madalam). SGLT2-inhibiitorid · Dapagliflosiin(Forxiga) · Empagliflosiin(Jardiance), empagliflosiin+metformiin(Synjardy) Kõrvaltoimed: · Infektsioonid (kuse-ja suguteede infektsioonid) · Võimalik maksakahjustus? · Kusepõie-ja rinnavähk? · Tagasihoidlik vererõhu langus 2. tüüpi diabeediga patsientidel. · Empagliflosiinilon tõestatud kardioprotektiivnetoime. KÕRGE KOLESTEROOL · HMG-CoAreduktaasiinhibiitorid ehk statiinid · Esetimiib(Ezetrol) · Monoklonaalsed antikehad STATIINID Vähendavad oluliselt LDL kolesterooli sisaldust, esmavaliku ravimid Toimemehhanism: · kolesterooli sünteesi takistamine ensüümi HMG- CoAreduktaasi inhibeerimise kaudu maksas. Kõrvaltoimed · Seedetrakti kõrvaltoimed(kõhuvalu, iiveldus, oksendamine, kõhulahtisus, düspepsia), müalgia(lihasvalu, nõrkus ilma kreatiinkinaasitõusuta u 5%), peavalu- enamasti mööduvad. · Maksa transaminaaside tõus (ASAT, ALAT)-normaliseeruvad enamasti. · -tõus
Pesuvahendites Ensüümid saadakse bakteritest ja seentest. Intelligentsed pesupulbrid lagundavad lipiide, valke, polüsahhariide jne. RAKU- JA EMBRÜOTEHNOLOOGIA Kloonimine on geneetiliselt identsete järglaste saamine, Ka vegetatiivne paljunemine on kloonimine. Meristeempaljundus on uuem meetod: Meristeemrakud on diferentseerumata ja paljunemisvõimelised. Nad on totipotentsed – “kõikvõimelised”. Hübridoomitehnoloogia ja monoklonaalsed antikehad • Teatud antigeen viiakse hiiresse. • Hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad B-lümfotsüüdid. • B-lümfotsüüdid viiakse kokku kasvajarak- kudega – need on hübridoomid. • Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. • Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monoklonaalsete antikehade Antigeen tootmine
saamine, Ka vegetatiivne paljunemine on kloonimine. Meristeempaljundus on uuem meetod: Meristeemrakud on diferentseerumata ja paljunemisvõimelised. Nad on totipotentsed "kõikvõimelised". Kasvukuhikust võetakse mõned rakud, pannakse söötmesse (steriilselt). Ühest meristeemist võib saada sadu võrseid. Saadakse viirusvabasid taimi: kartul, maasikas, nelk, krüsanteem. http://oregonstate.edu/potatoes/CSS322WebNotes.html Hübridoomitehnoloogia ja monoklonaalsed antikehad · Teatud antigeen viiakse hiiresse. · Hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad B- lümfotsüüdid. · B-lümfotsüüdid viiakse kokku kasvajarak- kudega need on hübridoomid. · Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. · Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monoklonaalsete antikehade Antigeen tootmine
· VEGF-i produktsiooni stimuleerivad: hüpoksia tsütokiinid (IL-1,-6) ja hormoonid (östrogeen) kasvufaktorid (EGF) ja nende retseptorid (HER-1) onkogeenid (Ras) ja tuumor-supressor geenid (p53) · Türosiinkinaassed retseptorid: VEGFR-1 ja VEGFR-2 VEGF signaaliraja inhibeerimine potentsiaalne vähivastane teraapia 1. Märklauaks ekstratsellulaarne VEGF Anti-VEGF monoklonaalsed antikehad (MKA) Eelised: spetsiifiline inhibeerimine, ko-retseptori neurolipin vahendatud signaali inhibeerimine 2. Märklauaks intratsellulaarne VEGFR Türosiin-kinaasi inhibiitorid ja retseptori vastased antikehad Puudus: teiste retseptor kinaaside poolt vahendatud signaaliradade inhibeerimine VEGF-i inhibeerimisel põhineva teraapia efektid · Veresoonte kasvu peatumine · Olemasolevate tuumori veresoonte taandumine
· Akuutsed (letaalsed) testid: 24 - 96h LC50 · Kroonilised testid: muutused arengus kasvus paljunemises ainevahetuses füsioloogias käitumises Läbivoolusüsteemid In vivo vs. in vitro testid · Eelised ja puudused · Hind · Humaansus · Andmete tõlgendamine organisatsiooniliselt kõrgemale tasandile ja sellega kaasnevad probleemid RAKUKULTUURID · Primaarkultuur, kalade lõpuse epiteelirakkude kultuur · Monoklonaalsed rakukultuurid, PLHC-1 · Vetikakultuurid · Bakterkultuurid, Vibrio fischeri Lõpuse epiteelirakkude kultuur K+ Ca2+ Cl- Na+ Cd2+ Rakukultuurid · Probleemid selles, kas in vitro testid kirjeldavad protsesse, mis toimuvad in vivo. · Probleem selles, et rakukultuurid on elusorganismi lihtsustatud mudelid ja kõike funktsioone, mis elusorganismil esineb, rakul ei esine. · Areng selles suunas, et asendada loomkatseid
