Biokeemia praktikum 1.1-1.2: Ainete tuvastamine kvalitatiivsete reaktsioonidega (0)
Kevad - Vesised teed, sulav lumi, tärkavad lumikellukesed - teebki kevadest kevade
Tallinna Tehnikaülikool
Ainete
tuvastamine kvalitatiivsete reaktsioonidega
Valkude reaktsioonid
Süsivesikute reaktsioonid
Liina Reimann
134537KATB
Ainete tuvastamine kvalitatiivsete reaktsioonidega
Kvalitatiivsed
reaktsioonid võimaldavad kindlaks teha mingi keemilisi elemendi,
funktsionaalse rühma, ühendi või teatud omadustega ainete grupi
olemasolu või puudumist uuritavas keskkonnas. Katse jooksul saab reaktsioon kas toimuda või mitte, hinnatakse iseloomuliku
värvusreaktsiooni teket, sademe moodustumist, gaasi eraldumist või
muid üheseid silmaga nähtavaid muudatusi.
Valkude reaktsioonid
Valgud on polüpeptiidid, milles “ehituskivideks” olevad aminohapped on
omavahel seotud amiidsidemete abil. Valgud, nagu teisedki biopolümeerid , täidavad oma funktsioone tänu iseloomulikele
ruumilistele struktuuridele, mis tulenevad primaarsest struktuurist,
st aminohapete valikust ja järjekorrast. Valkude kindlakstegemiseks
lahustes või bioloogilistes vedelikes ja nende aminohappelise
koostise iseloomustamiseks kasutatakse mitmesuguseid
värvusreaktsioone.
Valgu
unikaalse ruumilise struktuuri lagunemist nimetatakse
denaturatsiooniks. Selle käigus grupeeruvad ümber või katkevad
nõrgad sidemed, kuid peptiidsidemed. Valgu denatureerumine võib
vähendada tema lahustuvust, mis omakorda põhjustab valgu
väljasadenemise lahusest. Valgu peptiidsidemete lagunemist
nimetatakse valgu hüdrolüüsiks.
Biureedireaktsioon
on valkude üldreaktsioon, kuna ta on tingitud peptiidsidemete
esinemisest. Reaktsioon toimub, kui ühend sisaldab kaht või enamat peptiitsidet. Leeliselises keskkonnas moodustavad Cu2+- ioonid sinakasvioletse, valgu hüdrolüüsi produktidega roosa värvusega
biureetkompleksi. Kompleksi värvuse annab Cu2+-ioonide
seostumine nelja peptiidsidemete koostisse kuuluva lämmastiku
aatomiga. Kompleksi värvuse intensiivsus sõltub valgu
kontsentratsioonist ja vase ioonide hulgast lahuses.
Töö
käik: Katseklaasi valame 1 ml
munavalgu lahust. Lisame 1 ml 10%-list NaOH lahust ja mõni tilk
1%-list CuSO4 lahust, loksutatakse hoolikalt.
Tulemus:
CuSO4 läks
lahuse värvus sinakasvioletseks,
Järeldus:
Munavalgu lahuses esinesid
peptiidsidemed. Valmistatud lahus sisaldas vähemalt kahte
peptiidsidet.
Ksantoprotelinreaktsioon (Mulderi reaktsioon)
Reaktsioon
näitab aromaatset tuuma sisaldavate aminohapete (Tyr, Phe, Trp) esinemist valgus. Konsentreeritud lämmastikhappe mõjul valk
dentaureerub pöördumatult ja sadestub. Soojendamisel toimub
aromaatsete tuumade nitreerumine, tekkinud ühend on kollaka
värvusega, mis leelises keskkonnas omandab oranži värvuse.
Töö
käik: Katseklaasi valame 1 ml
munavalgu lahust ja lisame 5-6 tilka kontsentreeritud HNO3 .
Reaktsioonisegu loksutame ja soojendame kuni tekkinud valge sade
värvub kollaseks. Seejärel segu jahutatakse, lisame NH4OH lahust ja loksutame hoolikalt.
