Sülg ise produtseerib Cl-ioone ka. Kõhunäärme mitteaktiivse trüpsinogeeni aktiveerimiseks vajalik käivitajaensüüm enteropeptidaas e. enterokinaas. Kui kõhunäärme nõrega jõuab trüpsinogeen peensoolde, toimub enterokinas, mis lõhustab trüpsinogeeni molekulist ära ühe rühma aminohappeid. Kui ...... trüpsiin aktiveerib ülejäänud ensüüme ....... enteropeptidaas, tekib järjest rohkem aktiivset trüpsiini mis aktiveerib iseennast ja teisi valke.LOE TRÜPSIINI KOHTA!!!!!!!!!!!!!! SEEDIMINE SUUÕÕNES Protsessid: 1) Toidu mälumine
katalüütilistes reaktsioonides, kuid stabiliseerivad ensüüme ning on olulised nende kokkupakkimisel ja transpordis. Lipideerimine: Lipideerimine on rasvhapete ja teiste lipiidide liitmine valgumolekuliga. lipideeritud ensüümid paiknevad reeglina membraanides. Mittekovalentsed regulatsioonimehhanismid: Aktivaatorid ja inhibiitorid: Aktivaatorid: Inhibiitorid: Paljude proteaaside aktiivsust inhibeerivad valgulised inhibiitorid. Trüpsiini aktiivsust alandab pankrease trüpsiini inhibiitor (PTI), mis kuulub pankrease nõre koostisesse. Selle valgu olemasolu väldib trüpsiini aktiveerumise pankreases. Antitrüpsiin moodustab trüpsiiniga väga tugeva kompleksi (Kd = 10-13M). Trüpsiini aktiivtsentrisse seostub PTI vaheolek, kus Lys15. Sarnaselt substraadiga moodustub tetraeedriline trüpsiini aktiivtsentri Ser195 on seotud karbonüülse süsinikuga. Kuid see kompleks ei lagune produktideks,sest
20% juhuslikest järjestustest moodustavad erinevaid topoloogilisi signaale Valkude posttranslatoorne modifitseerimine Keemiline modifitseerimine: AtsetüleerimineNatsetüültransferaas Nterminaalne metülatsioon Nterminaalne müristoüleerimine Lipiidide lisamine Cterminaalne amidatsioon Glükosüleerimine Fosforüleerimine Proteolüütiline aktivatsioon: kümotrüpsinogeeni proteolüütiline modifitseerimine tekitab aktiivse trüpsiini Zümogeenid-seedeproteaasid, mida transporditakse toimekohta mitteaktiivse eellasena Preprovalgud- valgud, mis sisaldavad signaaljärjestust ja mida aktiveeritakse proteolüütiliselt osttranslatoorne modifitseerimine Protein self-splicing: Mehhanism, kus aktiivne valk saadakse pärast valgu autokatalüütilist
Kroonilise pankreatiidi ravi on suunatud valu vähendamisele valuvaigistite ja erinevate kirurgiliste meetodite abil ning seedimise toetamisele suu kaudu sissevõetavate kõhunäärme ensüümide abil. • Pankrease alatalitlus: pankreatiin, kümotrüpsiin, festaal, digestaal, mesüüm – tapaloomade kõhunäärmepreparaadid – seedeensüümide asendusravi • autolüüsivastased: proteaasi inhibiitrorid, aprotiniin – pärsivad trüpsiini, fibrinolüsiini Ravimid: MEZYM, KREOL, PANGROL, PANZYTRAT, PANZYNORM, PANKREOFLAT Pankrease ensüümide asendusravi eesmärk on pankrease eksokriinse funktsiooni puudulikkuse kompenseerimine ning sellest tulenevalt efektiivse toitumisseisundi säilitamine ja maldigestsioonist tingitud sümptomaatika leevendamine. Pankreatiin on sea pankreasest saadud pankrease pulber, mis sisaldab pankrease ensüüme (lipaasi, -amülaasi, trüpsiini ja kümotrüpsiini, jt. ensüüme)
