TTÜ keemia ja biotehnoloogia instituut YKA0060 Instrumentaalanalüüs Vedelikkromatograafia Kofeiini ja teobromiini määramine jookides kasutades vedelikkromatograafiat Õpperühm: Töö teostaja: Õppejõud: Töö teostatud: 1 Töö eesmärk Eesmärgiks on määrata kofeiini ja teobromiini kontsentratsioon joogis (antud juhul rohelises tees) vedelikkromatograafia meetodil. 2 Töö käik Uuritav proov: ROHELINE TEE 1. Valmistada standardlahused (dest. vees) kontsentratsiooniga 3, 10, 15 ja 30 μg/mL (ruumala 1mL)g/mL (ruumala 1mL) 3 μg/mL (ruumala 1mL)g/mL: 0,1 mL lahust + 0,9 mL vett 10 μg/mL (ruumala 1mL)g/mL: 0,3 mL lahust + 0,7 mL vett
Ekstrakt valati tsentrifuugitopsi, jahutati ning lisati 3 ml kloroformi. Topsi loksutatud korralikult, pandud tasakaalu teise topsiga ning tsentrifuugitud 5 minutit 3000 rpm. Kihistunud proovist tõstetud alumine kiht teise topsi. Ekstraheerimist ja tsentrifuugimist korratud veel kaks korda. Ühendatud kloroformi kihtide kuivatamiseks lisatud topsi veidi Na2SO4. Ekstrakti koostist uuriti TLC meetodil, kasutades standarditena kofeiini (2mg/ml), teofülliini (2mg/ml) ja teobromiini (0,5mg/ml). TLC plaadile kantud 2l uuritavat proovi, kofeiini ja teofülliini standardit. Teobromiini standardit pandud 2x2l. Plaati elueeriti segus CHCl3/C2H5OH (9:1) ning vaadeldi UV valguse käes. Pliiatsiga joonistati plaadile plekkide asukohad ning seejärel plaat ilmutati. Eraldatud ainete koguse määramiseks kaaluti tühi keeduklaas analüütilistel kaaludel, seejärel valati ühendatud kloroformi lahus ettevaatlikult keeduklaasi. Keeduklaas asetati tõmbekapi all
kofeiin peaaegu kõikjal legaalne Arvatakse, et maailmas tarbitakse igal aastal 120 000 tonni kofeiini Sellest kogusest saaks iga inimene juua ühe kofeiini sisaldava joogi päevas 90 protsenti tarbitavast kofeiinist pärineb siiski kohvist ja teest Kofeiinisisaldus sõltub kohvioa sordist ja kohvi valmistamise meetodist Kofeiin Röstimine vähendab kohviubade kofeiinisisaldust Kohv sisaldab väikestes kogustes ka teofülliini ja teobromiini Teine levinud kofeiini allikas on tee Sõltuvalt kangusest sisaldab tee keskmiselt poole vähem kofeiini ühe tassi kohta kui kohv Mustas ja oolong tees leidub rohkem kofeiini kui teistes Tees on väikene kogus teobromiini ja veidi rohkem teofülliini kui kohvis Kofeiin Kofeiin on levinud toimeaine ka karastusjookides, nagu Coca-Cola ja Pepsi-Cola Need joogid sisaldavad tavaliselt 1050 mg kofeiini ühe klaasi kohta Energiajookides on kofeiini kuni 32 mg 100 ml kohta
2007 BIOLOOGIAOLÜMPIAADI KOOLIVOOR 11. 12. klass I 1. Mis on maailmas levinuim psühhoaktiivne aine? (1 punkt) Maailma levinuim psühhoaktiivne aine on kofeiin. http://en.wikipedia.org/wiki/Caffeine 2. Kuidas on see aine seotud teobromiini, paraksantiini ja teofülliiniga? (1 punkt) Kofeiin sisaldab kõiki neid kolme ainet. Kofeiin lagundatakse maksas nendeks kolmeks põhiliseks aineklassiks. http://en.wikipedia.org/wiki/Caffeine 3. Nimeta selle aine negatiivseid ja positiivseid toimeid inimesele, tuginedes viimaste aastate uuringute tulemustele (Iga toime nimetamine annab 0,5 punkti.). Suurtes kogustes võib see tekitada: närvilisust, ärevust, lihaste tõmblemist, unetust,
Koolapähklied Seemned on punased või Valmistatakse ekstrakti, Sisaldavad Koolapähkleid kasutatakse valged. Mõru maitsega sisaldab millest omakorda alkaloide,kofeiini ja sageli köha ja astma ravina. kofeiini. koolajooke ja -tablette. teobromiini. Makadaamia e Pähklid on ümarad, siledad ja Lisatakse karriga Energ.väärtus: 660- Makadaamiapähkel alandab austraalia pähkel suhteliselt kahvatud Söödav maitsestatud roogadele, 740kCal kolesterooli ja vähendab osa ümarpoolne,kergelt salatitele, hautistele, Magneesium, kaalium, südamehaiguste riski.