Tulemus: HNO3
lisamisel tekib valge sade, soojendamisel muutub segu kollaseks ehk
toimub tuumade nitreerumine. Moodustunud ühend käitub hape /alus
indikaatorina, seega NH4OH
lisamisel, mis tekitab leelise keskkonna, omandab segu intensiivsema
värvuse, lõpuks muutub see oranžiks
Järeldus:
Munavalgu lahuses olid aromaatsete tuumadega aminohapped.
Millioni reaktsioon
Reaktsiooni
läbiviimiseks kasutatakse Milloni reaktiivi, mis kujutab endast elavhõbe (II)nitraadi lahust lämmastikhappes vähese NaNO2
lisandiga Reaktsioonidega saab kindlaks
teha fenoolset hüdroksüülrühma sisaldavate aminohapete
sisaldumist, seega valkude puhul türosiini (Tyr) radikaalid.
Positiivse Millioni reaktsiooni annab enamik valke, denatureerunud
valgu sade värvub roosakaks.
Töö
käik: Võtame kaks katseklaasi, ühte
neist valatakse 1 ml munavalgu lahust, teise 1 ml želatiini lahust.
Mõlemasse katseklaasi lisame 5–6 tilka
Milloni reaktiivi. Reaktsioonisegu
soojendame
40–50°C-ni.
Tulemus:
Lisades munavalgu lahusele Milloni reaktiivi esialgu tekib valge sade
ning pärast soojendamist muutub valgu sade roosakaks. Tehes sama
želatiiniga, ei muutu reaktiivi lisamisel ega soojendamisel midagi.
Järeldus:
Munavalgu lahuse koostises esineb türosiini, želatiini lahus ei
sisalda aromaatset tuuma omavat aminohapet türosiini.
Sülfhüdrüüli- e tioolireaktsioon
Positiivne
sulfhüdrüülreaktsioon näitab tsüsteiini (Cys) esinemist valgus.
Leelise hüdrolüüsiga annab tsüsteiini radikaalis sisalduv
tioolrühm (-SH) sulfiidioone, mis Pb2+
ioonidega moodustavad musta või tumepruuni PbS sademe.
Na2S
+ Na2PbO2
+ 2H2O
= PbS + 4NaOH
Töö
käik: 2 ml
Pb(CH3COO)2
0,5 %-lisele lahusele lisame ettevaatlikult tilgakaupa 10 %-list NaOH lahust kuni tekkiv Pb(OH)2
sade kaob ja lahuses moodustub naatriumplumbaat Na2PbO2.
Seejärel
lisame katseklaasi 1 ml munavalgu lahust, loksutame ja soojendame
mõne minuti, kuni algab pruunikasmusta sademe moodustumine. Seejärel
asetatakse katseklaas statiivi, kus sademe formeerumine jätkub.
Tulemus:
Segu kuumutamisel hakkas tekkima tumepruunikas sade, sademe tekkimine jätkus edasi, kui sade seisis ,
muutus seistes tumedamaks. Lõpuks oli mustjaspruun.
Järeldus:
Munavalgu lahuses esineb tioolrühma sisaldav tsüsteiin.
Valkude sadestamine trikloroäädikhappega
Trikloroäädikape
( TKÄ ) ehk trikloroetaanhape denatureerib ja sadestab valke lahusest
välja, mille molekulmass on üle 10 000. Kasutatakse valkude
eraldamiseks madalamolekulaatsetest lämmastikuühenditest.
Töö
käik: 1 ml munavalgu lahusele lisati
mõni tilk CCl3COOH
lahust, loksutatakse.
Tulemus: Moodustus valge sade .