Seedeensüümid: trüpsiin, kümotrüpsiin, elastaas ja karboksüpeptidaas Sünteesitakse pankreases inaktiivsete eellasmolekulidena zümogeenid Kaksteistsõrmikus esinev proteaas enteropeptidaas aktiveerib proteolüütiliselt trüpsinogeeni Aktiivne trüpsiin aktiveerib juba kõik ülejäänud zümogeenid Trüpsiin on võimeline aktiveerima ka iseenda eellast trüpsinogeeni Pankreas on proteolüütilise lagundamise eest kaitstud trüpsiini inhibiitori ppoolt Kontroll ensüümi hulga kaudu V = kcat[E]t[S]/(KM + [S]) Konkreetsel substraadi kontsentratsioonil on kiirus proportsionaalne ensüümi kontsentratsiooniga: V ~ [E]t Ensüüm Süntees Degradatsioon transkriptsioon kontrollitud proteolüüs translatsioon Ensüümide induktsioon repressioon
13. Kuidas toimub eukarüootsete kromosoomide uurimine? Millistesse rühmadesse paigutatakse inimese kromosoomid? Kromosoome saab uurida ainult paljunevates, mitootilistes rakkudes. Eukromatiini diferentsiaalvärvimiseks kasutatakse Q, G ja R vöötide meetodit. Tumedad vöödid on tugevamalt kokku pakitud kromatiin. Prometafaasis 300-400. Q vöödid (akrihhiinvärv) tähistavad AT-rikkaid alasid. G vöödid (trüpsiini mõjutus ja Giemsa värv) värvivad Arg-rikkaid histoone. R- vöödid värvuvad vastupidiselt Q- ja G-vöötidele ja värvivad GC-rikkaid alasid. 14. Mis on DNA replikatsioon? Kirjelda selle toimumist initsiatsiooni, elongatsiooni ja terminatsiooni etappidel? DNA replikatsioon on matriitssüntees, mille tulemusena saadakse ühest DNA molekulist kaks ühesuguse nukleotiidse järjestusega DNA molekuli. See protsess
..3,2). Maos sünteesitakse ka lipaasi pH optimumiga 7,0...8,8, mis lõhustab imikul piimarasvu (täiskasvanul vähetähtis). Peensooles, enterotsüüdi membraanil tekib tärklise, glükogeeni ja maltoosi lõhustamiseks vajalik - amülaas, pH optimum ~6,8...7,2. Samas tekivad ka süsivesikuid lõhustavad isomaltaas, maltaas (pH optimum 5,5...6,5), sahharaas (pH optimum 5,5...6,0), laktaas (pH optimum 5,0...5,5). Peensoole limaskestas tekib ka enteropeptidaas (vajalik trüpsiini aktivatsiooniks, pH optimum 6...9), tripeptidaas, dipeptidaas ja endopeptidaas (lõhustavad peptiidsidemeid). Peensooles ja kõhunäärme aatsinusrakkudes tekib ka fosfolipaase ja aminopeptidaase. Pankrease eksokriinses osas tekib trüpsiin (pH optimum 7,5...8,5, toimib peptiidsidemesse Lys ja Arg vahel), kümotrüpsiin (pH optimum 7,5...8,5) ja pankreatopeptidaas E ehk elastaas, mis hüdrolüüsivad valgumolekuli
Seedeprotsessi käigus lagundatakse: 1. süsivesikud monosahhariidideks - pankrease esnüümi amülaasitoimel - toidu disahhariidid: sahharoos(lauasuhkur), maltoos(linnasesuhur), laktoos (piimasuhkur) lõhustatakse monoosideks (vere peamine monosahhariid on glükoos.) - monoosid imenduvad peensoole algusosas 2. valgud aminohapeteks - mao soolhape teeb peptiidsidemed kättesaadavaks seedeensüümidele - mao pepsiinija duodeenumi ensüümi trüpsiini toimel 3. rasvad rasvhapeteks ja glütserooliks - pankrease ensüümi lipaasi(ensüüm, mis lagundablipiide) ja emulgaatorite(detergendid) - ained, mis takistavad rasvaosakestel kokku kleepuda ja samas aktiveerivad lipaase - sapphapped ja nende soolad(ning vereseerumi albumiini) toimel. Seedimise käigus lammutatakse: - triglütseriidid -> monoglütseriidideks ja vabadeks rasvhapeteks