Küpsed marjad ligatakse maha ja avatakse käsitsi. Niiske pehme viljasisu kogutakse korvidesse ning jäetakse käärima kuni seitsmeks päevaks. Alles siis omandavad nad tüüpilise tumeda värvuse ja aroomi. Kuivatatud oad viiakse vabrikusse, kus need sorteeritakse, röstitakse ja vabastatakse rabedatest koortest.Edasi neid röstitakse, purustatakse, pressitakse välja li (nn. kakaovi), jääk jahvatatakse kakaopulbriks. Seemnekestadest saadakse alkaloide teobromiini ja kofeiini. Kasutatakse ka magustoitudes - pudingid, kreemid, koogid, kompvekid, piimajoogid, kohupiimatoidud, jogurtid. Kakaopulbril on väga iseloomulik aroom, ta maitseb kibemõrkjalt ning sametiselt. Maitse pole võrreldav sokolaadiga. Ehtne kakao mõjub uriinieritust soodustavalt, veresooni laiendavalt ja selles sisalduva kofeiini tõttu ka pisut toniseerivalt. Ainult veega valmistatult on kakao hea vahend kõhulahtisuse vastu.
(teofüliin esineb tees) · Nii teofülliin kui teobromiin on struktuurilt ja toimelt sarnased kofeiinile ning neid aineid tekib ka organismis kofeiini lammutamise käigus. · kofeiin on maailma kõige populaarem psühhoaktiivne aine · Arvatakse, et maailmas tarbitakse igal aastal 120 000 tonni kofeiini. · Kohvi kofeiinisisaldus sõltub kohvioa sordist ja kohvi valmistamise meetodist. ( röstimine vähendab kofeiinisisaldust kohvis) · kohvis on peale kofeiini ka teobromiini ning teofülliini (väiksemates kogusustes) · kofeiin, nagu ka paljud teised alkaloidid, näiteks nikotiin ja morfiin,Kofeiinimolekul on piisavalt hüdrofoobne ehk lipiid-lahustuv, et läbida nii biomembraane kui ka hematoentsefaalset barjääri organismi kaitsebarjäär, mille ülesandeks on ära hoida viiruste ning toksiinide (loomse päritoluga mürkaine) tungimise kesknärvisüsteeemi. · Kofeiin laguneb maksas kolmeks peamiseks metaboliidiks (metabolismi ehk
· karamellil õige kuju, ei tohi kleepuda · etiketitud karamellil paber eralduma kärisemata · maitse ja aroom selgelt väljendunud · vigadeks on niiske ja kleepuv pind, suhkrustumine Hoida kuivas , puhtas ja tuulutatavas ruumis, temp. 15-21°C. KAKAOPULBER (KAKAO) Valmistatakse kakaoubade massist, millest on välja pressitud kakaovõi. Kakaopulber on sokolaadi tootmise kõrvalsaadus. kakaopulbris on 10...17% rasva ( olenevalt pressimisastmest), süsivesikuid, valku, teobromiini, mineraal- ja aroomiained. ,,Kalev" valmistab kakaopulbrit Meie Mark ( ei lahustu) · hästi peenestatud, ei tohi tunda teralisust · värvus helepruunist tumepruunini · maitse mõru, lõhn meeldiv · ei tohi olla niiskunud ja tükki läinud Kasutatakse külmade ja soojade kakaojookide valmistamiseks (Nestle, Fazer)- lahustuvad kiiresti kakaopulbri baasil valmistatakse ka mitmesuguseid võideid. SOKOLAAD Põhitooraineks kakaooad, mis on kakaopuu viljade seemned. kakao ergutav toime tuleneb