Järeldus:
Toimus valgu väljasadenemine munavalgu lahusest TKÄ abil, seega
valgu molekulmass on üle 10000
Valkude väljasoolastamine (globuliinide ja albumiinide eraldamine)
Neutraalsete
soolade kõrged konsentratsioonid põhjustavad valkude pöörduvat
denaturatsiooni, millega kaasneb väljasadestamine lahusest – seda
nimetatakse väljasoolastamiseks. Globuiinid sadestuvad välja
(NH4) 2SO4 poolküllastunud lahuses, albumiinid aga soola küllastunud lahuses.
Töö
käik: 2 ml munavalgu lahusele lisati
sama palju (NH4)2SO4
küllastunud lahust ning jäeti see
5 min seisma. Tekkinud sade eraldati filtrimisega . Filtraadile lisati
vähehaaval kristalset (NH4)2SO4, kuni soola kristallid enam ei
lahustunud.
Tulemus:
(NH4)2SO4
küllastunud lahuse lisamisel tekkis
nõrk hägu . Kristalse (NH4)2SO4
lisamisel filtraadile tekkinud
albumiinide sade oli intensiivsem
Järeldus:
Tekkinud sademehulkade põhjal saab öelda, et albumiinide sisaldus
küllastunud lahuses oli suurem.
Kõrgel
tempetatuuril toimub kõigi valkude pöördumatu denaturatsioon ,
millega kaasneb enamasti ka valgu väljasadestumine. See ei pruugi
aga toimuda, kui keskkonna pH erineb palju valgu isoelektrilise täpi
väärtusest. Valgu pI on keskkonna pH väärtus, mille juures valgu
molekulis on positiivsete ja negatiivsete laengute hulk võrdne,
molekuli summaarne laeng võrdub seega nulliga, millest tingituna valgumolekulid sadestuvad kergesti lahusest välja. Kui keskkonna pH
erineb väga palju pI väärtusest, omandavad kõik molekulid
ühesuguse laengu („+“ või „-„ laeng), mistõttu
väljasadestumist ei toimu.
Töö
käik: Kahte katseklaasi valame
kummassegi 2 ml munavalgu lahust. Ühte katseklaasi lisame 1 ml
kontsentreeritud etaan- e äädikhapet. Mõlemaid katseklaase
kuumutame keeval vesivannil.
Tulemus:
Katseklaasis, kuhu oli lisatud äädikhapet valgu väljasadestumist
ei toimunud, teises katseklaasis tekkis
sade.
Järeldus:
Happe lisamine ühte katseklaasi põhjustas pH muutuse, mis erines
valgu isoelektrilisest täpist, mistõttu väljasadestumist ei
toimunud.
Valkude sadestamine orgaaniliste lahustitega
Orgaaniliste
lahustite ( etanool , atsetoon jt) mõjul toimub valgu dehüdratiseerimine ning väljasadestumine. Sadesti ettevaatlikul
lisamisel toimuv denaturatsioon on pöörduv ning sade lahustub vee
lisamisel uuesti. Suuremas koguses lahusti lisamisel toimub
pöördumatu denaturatsioon ning sade vee lisamisel ei lahustu.
Töö
käik: Katseklaasi valame 2 ml
munavalgu lahust. Tilga kaupa ja segu pidevalt loksutades lisame
orgaanilist solventi kuni sademe tekkimiseni. Seejärel lahjendame
katseklaasi sisu veega ja jälgime, kas tekkinud sade lahustub või
mitte.
Tulemus:
Lisades munavalgu lahusele atsetooni, tekib sade. Seejärel
lahjendame veega, sade ei lahustu.
Järeldus:
Valguga toimus pöördumatu
denaturatsioon.
1.2 Süsivesikute reaktsioonid
Süsivesikud on ulatuslik ühendite rühm, kuhu kuuluvad suhkrud , aga ka tärklis, tselluloos ning mitmed teised polüoosid .
Vastavalt
struktuurile jaotatakse süsivesikud mono -, oligo- ja
polüsahhariidideks.
Paljud
süsivesikutekvalitatiivseks määramiseks kasutatavad reaktsioonid
baseeruvad nende redutseerimisvõimel. Reaktsioonitingimustest
sõltuvalt tekivad erinevad suhkrute oksüdatsiooniproduktid.