vajalikke toitaineid eraldi. PEST on antibiootikum, mis on vajalik saastumisohu vähendamiseks. 10. a. Enne trüpsineerimist eemaldasin rakkudelt söötme ning pesin rakke PBS-iga. Seejärel lisasin rakkudele trüpsiin-EDTA lahust ning inkubeerisin 3 minutit. Lisasin söödet ning suspendeerisin rakud plaadilt lahti. i. PBS-iga pesemine on vajalik , et eemaldada söötmejäägid, surnud rakud ja seerum, mis takistavad trüpsiini toimimist. ii. Liiga kaua inkubeerides hakkab trüpsiin lagundama ka rakku ennast, mitte ainult rakku plaadile siduvaid valke. b. Rakkude tihedus plaadil oli umbes 50%, kuna plaadi suurus jäi samaks, tuli 10% tiheduse saavutamiseks plaadile alles jätta 1/5 rakususpensioonist. Kokku oli 1200 l suspensiooni, seega plaadile jäi 240 l ning eemaldasin 960 l. 11. a. Lüüsipuhvri valmistamiseks pipeteerisin 15 ml tuubi Tris-HCl (hoiab puhvri pH
kilpnäärme ja suguhormoonid.Veredepoo ja veedepoo. Sapp koosneb: limast, sapipigment bilirubiinist, sapisooladest (mille aluseks on maksarakkudes sünteesitud sapphapped), kolesteroolist. Sapi funktsioonideks on: emulgeerib rasvu ja muudab rasvhapped kergesti vesilahustuvaks ühendiks (soodustades sellega rasvade lõhustumist ja imendumist), aktiveerib lipaasi (tugevdades leeliselist reaktsiooni soolestikus), sapp takistab trüpsiini lõhustumist pepsiini poolt, stimuleerib soole motoorikat 2 ja bakteritsiidse toime tõttu hoiab ära soolesisu roiskumist, sapi abil imendub vit K, värvib ja lõhnastab rooja, omab kõhtulahtistavat toimet. Sapipõie funktsioon On sapi reservuaadiks. Sapipõie limaskesta rakud imavad vett, seetõttu sapp kontsentreerub sapipõies 1020 korda.
et rakud lahti ei tuleks, loksutada õrnalt ning rakkudelt imeda vaakumiga PBS. PBSiga pestakse rakke selleks, et eemaldada surnud rakud, söötmejäägid ja seerum. 2. Lisada 0,2 ml trüpsiin-EDTA lahust, inkubeerida mitte rohkem kui 5 min. Trüpsiin on proteaas, mis lõikab katki rakuadhesiooni valgud ning aitab rakud plastiku küljest lahti saada. Kui liiga kaua inkubeerida hakkab ka raku teisi valke lõikama. Et pärast inhibeerida trüpsiini toimimist, lisatakse 1 ml söödet (DMEM + 10% FBS + PEST). Suspendeerida rakud automaatpipetiga tassi küljest lahti. 3. Tassile peab jääma rakkude tihedus 10%. Meie hinnatud rakkude tihedus on 20%. Seega tassile peab jääma 600 μl rakususpensiooni. Ülearustest rakkudest (600 μl) teeme edasi lüsaati ning selleks võtame neid pipetiga uue epsi. 4. Lisada 4 ml-ni söödet (seega 3,4 ml), teha 8-kujulisi liigutusi ning asetada tass CO2 inkubaatorisse. 94. 95
kilpnäärme ja suguhormoonid.Veredepoo ja veedepoo. Sapp- koosneb: limast, sapipigment bilirubiinist, sapisooladest (mille aluseks on maksarakkudes sünteesitud sapphapped), kolesteroolist. Sapi funktsioonideks on: emulgeerib rasvu ja muudab rasvhapped kergesti vesilahustuvaks ühendiks (soodustades sellega rasvade lõhustumist ja imendumist), aktiveerib lipaasi (tugevdades leeliselist reaktsiooni soolestikus), sapp takistab trüpsiini lõhustumist pepsiini poolt, stimuleerib soole motoorikat ja bakteritsiidse toime tõttu hoiab ära soolesisu roiskumist, sapi abil imendub vit K, värvib ja lõhnastab rooja, omab kõhtulahtistavat toimet. Sapipõie funktsioon- On sapi reservuaadiks. Sapipõie limaskesta rakud imavad vett, seetõttu sapp kontsentreerub sapipõies 10-20 korda. Jämesoole funktsioon vee, mineraalsoolade imendumine, K-vitamiini ja foolhappe produktsioon mikroobide poolt.