replikatsiooni alguspunkti, antibiootikumi resistentsusgeeni); 2.kloneerimisala (MCS) erinevate restriktaaside lõikekohad; 3.uuritavat järjestust (valkude korral tavaliselt cDNA kujul); 4.reportergeeni (GFP, lutsiferaas, lacZ jt.) või märgise (tag; FLAG, myc, V5, GFP) järjestust. 5.eukarüootset promootorit (CMV, SV40) ja polüadenüleerimisjärjestust (SV40); 6.selektsioonimarkeri ekspressioonikassetti. Praktiline töö III Immuunotsütokeemia 1. Mille poolest on erinevad monoklonaalsed ja polüklonaalsed antikehad? Mka reageerivad vaid ühe epitoobiga antigeeni molekulis, on väga spetsiifilised 2. Mis on epitoop? Too välja kaks erinevat tüüpi epitoopide rühma ja kirjelda mille poolest need erinevad. Antigeeni osa, mis seostub spetsiifiliselt antikeha retseptorile. Konformatsioonilised(tertsiaarstruktuuri järgi) ja lineaarsed(aminohappejäägi järjestuse järgi) 3. Kuidas töötab fluorestsentsmikroskoop? Ergastav valgus juhitakse läbi filtri uuritava objektini
Ensüümid saadakse bakteritest ja seentest. Intelligentsed pesupulbrid lagundavad lipiide, valke, polüsahhariide jne. RAKU- JA EMBRÜOTEHNOLOOGIA Kloonimine on geneetiliselt identsete järglaste saamine, Ka vegetatiivne paljunemine on kloonimine. Meristeempaljundus on uuem meetod: Meristeemrakud on diferentseerumata ja paljunemisvõimelised. Nad on totipotentsed "kõikvõimelised". Hübridoomitehnoloogia ja monoklonaalsed antikehad Teatud antigeen viiakse hiiresse. Hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad Blümfotsüüdid. B-lümfotsüüdid viiakse kokku kasvajarak- kudega need on hübridoomid. Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monoklonaalseid antikehi kasutatakse: Antigeenide määramiseks Teatud valkude puhtaks eraldamiseks Haiguste avastamiseks Rasedustestis
Blokeerimine: • lisada rakkudele 0,5 ml blokklahust • jätta seisma +4°C juures. Blokeerimise eesmärk on BSAga katta ära need kohad, kuhu igasugused valgud kleepuvad. Kuna antikehad on ka valgud, siis see etapp takistab antikehade ebaspetsiifilist seondumist. Teine päev – immuunotsütokeemia Immuunotsütokeemias kasutatakse valkude detekteerimiseks rakus antikehasid. Rakubioloogias kasutatakse kahte tüüpi antikehasid: monoklonaalsed ja polüklonaalsed. Monoklonaalsed antikehad on toodetud kindla peptiidi vastu, samas kui polüklonaalsed antikehad tunnevad ära ühe valgu mitut piirkonda ehk epitoopi. Epitoop võib olla konformatiivne kui ka liniaarne. Konformatiivne epitoop on selline epitoop, mida antikeha tunneb 3D struktuuri, ehk natiivsel kujul. Mõned kemikaalid või termiline töötlus võivad seda struktuuri muuta. Liniaarne epitoop on primaarne peptiidjärjestus. Monoklonaalsed antikehad
(transkriptsiooni käigus) See tõestab, et on olemas rakke kus genoom ei ole samasugune. Antikehade kasutamine molekulaarbioloogias. Märgistatud antikehad seonduvad uuritava molekuliga (valguga) Saab teha kindlaks nende valkude sisalduse proovis. Saab panna ensüümi valgu antikeha külge ELISA värvime antikehi floresseeruvate molekulidega visualiseerimiseks hübridiseerid filtrit antikehadega western blotting Millised on monoklonaalsed antikehad? Monoklonaalne antikeha - antikeha, mis on produtseeritud ühe raku või rakuliini poolt, mis on ühest rakust arenenud. On identsed ja omavad unikaalset aminohappe järjestust, kasvavad identselt. Reageerivad vaid ühe epitoobiga antigeeni molekulis. Homogeenset antikehade populatsiooni on võimalik saada B lümfotsüütide liitmisel kasvajarakkudega. Saadud rakuliine kutsutakse hübridoomideks .