Enamus
süsivesikute kvalitatiivseks määramiseks kasutatavaid reaktsioone
baseerub karbonüülrühma esinemisele molekulis.
Reaktsioonitingimustest sõltuvalt oksüdeeruvad suhkrud seejuures
erinevateks produktideks. Leeliselises keskkonnas redutseerivad suhkrud metallide ioone (Ag+,
Cu2+,
Fe3+)
ning teisi oksüdeerijaid. Neutraalses või happelises keskkonnas
toimub suhkrute oksüdatsioon ilma molekuli destruktsioonita ja
produktideks on mitmesugused happed.
Teine
osa analüüsi meetoditest põhineb heterotsükliliste aldehüüdide
furfuraali (pentoosidest) või 5-hüdroksümetüülfurfuraali
(heksoosidest) moodustumisele süsivesikute kuumutamisel tugeva
mineraalhappe juuresolekul. Mõlemad aldehüüdid moodustavad
kondenseerumisel fenoolidega (α-naftool,
resortsinool jt) värvilisi ühendeid.
Molisch’i test
Molisch’i
testiga saab määrata nii mono -, oligo- kui polüsahhariidide esinemist. Väävelhappetoimel suhkrud dehüdreeruvad ning
moodustavad kas furfuraale või 5-hüdroksümetüülfurfuraale.
Uuritava lahuse ning happe piirile tekib purpurne kiht, kui produktid reageerivad α-naftooliga.
Töö
käik: Võtame kaks katseklaasi ja
valame neisse 2 ml erinevate süsivesikute lahust Võrdlemiseks kasutasin glükoosi ja fruktoosi lahuseid. Mõlemasse katseklaasi
lisame 5–6 tilka Molisch'i reaktiivi. Katseklaaside sisu
loksutatakse. Lisame tilkhaaval 1 ml kontsentreeritud väävelhapet.
Tulemus:
Fruktoosilahuse ja happe piirpinnale tekkis lillakas kiht ning
glükoosilahuse ja happe piirpinnale õrnalt samuti lillakas kiht.
Järeldus:
Reaktsiooniga tõestati sahhariidide olemasolu uuritavates lahustes.
Osasoonide saamine
Osasoonidon
süsivesikute derivaadid , need tekivad redutseeruva suhkru
reageerimisel fenüülhüdrasiiniga. Osasoonid kristalluvad lahusest
välja, tekkinud kristallide kuju järgi on võimalik eristada
lähtesuhkruid.
Töö
käik: Kahte katseklaasi valame 2 ml
erineva taandava suhkru lahust. Võtsin võrdlemiseks laktoosi ja
maltoosi lahused . Mõlemasse lisame ~0,1 g tahket fenüülhüdrasiini
ja ~0,2 g kristallilist naatriumatsetaati ning loksutame.
Reaktsioonisegu hoitame 40 minutit keevas veevannis, aegajalt loksutades ja jahutatakse jäävannis. Moodustunud osasoonide
kristallide kuju tehakse kindlaks mikroskoobis.
Järeldus:
Nii Laktoosi kui ka maltoosi
ossasoonide kristallide kuju sarnaesid piltidel olevatele näidetele.
Maltoosi puhul tekkis erinevus sellega, et kristallid olid rohkem
omavahel reas.
Taandavate suhkrute molekulides sisalduv aldehüüdrühm taandab mitmete
metallide soolasid. Ammoniakaalsest AgNo3 lahusest sadestub metalliline hõbe taandavate suhkrute toimel välja
ning katseklaasi seinale moodustub peegel.
Töö
käik: Katseklaasi valatame 1ml 1%-list
AgNO3
lahust, lisatame 0,5 ml kontsentreeritud NH4OH
lahust ja loksutatakse. Seejärel lisame 1 ml glükoosi lahust, segu
loksutatakse ja soojendame veevannis.