Kasteistsõrmiku limaskestas produtreeritav enterekinaasi toimel aktiveerub enamus trüpsinogeneesist trüpsiiniks, mis omakorda muudab aktiivseks ülejäänud trüpsinogeeni, kümotrüpsinogeeni, samuti prokarbooksüpeptidaasid A ja B ning proelastaasi. Pankrease lipaasi aktiivsus suureneb põrsastel emise 4 elunädala jooksul märgatavalt (emisepiimas on rasva 6-8%) Pärast võõrutamist oleneb pankrease trüpsiini ja kümotrüpsiini aktiivsus söödaproteiini allikast (koheselt pärast võõrutamist lõssipulbrit saavatel põrsatel on oluliselt suurem trüpsiini sisdalduss pankrease nõres, kuid sojat proteiini allikana saavatel põrsastek intensiivistus nii trüpsiin kui ka kümotrüpsiini aksitivsus). See erinevus kaob 10 päeva jooskul Pankrease ensüümide aktiivsus saavutub maksmimi 3 tundi pärast söömist PEENSOOLE SEINA NÕRE
eritumist, mis neutraliseerib happelise maosisaldise luues ensüümide tööks vajaliku pH. c)peensooles olevad lipiidid tingivad koletsüstokiniini vabanemise peensoole limaskestast. Hormoon toimib sapipõiele. Kaksteistsõrmikusse paiskub sapp toob siia sapphaped ja nende soolad, mis tekitavad lipiidide peenemulsiooni ja aktiveerivad ka lipaase. See loob tingimuse lipiidide efektiivseks seedimiseks. d) pankrease nõrega saabub peensoolde pro-kolipaas(valk), millest trüpsiini toimel saadakse aktiivne ko- lipaas. See fikseerib pankrease lipaasi toidurasvade pinnale ja aktiveerib seda ensüümi. Ko-lipaasi ja pankrease lipaasi kompleks omab lipiidide seedimises võtmepositsiooni. Triglütseriidide (neutraalrasvade) seedimine neid hüdrolüüsib pankrease lipaas, tekivad 2-monoglütseriidid ja vabad rasvhaped. Põhiosa nendest imendub mitsellides, mingi kogus lõhustatakse ka glütserooliks ning rasvhappeks. Pankrease lipaas on
· NB antikehad ei läbi platsentat. · Immunoglobuliinid on laudaspetsiifilised · Immunoglobuliinid imenduvad verre 1...3 tunni jooksul peale poegimist. · Immunoglobuliinide imendumise võime väheneb peale vasika sündi kiiresti. · Juba 6 tunni jooksul väheneb see 50% · Teisel päeval peale poegimist need immunoglobuliinid ei imendu enam. · Ternespiim on kõrge happesusega, see soodustab kaseiini kalgendumist. · Ternespiimas on trüpsiini ja kümotropsiini inhibiitoreid takistab immunoglobuliinide hüdrolüüsi. · Ternespiimas on enam Mg, P, Ca. · Mg soodustab kõhulahtisust ja soolepigi ( surnud epiteelirakud) eemaldamist. · Ternespiima võib vajadusel külmutada ja joota hiljem aeglaselt üles sulatatult. · A-vitamiin ja E-vitamiin on vasikale vajalikud esimestel elutundidel, aga nende liikumine läbi platsentaarbarjääri on blokeeritud vasikal praktiliselt puuduvad sünni
urobiliin. Bilirubiini liigne hulk veres põhjustab naha ja konjuktiivide kollaka pigmentatsiooni. Sapp on nõrgalt aluseline, sekreteeritakse ööpäevas 800-1200 ml. Sapis seedefermendid puuduvad, omab tähtsust rasvade seedimisel: - emulgeerib rasvu ja muudab rasvhapped kergesti vesilahustuvaks ühendiks, soodustades sellega rasvade lõhustumist ja imendumist - aktiveerib lipaasi, tugevdades leeliselist reaktsiooni soolestikus - sapp takistab trüpsiini lõhustumist pepsiini poolt - stimuleerib soole motoorikat ja bakteritsiidse toime tõttu hoiab ära soolesisu roiskumist - sapi abil imendub vit K Tartu Tervishoiu Kõrgkool 21 Koostanud M. Kolga ja A. Vahtramäe 2007 sügis Seedeelunkond - värvib ja lõhnastab rooja, omab kõhtulahtistavat toimet (lad. k. aperiens)