Selliste antikehade kasutamine on palju lihtsam. Sellepärast toodi need loomad vivaariumisse. Trunkeeritud IgY ( ΔFc) osadel kilpkonnadel ja partidel, hanedel (non-gallioformes (gallioformes – kanad ja nende sugulased)). Imetajate IgG ga võrreldes IgY on pikemad. Munakollane – sinna sekreteeritakse IgY tüüpi antikeha. Kui on valk kas küülik või kana siis kana on eelis kui tahame imetajate rakke uurida lindude Fc piirkond ei seondu imetajate Fc retseptoridga. Monoklonaalsed antikehad Põhineb antikehade klonaalsel päritolul, lõpuni dferentseerunud lümfotsüüt sünteesib ainult üht tüüpi antikehi, millel on üht tüüpi spetsiifika. Tootvale B-lümfotsüüdile oleks vaja anda igavene elu. Nad viiakse kokku sellise rakuga, millel ei ole stopi, selleks sobivad B lümfotsüütide kasvajad – müeloomid, eriti head on sellised mis antigeeni ei sünteesi. Kuidas tagada ainult hübriidide ellujäämine hiljem? Saavutatakse selektiivsete söötmetega
(Sophie Imbeulti loeng slaid 5). 52. Millised on inimese antikehade klassid? Detailsed kirjeldused. Viis klassi: IgM, G, D, A ja E. IgG sagedaseim. Vt loeng 04.04 slaid 8 ja 9 struktuure. 53. Mis on antikehade hüpervarieeruvate alade funktsioonid? Paiknevad Vh (hard) ja Vl (light) domeenis, nende alade aminohappeline erineb enim antikehade vahel, osalevad seondumisel antigeeniga. On antikehade mitmekesisuse aluseks, ligikaudu 110 aminohappe pikkused. 54. Mis on monoklonaalsed antikehad ja kuidas neid eri tüüpideks eristatakse? Tooge välja nimetused ja päriotolu erinevused. Monokloonsed on pärit ühe B-raku järglaskonnast ja seega identsed. Katselooma, kimäärsed, humaniseeritud ja inimese omad, eristatakse päritolu järgi. Loeng 04.04 slaid 15. Kasvajaraku ja B-lümfotsüüdi hübriidimisel saadakse sellised hübriidsed immortaliseeritud rakukloonid, mis on in vitro tingimustes võimelised tootma vaid üht kindlat
PET uuring 4.3. Loiu kuluga ehk indolentne müeloom Loiu kuluga müeloom on ebaselge tähendusega monoklonaalse gammopaatia ja hulgimüeloomi vahevorm Haigetel võib olla ilma ravita haiguse indolentne kulg kuid või aastaid Keskmine aeg indolentse müeloomi progressiooniks hulgimüeloomiks on 1-2 aas- tat Indolentse müeloomi diagnostilised kriteeriumid 1) Monoklonaalne valk seerumis 30 g/l -8- 2) Monoklonaalsed plasmarakud luuüdis 10% ja/või koe biopsial 3) Müeloomist tingitud organite düsfunktsioon puudub 4) Kriteeriumid ebaselge tähendusega monoklonaalse gammopaatia, hulgimüeloomi, luu üksikplasmatsütoomi või luuvälise üksikplasmatsütoomi diagnoosimiseks puuduvad 4.4. Multiipelne ehk hulgimüeloom Müeloomi diagnostilised kriteeriumid (I variant) 1) Monoklonaalsed plasmarakud luuüdis 10% ja/või koe biopsial plasmatsütoom