Tulemus:
Esimese korraga tekkis tumehall sade ja väga vähe peeglit, seega
kordasin katset uuesti. Teise katse korral sadestus reaktsiooni
käigus taandunud hõbe katseklaasi seintele peeglina, mis näitab,
et meil on tegemis taandava suhkruga .
Järeldus: Glükoosis sisalduv aldehüüdrühm oksüdeerus selle käigus
metalligaAgNO3
lahusega. AgNO3
ja
NH3
baasil
tekib [Ag(NH3)2]+
(diammiinhõbe)
Sahharoosi hüdrolüüsi kontroll Fehlingi lahustega
Fehlingi
reaktiiviga saab määrata taandavate suhkrute olemasolu.
Reaktsioonil vaba aldehüüd- või ketorühma toimel
vask(II)tartaatkompleksi koostises olev vask taandub ning tekib
punane Cu2O sade. Sahharoos ise Fehlingi reaktiiviga ei reageeri ( pole taandav suhkur), aga reageerivad sahharoosi hüdrolüüsiproduktid glükoos ja fruktoos .
Töö
käik: Kahte katseklaasi valati 1 ml
sahharoosi lahust, ühte lisati veel 1 tilk konts HCl. Sahharoosi
hüdrolüüsi läbiviimiseks kuumutati mõlemat lahust 5 min jooksul
veevannil. Mõlemasse katseklaasi lisati 1 ml Fehling I (CuSO4
vesilahus) ja Fehling II( leeliseline K,Na-tartraadi e Seignetti soola vesilahus) lahust. Seejärel
kuumutati uuesti mõlemat katseklaasi.
Tulemus:
Fehlingi lahuste lisamisel muutus mõlemas katseklaasis lahus siniseks . Teistkordsel veevannis kuumutamisel tekkis katseklaasis,
kuhu oli lisatud HCl, punane sade.
Järeldus:
Happe lisamine kiirendas sahharoosi hüdrolüüsi, mistõttu andis
selles katseklaasis Fehlingi reaktiiv positiivse reaktsiooni
taandavate suhkrute suhtes.
Barfoed’ reaktsioon
Barfoed’i
reaktiiviga (vask(II) atsetaadi lahus äädikhappes) saab eristada
taandavaid monosahhariide oligosahhariididest, kuna nõrgalt
happelises keskkonnas taandavad vaske ainult monosahhariidid .
Töö
käik: Ühte katseklaasi valati 1 ml
fruktoosi, teise 1 ml maltoosi lahust. Lisati 3 ml Barfoed’i
reaktiivi ning kuumutati veevannil ~5 min.
Tulemus:
Pärast mõneminutilist kuumutamist tekkis fruktoosilahust sisaldavas
katseklaasis punakas-pruunikas sade.
Järeldus:
Fruktoos kui monosahhariid taandas vaske, tekkis punakas-pruun Cu2O
sade. Maltoos on oligosahhariid, seega vaske neis katsetingimustes ei
taandanud.
1.2.6 Selivanoff’i
reaktsioon
Suhkrute
kuumutamisel tugevate mineraalhapete juuresolekul moodustub
pentoosidest furfuraal ja heksoosidest 5-hüdroksümetüülfurfuraal
. Mitmealuseliste fenoolidega reageerides moodustuvad nendest värvilised produktid. Selivanoff’i reaktiiv koosneb soolhappest,
benseen-1,3-dioolist ja FeCl3-st.
Reaktsioon toimub ketoosidega kiiremini kui
aldoosidega.
Töö
käik: Ühte katseklaasi valati 1 ml fruktoosi, teise 1 ml glükoosi
lahust. Lisati 2 ml Selivanoff’i reaktiivi ning soojendati ~5
minutit keeval veevannil.
Tulemus:
Fruktoosilahust sisaldavas katseklaasis muutus lahus paari minuti
jooksul punakaks, glükoosilahust sisaldavas katseklaasis peaaegu 5
min jooksul õrnalt oranžikaks.