Akuutse süsteemse eksponeerumise tulemusena lektiinidele võib tekkida surmav maksa ja teiste organite kahjustus. ensüümi inhibiitorid · Kuigi paljud taimsed ja loomsed toidud sisaldavad proteaaside, amülaaside ja lipaaside inhibiitoreid, on siinkohal mõtet puudutada vaid proteaaside inhibiitoreid. Neid leidub sellistes taimedes nagu sojauba (Kunitzi inhibiitor) ja teised oad, hernes, teraviljad, ristik, kartul jt. Suures enamuses on nad trüpsiini, leidub aga ka kümotrüpsiini ning karboksüpeptidaas B inhibiitoreid. On vähe tõenäoline, et keegi sööb mingit ühte toorest inhibiitoriallikat nii palju, et järgneda võiks tõsine akuutne mürgistus. · Siiski on näidatud, et ka erinevate proteaasi inhibiitorite söömine võib suurendada pankrease hüpertroofia ja vähi riski. Ensüümi molekuli seondumisel inhibiitoriga saab
Enesetapuinhibiitorite nõuded: Peavad ilma märklaud ensüümita olema vähereaktiivsed ei tohi põhjustada kõrvalreaktsioone Spetsiifiliselt aktiveeritavad märklaud ensüümi poolt Kui akt inhibiitor on moodustunud ja ensüümiga mittekovalentses kompleksis, siis igal juhul peab jääma ensüümiga seotuks ja inaktiveerima seda, ei tohi nn lekkida. Valkude interaktsioon makromolekulaarsete liganditega Tugev inhibitsioon on siis, kui Kd on väike. Ntx trüpsiini inhibitsioon pankrease trüpsiini inhibiitori PTI poolt Kd=6,010`-14 M (väga tugev seostumine). Tahame Ki väärtusi teada saada, siis peame inhibiitori väärtusi muutma K i kandis. Kui [PTI]= 6,010`-14 M. Vaatame, mis on poolestusaeg reaktsiooni jaoks: Reaktsioon on aeglane, sest poolestusaeg on nii suur, inhibiitorit on vähe, seostumine on aga muidu tugev. Barstar moodustab tugeva kompleksi RNaasiga on enesekaitse inhibiitor ja need ongi tavaliselt hästi tugevalt seostuvad. 05
struuma (goiter). Akuutse süsteemse eksponeerumise tulemusena lektiinidele võib tekkida surmav maksa ja teiste organite kahjustus. Ensüümi inhibiitorid: Kuigi paljud taimsed ja loomsed toidud sisaldavad proteaaside, amülaaside ja lipaaside inhibiitoreid, on siinkohal mõtet puudutada vaid proteaaside inhibiitoreid. Neid leidub sellistes taimedes nagu sojauba (Kunitzi inhibiitor) ja teised oad, hernes, teraviljad, ristik, kartul jt. Suures enamuses on nad trüpsiini, leidub aga ka kümotrüpsiini ning karboksüpeptidaas B inhibiitoreid. On vähe tõenäoline, et keegi sööb mingit ühte toorest inhibiitoriallikat nii palju, et järgneda võiks tõsine akuutne mürgistus. Siiski on näidatud, et ka erinevate proteaasi inhibiitorite söömine võib suurendada pankrease hüpertroofia ja vähi riski. Ensüümi molekuli seondumisel inhibiitoriga saab pankreas signaali ensüümi uute molekulide sünteesiks, mis võib viia pankrease koe hüpertroofiani .