lahuse tsentrifuugitopsi. Jahutasin vedeliku jäävannis. Kokku sain 9 ml lahust. Lisasin 3ml kloroformi, loksutasin 3 minutit ning tsentrifuugisin, eraldasin Pasteuri pipetiga alumise kloroformikihi. Kordasin ekstraktsiooni 2 korda 2,5 ml kloroformiga. Ühendasin kloroformikihid. Kuivatasin kloroformilahuse 1-2g Na2SO4-ga. 2. Ekstrakti koostise analüüsimine TLC meetodil Analüüsisin ekstrakti TLC meetodil, standarditena kasutasin kofeiini (2mg/ml), teofülliini (2ml/mg) ja teobromiini (0,5mg/ml). Elueerimiseks kasutasin CHCl3:C2H5OH (9:1) lahust. Vaatlesin plaati UV valguses. Kuna mingil põhjusel TLC plaat ei tulnud välja, kordasin katset, kuid plaat jooksis siiski viltu. Teiselt plaadilt on siiski võimalik järeldada, et suure tõenäosusega on tegemist kofeiiniga, kusjuures kontsentratsioon on kõrgem, kui standardil, st >2 mg/ml. 3. Eraldatud ainete koguse määramine Kallasin kloroformilahuse Na2SO4 kristallidelt keeduklaasi, aurutasin nõrgal kuumusel
Rasketel juhtudel järgneb erutusseisund, kehatemperatuuri tõus, pulsi kiirenemine, tekivad hingamise häired ja nõrkus, lõpuks kaob teadvus. Mürgistus võib lõppeda surmaga, lastel võib sellele eelneda krambid. Enamasti tekib raske põletik suus; mao ning soolte, samuti neerude talitlus on pikka aega häiritud. Euonymus alatus(tiivuline kikkapuu) ja Euonymus europaeus(harilik kikkapuu) Taimeosad, eriti viljad ja lehed mürgised. Kikkapuu sisaldab alkaloide teobromiini ja kofeiini, samuti väga kibedaid terpeene. Mürgistusjuhtumid on sagedasemad väikestel lastel, keda köidavad eredalt värvunud viljad. Nende söömine võib kahjustada maksa ja neerusid ning põhjustada isegi surma. Õied sisaldavad kergesti lenduvaid ja ebameeldiva lõhnaga aineid, mis võivad teatud osal inimestest kutsuda esile nõrgemaid mürgistusnähtusid. Kikkapuu mürgiseid vilju on rahvameditsiinis kasutatud okseti ja lahtistina, aga nende puruga
Kasutatakse laialdaselt Tai ja teiste Kagu-Aasia maade köögis. Tais lisatakse kookospiima karridele, hautistele ja kastmetele, samuti pannakse kookospiima magusroogadesse ja karastusjookidesse. Sobib seega paljude idamaiste roogade, eriti tugevamaitseliste kastmete valmistamiseks. Kutsutud ka Aasia kooreks. Koola pähkel Troopilises Aafrikas kasvavate taimede perekond, mille mõnede liikide viljad (pähklid) sisaldavad egutavaid aineid – kofeiini, teobromiini jt. Pärismaalased tarvitavad neid närimiseks. Seedripähkel e. piiniapähkel Piiniapähklid on piiniamänni seemned, mis valmivad käbis. Piinia ehk itaalia seedermänni suuri kergelt mandlikujulisi söödavaid seemneid tunti juba Vana-Roomas. Tänapäeval kasutatakse piiniaseemneid Itaalias peamiselt maiustuste valmistamiseks, aga neid süüakse ka nii toorelt, kui röstituna, populaarne salatilisand.
