levinud orgaaniliste molekulide klass; päikese energia
salvestatakse fotosünteetiliste organismide poolt süsivesikutesse; paljude biomolekulide eelühendid; struktuuriline roll;
molekulaarsed ja rakk-rakk äratundmismehhanismid.
Süsivesikute multifunktsionaalsus põhineb struktuuri iseärasustel: asümmeetriliste tsentrite olemasolu; esinemine nii
lineaarses kui tsüklilises vormis; võime moodustada polümeere glük
Meedia
Kommentaarid (0)
Kõik kommentaarid