Too 2 näidet, kuidas valgu struktuuri muutus põhjustab muutuse selle valgu rakulises funktsioonis. Kui hemoglobiinile seondub -subühikule hapnik, toimub konformatsiooni muutus ja seejärel saab hapniku liita ka -subühikule ning seejärel kannab seda kopsudest teistesse kudedesse. 43 Trüpsinogeen on tavaolukorras pankrease ensüümi trüpsiini prekursor, millel on leitud madal aktiivsus ja mille taset mõõdetakse vereproovides. Kui enteropeptidaas seda lõikab, muutub see aktiivseks trüpsiiniks, trüpsiin omakorda hakkab ise trüpsinogeene lõikama. 17. Neuronil on 4 morfoloogiliselt eristatavat piirkonda (dendriidid, rakukeha, akson, sünaps). Missuguste protsesside abil tagatakse valkude õigeaegne olemasolu "õiges piirkonas" ja miks see on vajalik?
· Neist esimene on umbes 1 m pikkune kaksteistsõrmik, mis paikneb kõhunäärme vahetus läheduses. · Rohke veesisalduse tõttu on kaksteistsõrmikus liikuv küümus väga vedel, selle kuivainesisaldus jääb vahemikku 26%. · Vatsajärgne seede ja toitainete imendumine · Kaksteistsõrmikule järgneb peensoole pikim osa tühisool, kus toimub toitainete edasine lõhustamine pankrease nõres sisalduvate ensüümide (eelkõige trüpsiini, amülaasi, kümotrüpsiini, lipaasi) abil. · Lõhustatud toitainete pikemaahelalised saadused alluvad peensooles edasisele lõhustamisele, mida viivad läbi sooleseina näärmete ensüümid · Peensooles toimuvad toitainete lõpliku seedumisega seotud lõhustumise ja lõhustamissaaduste imendumise protsessid, välja arvatud vatsakäärimisel moodustuvad lenduvad rasvhapped.
Viiruste isoleerimine ja identifitseerimine toimub enamasti rakukultuurides. Kasutatakse ühekihilisi (monolayer) rakukultuure, harvem kasutatakse kanaembrüosid või katseloomi. Teatud viirused ei kasva rakukultuurides (näiteks rotaviirused, hepatiidi, papilloomi, HIV, Epstein-Barri ja mõned arboviirused). Eristatakse : • Primaarsed rakukultuurid. Koetükike peenestatakse kääridega steriilsetes tingimustes, töödeldakse proteolüütilise ensüümi (tavaliselt trüpsiini) lahusega ja saadud rakkude suspensioon külvatakse klaasile erilistes lamedates kolbides – madratsites. Külvatud rakud moodustavad madratsi pinnal kasvu, mis diploidsete kromosoomidega rakkude puhul on kontakt-inhibeerimisfenomeni tõttu ühekihiline. Tuntumateks primaarkultuurideks on reesusahvide neerukultuur (pRMK) ja inimese loote neerukultuur (pHEK). • Diploidsed rakukultuurid ehk rakutüved. Saadakse normaalse kromosoomide
annaabi.ee 