tugev. Kasutatakse segudes. Hiina tee Meeldiva maheda maitsega, veidi mõrkjas, palju erinevaid sorditüüpe. Kasutatakse teesegudes. Gruusia tee Sisaldab vähe parkhappeid, tõmmis kuldkollane. Kvaliteet väga erinev, enamasti alla keskmise, sõltub aretustöö tagajärjekusest, kasvukohast, koristusajast, töötlemistehnoloogiast. Mitte eriti nõutav teesort. Kakao toiteväärtus. Kakao on kõrge toiteväärtusega. Viljad sisaldavad: virgutavat teobromiini, kofeiini, lihaseid stimuleerivat teofülliini üle 700 muu komponendi. Kakaooad sisaldavad valke, rasvu (kakaovõi), süsivesikuid, kofeiini, teobromiini, tanniini, tselluloosi (kiudaineid rikkalikult), oblikhapet, vähesel määral mineraalaineid (fosfor, kaalium, raud jt), kaduvväike kogus A- ja B- rühma vitamiine. 40. Kakao töötlemine (etapid). Seemnete eraldamine Korjatud kakaopuu viljadel viljakest lõhutakse.
Kakaopuu õitseb ja kannab vilja aasta läbi, nii et vilju tuleb koguda valikuliselt. Küpsed marjad lõigatakse maha ja avatakse käsitsi. Niiske pehme viljasisu kogutakse korvidesse ning jäetakse käärima kuni seitsmeks päevaks. Seejärel pestakse ja kuivatatakse kakaoseemneid päikese käes või tehissoojuses ning puhastatakse kestadest. Edasi neid röstitakse, purustatakse, pressitakse välja õli (nn. kakaovõi), jääk jahvatatakse kakaopulbriks. Seemnekestadest saadakse alkaloide teobromiini ja kofeiini. Briti teadlased hoiatavad, et maailma shokolaaditoodang langeb drastiliselt, kui Lõuna- Ameerika kakaoistandusi tabanud haigused mujale levivad. Suurenenud kaubandus ja transport võib vahendada selliste seenhaiguste levikut, nagu seda on tuulepesaks (nõialuuaks) nimetatu. Haigus on saanud nime sellest, et ta muudab kakaopuu võra tuulepesa sarnaseks pusaks. 1970. aastate äge metsaraiumine meelitas maamehi liikuma üle Andide ning nad tõid
kastanid põhja ja halvad jäävad pinnale hulpima Koolapähklel Koolapähkli Koolapähklitest Sisaldavad seemned on valmistatakse alkaloide, kofeiini punased või valged. ekstrakti, millest ja teobromiini. omakorda koolajooke- ja tablette. Makadaamia ehk Makadaamia Eriti Energeetiline Luustunud austraalia pähkel pähklipuu vili on väärtuslik on väärtus: 660- viljakest on tugev, kaetud nahkja peaaegu värvitu ja 740kcal 100g selle purustamiseks
- Iirimaal, - Inglismaal, - Iraagis, - Austraalias, - Uus-Meremaal (rohkem kui 2 kg teed aastas inimese kohta). Teed kasutatakse veel: - kosmeetikas (naha- ja juuksehooldus), - puhastusvahendina (klaasi, peeglite, lakitud pindade puhastamiseks). 28.Kakao toiteväärtus. Kakao on kõrge toiteväärtusega. Viljad sisaldavad: - virgutavat teobromiini, - kofeiini, - lihaseid stimuleerivat teofülliini - üle 700 muu komponendi. 100 g jahvatatud kakaopulbrit sisaldab: - rasvu 26 g - süsivesikuid 52 g - kiudaineid 40 g - toiduenergiat 514 kcal 29. Kakao koristamine, töötlemine (etapid). Koristamine: Ghanas ja Nigeerias on põhikoristusperiood oktoobrist veebruarini, aastavahetuse ümbruses.