difundeeruma. IgD ja Ig E neid on kõige vähem. IgD-d leidub ainult B lümfotsüütide pinnal. IgE on seerumis, seostub Fc retseptori abil eosinof. ja basofiilidel. IgE leidub samuti vaid imetajatel, kellel on see ainus ülitundlikkust (allergiat) vahendav antikeha. Normaalsetel isenditel on IgE hulk vereseerumis väga väike, allergia või parasiitsete nakkuste tõttu suureneb see patsientide veres kuni tuhat korda. 14. Polüklonaalsed antikehad. Monoklonaalsed antikehad (Hübridoomi tehnoloogia) Monoklonaalne antikeha on antikeha, mis on produtseeritud ühe raku või rakuliini poolt, mis on ühest rakust arenenud. On identsed ja omavad unikaalset aminohappe järjestust, kasvavad identselt. Reageerivad vaid ühe epitoobiga antigeeni molekulis. Homogeenset antikehade populatsiooni on võimalik saada B lümfotsüütide liitmisel kasvajarakkudega. Saadud rakuliine kutsutakse hübridoomideks
neuropaatia tüübid. Kasvajad. Kasvajad, vähkkasvajad (pahaloomulised) ja vähkkasvajad (healoomulised), võivad areneda närvidele või ajada närve. Samuti võib polüneuropaatia tekkida mõne organismi immuunvastusega seotud vähi tagajärjel. Need on degeneratiivse häire vorm, mida nimetatakse paraneoplastiliseks sündroomiks. Luuüdi häired. Nende hulka kuuluvad veres ebanormaalne valk (monoklonaalsed gammopaatiad), luuvähi vorm (müeloom), lümfoom ja haruldaste haiguste amüloidoos. Muud haigused. Nende hulka kuuluvad neeruhaigused, maksahaigused, sidekoe häired ja kilpnäärme alatalitlus (hüpotüreoidism). Lasteneuroloogia. Arenguhäired. Laste tserebraalparalüüs. Vastsündinule põhilised iseloomulikud liigutused on ultraheliga jälgitavad juba 15. nädalasel lootel
Ekspresseeritakse enamuste B-lümfotsüütide pinnal. IgG: neli alaklassi, kõik monomeersed. IgA: eksisteerib nii monomeerne kui ka dimeerne vorm (kaks monomeeri mida hoiab koos J ahel). Kõigil neil antikehadel ühesugune struktuur: kaks identset rasket ja kerget ahelat, kergel üks ja raskel kolm või neli konstantset domeeni. Mõlematel ahelatel on üks varieeruv regioon e. domeen, mis seondub antigeeniga - komplementaarsust määravad piirkonnad (CDR). Monoklonaalsed antikehad (Mak). 1975 lõid Köhler ja Milstein hübridoomi meetodi, liites hiire immuniseeritud põrnarakud hiire müeloomi rakkudega ning said hübriidsed rakud e hübridoomid, mis sekreteerisid spetsiifilisi antikehi selle antigeeni vastu, mida kasutati põrnadoonori immuniseerimiseks. Põrnarakud võimaldavad toota antikehi, müeloomirakud võimaldavad kultuuris piiramatut kasvu ja eritada immunoglobuliine
VISA: vankomütsiinile mõõdukalt resistentne SA. (mehhanism teadmata). USAs 1 juht VRSA-d 2002. aastal. Oht: resistentsuse ülekanne enterokokkidelt. (VRE teeb vankomütsiini juuresolekul rakuseina prekursoreid, millel on muundunud ots – madal afiinsus vankole.) Profülaktika: aseptika kirurgilistel protseduuridel. Maskid ja kindad. Mõnikord kasutatakse kandluse ravi. Vaktsiine pole ega ole tulemas. Pinna adhesiooniproteiinide sidumiskoha vastu on monoklonaalsed antikehad (inimesel efekt veel uurimisel). Bakterid mõmm :) 05/06 CONS Üldist. G+, katalaas+, koagulaas–, fakultatiivsed anaeroobid. Virulentsus. S. epidermidis, S. haemolyticus: lima produktsioon, kinnitumaks võõrkehadele ja takistamaks antibiootikumide juurdepääsu. S. epidermidis moodustab biofilmi, mille lagunemisel vabaneb suur hulk mikroobe. S