Järeldus:
Fruktoos on ketoos ning glükoos aldoos – fruktoosiga toimus
reaktsioon kiiremini.
Tärklise reaktsioon joodiga
Tärklis
moodustab joodiga intensiivselt lillakas-siniseid komplekse.
Polüsahhariidi ahelad keerduvad joodi molekuli ümber. Tekkinud kompleks laguneb kõrgel temperatuuril ja kaotab värvuse ehk
tärklise reaktsioon joodiga on pöörduv.
Töö
käik: 4-5 ml tärkliselahusele lisati
1 tilk joodilahust. Segu kuumutati keemiseni. Seejärel katseklaasi
alumine pool jahutati jäävannis.
Tulemus:
A.
Joodi lisamisel lahusesse tekkis tumesinine lahus. Kuumutamisel
muutus lahus värvusetuks. Katseklaasi alumise poole jahutamisel
hakkas taastuma tumesinine värvus.
B.
Maisi tärklise terad olid väiksemad kui kartuli omad. Kujult olid
maisi terad kandilisemad kui kartuli omad, kartuli terad olid
ümmargused ning suurused varieerusid. Mikroskoopia võimaldab meil
eristada süsivesikuid, siin katses just tärklist erinevates toiduainetes .
Tallinn 2015
1. Ainete tuvastamine kvalitatiivsete reaktsioonidega
Kvalitatiivsed reaktsioonid võimaldavad kindlaks teha mingi keemilisi elemendi, funktsionaalse rühma, ühendi või teatud omadustega ainete grupi olemasolu või puudumist uuritavas keskkonnas. Katse jooksul saab reaktsioon kas toimuda või mitte, hinnatakse iseloomuliku värvusreaktsiooni teket, sademe moodustumist, gaasi eraldumist või muid üheseid silmaga nähtavaid muudatusi.
1.1 Valkude reaktsioonid
Valgud on polüpeptiidid, milles “ehituskivideks” olevad aminohapped on omavahel seotud amiidsidemete abil. Valgud, nagu teisedki biopolümeerid, täidavad oma funktsioone tänu iseloomulikele ruumilistele struktuuridele, mis tulenevad primaarsest struktuurist, st aminohapete valikust ja järjekorrast. Valkude kindlakstegemiseks lahustes või bioloogilistes vedelikes ja nende aminohappelise koostise iseloomustamiseks kasutatakse mitmesuguseid värvusreaktsioone.
Valgu unikaalse ruumilise struktuuri lagunemist nimetatakse denaturatsiooniks. Selle käigus grupeeruvad ümber või katkevad nõrgad sidemed, kuid peptiidsidemed. Valgu denatureerumine võib vähendada tema lahustuvust, mis omakorda põhjustab valgu väljasadenemise lahusest. Valgu peptiidsidemete lagunemist nimetatakse valgu hüdrolüüsiks.
1.1.1 Biureedireaktsioon
Biureedireaktsioon on valkude üldreaktsioon, kuna ta on tingitud peptiidsidemete esinemisest. Reaktsioon toimub, kui ühend sisaldab kaht või enamat peptiitsidet. Leeliselises keskkonnas moodustavad Cu2 -ioonid sinakasvioletse, valgu hüdrolüüsi produktidega roosa värvusega biureetkompleksi. Kompleksi värvuse annab Cu2 -ioonide seostumine nelja peptiidsidemete koostisse kuuluva lämmastiku aatomiga. Kompleksi värvuse intensiivsus sõltub valgu kontsentratsioonist ja vase ioonide hulgast lahuses.
Sarnased õppematerjalid
11
docx
Biokeemia protokoll 1.1,1.2 lõppversioon
ioonide hulgast lahuses.
Töö käik: Katseklaasi valame 1 ml munavalgu lahust. Lisame 1 ml 10%-list NaOH lahust ja
mõni tilk 1%-list CuSO4 lahust, loksutatakse hoolikalt.