kuivatatud ja külmutatud ussikesi ning putukaid. Maailma juhtivaks akvaariumkalade toitude tootjaks on Tetra. MAGUS (KAKAO, NÄRIMISKUMM JA MUUD) Kakaopuid on 3 erinevat sorti. Kakaopuu viljad võivad olla rohelised, kollased või pruunid, 10- 30 cm pikkused ja 5 cm läbimõõduga. Vilja sisemus on jagatud viieks kambrikeseks. Ühes viljas on 20- 40 seemet. Kakaouba sisaldab: Rasva 40- 60%, Valku 12%, Tärklist 7%, vähemal määral vett, parkaineid, mineraalaineid, kofeiini, teobromiini. Suurimad kakao tootjad on Elevandiluu Rannik, Ghana ja Indoneesia. 19.sajandil rajati sokolaaditehaseid Euroopasse ja valmistati esimesi tahvli- ehk söögisokolaade. Õpiti eraldama kakaovõid ja kakaomassi ning valmistama piimasokolaadi ja kakaopulbrit. Töötlemisel korjatakse valminud viljad puudelt. Kuivatatakse päikse käes, kus seemned tumenevad ja omandavad aroomi. Siis sorteeritakse välja parimad kakaooad, mida praetakse
Pressimisel saadakse väärtuslikku arahhiseõli. 29 Parapähkel ehk brasiilia pähkel kujutab endast greibisarnaste viljade seemneid. Viimased meenutavad apelsini segmente. Seemnetes asub õline tuum, milles leidub seleeni (kaitseb organismi rakke vananemise eest). Koola pähkli vili koosneb 6...16 seemnest. Need on punased või valged, pikkusega 5 cm. Sisaldab alkaloide kolatiini, kofeiini ja teobromiini. Pähkli ekstrakti kasutatakse koolajookide ning peenestatud massikoolasokolaade ja koolatablettide valmistamisel Pähklid peavad olema terved, väljaarenenud, tootele omase maitse ja lõhnaga, mitte hallitanud ja kahjurite poolt rikutud. 6.5. Lõunaviljad Lõunaviljade, nimetatakse ka eksootiliste viljade arv suureneb vastavalt sellele, millal nad meie vabariiki jõuavad. Nad on erineva ehitusega ja keemilise koostisega, kuuluvad põhimõtteliselt kõikidesse eespooltoodud rühmadesse. 6.5.1
vigu - nii nikotiinivõõrutuses suitsetajatel kui ka mittesuitsetajatel · Nikotiini kognitiivsed efektid on seotud aju atsetüülkoliinisüsteemiga - sama toime on kaudsetel agonistidel, vastupidine antagonistidel · Mittesuitsetajad ei taju nikotiini efekte meeldivatena! Kofeiin Metüülksantiinid · Kofeiin · Teofülliin · Teobromiin KNS stimulaatorina: teofülliin > kofeiin >> teobromiin Metüülksantiinide allikad · Camellia sinensis kofeiin, ka teofülliini & teobromiini · Coffea arabica kofeiin Etioopia taim, Jeemeni kaudu Araabia poolsaarele kofeiin isoleeriti SKS 1820 · Theobroma cacao peamiselt teobromiin, vähe kofeiini kakao & shokolaadi allikas Kofeiinimürgistus DSM-IV järgi: viis alljärgnevat ilmingut pärast vähemalt 2-3 tassi kohvi joomist · Rahutus · Närvilisus · Erutatus · Unetus · Kõhulahtisus · Meeleolu kõikumine · Depressioon · Näopunetus
H H H H teofülliin (1,3-dimetüülksantiin) ja teobromiin (3,7 K u s ih a p e K s a n tiin -dimetüülksantiin). 39 Kofeiini leidub kohviubades, teelehtedes, koolapähklites; teobromiini sisaldub rohkesti tees, kakaos. Kofeiin ja metüülkofeiin on kasutusel ka psühhostimulaatoritena. Kofeiin stimuleerib kesknärvisüsteemi (eriti väsinud organismis), suurendab südame löögimahtu. Ta avaldab mõju närvi-, eritus- ja vereringesüsteemile ning maksa- ja lihasfunktsioonidele. Kofeiin on ka alkoholi antagonist (nõrgestab intoksikatsiooni). Ta on ka diureetilise toimega, kuid psühhostimulatsiooni tõttu ei saa kofeiini kasutada diureetikumina
annaabi.ee 