2. keemiaravi ehk tsütostaatiline ravi 3. kiiritusravi Vähkkasvaja olemusest ja asukohast sõltuvalt kasutatakse tavaliselt vaheldumisi mitut raviviisi. Kõige tõhusama ravimeetodi valiku üle otsustab arst. · Lisaks kasutatakse bioloogilist ravi Vähi raviks või vähiravi kõrvaltoimete vähendamiseks kasutatakse ära keha oma kaitsemehhanisme. Need ravivõimalused võivad tugevdada või taastada keha loomuliku kaitsevõime. Bioloogilise ravi alla kuuluvad monoklonaalsed antikehad, radioimmuunravi, interferoonid, vaktsiinid, angiogeneesi (veresoonte teket) pidurdav ravi. Hormoontundlike vähkkasvajate (nt rinnavähk või munasarjavähk) puhul on võimalik kasutada ka hormoonravi. Inimese organismis leidub hormoon östrogeen, mis soodustab vähkkasvajate arengut. Hormoonravi blokeerib östrogeeni kasvajat stimuleeriva toime ARENG, KASVAMINE, VANANEMINE Ontogenees ehk isendi arenemine ehk individuaalne areng; on üksiku organismi areng
Punkt-diagrammil- flourtsentsi järgi, moodustavad pilved Polüklonaalsete ja monoklonaalsete antikehade erinevus. Monoklonaalsete antikehade saamise meetod ja rakendamine. Polüklonaalsed antikehad saadakse, kui süstitakse looma peptiidi antigeeniga ning seejärel, kui sekundaarne immuunvastus on stimuleeritud, isoleeritakse antikehad tervest seerumist. Seega on polüklonaalsed antikehad heterogeenne segu antikehadest, mis tunnevad ära mitmeid epitoope. Monoklonaalsed antikehad on spetsiifilised üksiku epitoobi suhtes, mistõttu peetakse neid märklaud-antigeeni suhtes enam spetsiifilisemaks kui polüklonaalseid antikehi Raku komponentide eraldamine tsentrifuugimise teel. Sade koguneb põhja,supernatant peale Raku komponentide eraldamine pideva ja astmelise tihedusgradiendi abil. Valkude kromatograafilise lahutamise kolme erineva viisi (ioonvahetus-, geelfiltratsioon- ja afiinsuskromatograafia) põhimõte.
toimuda membraani depolariseerumine? Hüperpolarisatsioon on põhjustatud K ja Cl kanalite avatusest (K välja, Cl sisse). Depolariseerumine saaks toimuda kui liigsed Cl ioonid lahkuvad rakust ning rakku pääseks K ja Na ioone. Endomembraanid (ER/Golgi) 1. Nimetage vähemalt 5 rakkudest ER/Golgi vahendusel sekreteeritavat valku 1- antiproteaas, seerumalbumiin, insuliin, glükagoon, glükoproteiinid, proteoglükaanid, kollageen, amülaas, endorfiin, monoklonaalsed antikehad, erütropoietiin, mutsiinid, 2. Kirjeldage SRP (signaali äratundja partikkel) struktuuri ja milleks vajalik. SRP on tsütoplasmas paiknev valguline RNA-d sisaldav kompleks, mis seostub signaaljärjestusega, ribosoomi suure subühikuga ja SRP retseptoriga. SRP koosneb ~300 nukleotiidi pikkusest RNA ahelast ja kuuest valgust (P9,P14,P19,P54,P68,P72 number näitab molekulmassi kilodaltonites). P54 vahendusel toimub seostumine valguga ja SRP retseptoriga.
annaabi.ee 