Tulemus: Lahuse värvus läks violetseks, sellepärast et munavalk sisaldab peptiidsidemeid, mis
aluselises keskkonnas(selleks lisasime lahusesse NaOH-d) moodustavad vasksulfaadis olevate
Cu2+-ioonidega lillaka kompleksi. Kompleksi struktuur? Biureetkompleksi struktuur:
1.1.2 Mulderi reaktsioon
See reaktsioon tõestab aromaatset tuuma sisaldavate aminohapete olemasolu valgus.
Aromaatseid tuumi sisaldavad aminohapped on trüptofaan(Trp), türosiin(Tyr) ja
fenüülalaniin(Phe) Milliste? Kontsentreeritud lämmastikhappe lisamisel valk sadestub.
Katseklaasi sisu soojendamisel toimub aromaatsete tuumade nitreerumine.
Töö käik: Katseklaasi valame 1 ml munavalgu lahust ja lisame 5-6 tilka kontsentreeritud HNO3.
Reaktsioonisegu loksutame ja soojendame kuni tekkinud valge sade värvub kollaseks
30
docx
Biokeemia protokoll 1.1 ja 1.2
valkudele ja
spetsiifilised ehk erireaktsioonid, mis on iseloomulikud ainult
teatud aminohapetele valgu molekulis või vastavas lahuses.
1.1.1 Buireedireaktsioon
Biureedireaktsiooni annavad kõik ained, mis sisaldavad vähemalt
kahte peptiidsidet. Leeliselises keskkonnas annab valk
Cu(II)ioonidega sinakasvioletse värvuse, valgu mittetäieliku
hüdrolüüsi produktid aga roosa värvusega biureedikompleksi.
Cu2+ ioonid seostuvad nelja peptiidsideme koostisesse kuuluva
lämmastiku aatomiga, kaks kummastki polüpeptiidahelast või selle
fragmendist. Struktuur?
Töö käik:
Katseklaasi valatakse 1 ml munavalgu lahust. Lisatakse 1 ml 10%-
list NaOH lahust ja mõni tilk 1%-list CuSO4 lahust. Katseklaasi sisu
loksutatakse hoolikalt.
Tulemus: CuSO4 lisamisel muutus lahus lillaks.
Järeldus: Segu värvus violetseks ja sellest võib järeldada, et lahus
7
pdf
Valkude ja süsivesikute kvalitatiivsed reaktsioonid
1. Ainete tuvastamine kvalitatiivsete reaktsioonidega
Kvalitatiivsete reaktsioonidega on võimalik määrata, kas mingi keemiline element, funktsionaalne
rühm, ühend või ühendite rühm leidub uuritavas proovis või mitte. Katse läbiviimisel reaktsioon
vastavalt kas toimub või ei toimu, mida saab täheldada värvuse muutusega, sademe või hägu
moodustumisega, gaasi eraldumisega või muude silmaga nähtavate muutuste toimumisega.
1.1 Valkude reaktsioonid
1.1.1 Biureedireaktsioon
Reaktsioon toimub, kui aine sisaldab vähemalt kahte peptiidsidet.
Leeliselises keskkonnas annab valk Cu(II) ioonidega sinakasvioletse, valgu mittetäieliku hüdrolüüsi
produktid aga roosa värvusega biureedikompleksi.
12
docx
Biokeemia protokoll
Tallinna Tehnikaülikool
Keemiainstituut
Biorgaanilise keemia õppetool
Protokoll N.1
Laboratoorne töö N.1
Ainete kvalitatiivsed reaktsioonid
Valkude reaktsioonid
Süsivesinikute reaktsioonid
Valkude reaktsioonid.
