Tee alkaloidide määramine, LÜK (0)

Tee alkaloidide määramine

Uuritavaks teeks oli dilmahi tee.

Kaalutised:

Tühi kott – 0,3352 g
Täis kott –1,7748 g
Tee mass – 1,4396 g

Töö käik

Tee alkaloidide ekstraktsiooniks valati teekotile peale 12ml 1 M Na2CO3 lahust, kuumutati pliidil keemiseni ning hoiti nõrgal keemisel 3 minutit. Ekstrakt valati tsentrifuugitopsi, jahutati ning lisati 3 ml kloroformi . Topsi loksutatud korralikult, pandud tasakaalu teise topsiga ning tsentrifuugitud 5 minutit 3000 rpm. Kihistunud proovist tõstetud alumine kiht teise topsi. Ekstraheerimist ja tsentrifuugimist korratud veel kaks korda. Ühendatud kloroformi kihtide kuivatamiseks lisatud topsi veidi Na2SO4.
Ekstrakti koostist uuriti TLC meetodil, kasutades standarditena kofeiini (2mg/ml), teofülliini (2mg/ml) ja teobromiini (0,5mg/ml). TLC plaadile kantud 2μl uuritavat proovi, kofeiini ja teofülliini standardit. Teobromiini standardit pandud 2x2μl. Plaati elueeriti segus CHCl3/ C2H5OH (9:1) ning vaadeldi UV valguse käes. Pliiatsiga joonistati plaadile plekkide asukohad ning seejärel plaat ilmutati.
Eraldatud ainete koguse määramiseks kaaluti tühi keeduklaas analüütilistel kaaludel, seejärel valati ühendatud kloroformi lahus ettevaatlikult keeduklaasi. Keeduklaas asetati tõmbekapi all pliidile ning aurutati kloroform ära. Kuiv keeduklaas kaaluti ning asetati uuesti pliidile umbes kümneks minutiks veendumaks, et kloroform oleks täielikult aurustunud . Seejärel kaaluti uuesti.

Tulemused

TLC plaadil ilmunud plekkide järgi identifitseeriti teest ekstraheeritud ühendid, milleks olid kofeiin ja teobromiin, kusjuures kofeiini oli päris palju ja teobromiini vähe. Võrreldes proovi plekke standardite plekkidega, hinnati kofeiini sisaldust ekstraktis ligikaudu 1,8 mg/ml, kuna tee ekstraheeriti 12ml on kofeiini hulk tees on ligikaudu12*1,8 = 21,6 mg ehk 1,5%.
Peale kloroformi aurustumist saadi ksantiini derivaatide kaalutis – 24,1 mg. Nende sisaldus tees oli ligikaudu 1,7 %.
Xxxxx Xxxxx
999999 YASXX