Valgud on polüpeptiidid, mis koosnevad omavahel peptiidsidemega seotud
aminohapetest. Valkudes sisalduvaid aminohappeid on 20 ning nad erinevad
üksteisest radikaaldie struktuuri poolest. Valkude primaarne struktuur iseloomustab
aminohapete valikulist järjekorda, sekundaarne struktuur polüpeptiidahela üksikute
lõikude korda ja tertsiaarne struktuur kogu valgumolekuli ruumilisust
28
docx
Valkude ja süsivesikute kvalitatiivsed reaktsioonid
TTÜ keemiainstituut
Bioorgaanilise keemia õppetool
Biokeemia
Laboratoorsed Töö pealkiri:
tööd: 1.1,1.2 Valkude ja süsivesikute kvalitatiivsed reaktsioonid
Õpperühm: Töö teostaja:
Õppejõud: Töö teostatud: Protokoll esitatud: Protokoll
Tiina Randla arvestatud:
1. AINETE TUVASTAMINE KVALITATIIVSETE REAKTSIOONIDEGA
Kvalitatiivsete reaktsioonide abil saab kindlaks teha mingi keemilise elemendi, funktsionaalse
rühma, ühendi või ühendite rühma olemasolu või puudumist uuritavas materjalis. Hinnatakse,
iseloomuliku värvusreaktsiooni teket, sademe või hägu moodustumist, gaasi eraldumist, muid
silmaga nähtavaid muudatusi. Kvalitatiivse analüüsi puhul pole tavaliselt vaja reagente täpselt
mõõta, piisab silmamõõdust ja suurusjärguga arvestamisest.
1.1 VALKUDE REAKTSIOONID
9
doc
Ainete tuvastamine kvalitatiivsete reaktsioonidega
Laboratoorne töö 1.1 ja 1.2
Ainete tuvastamine kvalitatiivsete reaktsioonidega
Töö teostaja Õpperühm Üliõpilaskood
YASB21
Töö teostamise Juhendaja Protokolli esitamise
kuupäev kuupäev
Tiina Randla
06.02.13 19.02.13
1.1 Valkude reaktsioonid.
1.1.1 Buireedireaktsioon
Biureedireaktsiooni annavad kõik ained, mis sisaldavad vähemalt kahte peptiidsidet.
11
docx
Valkude ja süsivesikute reaktsioonid.
väljasadestamine; valgufraktsioonide lahustamiseks kasutame v'ljasoolastamine.
On ka kvalitatiivsed reaktsioonid valkudega, neid on kaks tüüpi. Universaalsed reaktsioonid:
biureetreaktsioon saab kasutada iga valgu puhul.
Spetsifilised reaktsioonid: iseloomulikud sõltuvalt aminohappe sisaldumisest (nt Mulderi, Milloni
reaktsionid).
Kirjutage pikemalt ja oma sõnadega.
1.1.1 Biureedireaktsioon
Universaalne, kvalitatiivne reaktsioon, sest on seotud peptiidsidemete olemasolekuga.
Peptiidsidemed moodustuvad CuSO4-ga leelises keskkonnas vase värvilised kompleksid.
Kasutatud ained: 1 ml munavalgu lahust
1 ml 10%-list NaOH lahust
1%-list CuSO4 lahust(tilk)
Töö käik: Lisame 1 ml 10%-list NaOH lahust ja mõni tilk 1%-list CuSO4 lahust munavalgu
lahusele ning loksutame hoolikalt.
Moodustus sini-illa värveline sade, mis tõestab peptiidsideme esitamist
26
docx
Valkude ja süsivesikute reaktsioonid
Biokeemia laboratoorne töö
No 1
Ainete tuvastamine kvalitatiivsete
reaktsioonidega
Õppejõud: Ly Villo
Eda Türi 142281 YAGB21
Eda Türi 142281 YAGB21
1.1. Valkude reaktsioonid
Töö teoreetilised alused
Valgud koosnevad aminohapetest, mis on omavahel seotud peptiidsidemetega. Peptiidside moodustub kui
ühe aminohappe karbosküülrühm reageerib teise aminohappe aminorühmaga
Meedia
Kommentaarid (0)
Kõik kommentaarid