lahuses. 1.1.7 Valkude termiline denatureerimine ja lahustuvuse sõltuvus pH-st Kõik valgud denatureeruvad kõrgel temperatuuril ja vastav temperatuur oleneb valgu loomusest ja keskkonna koostisest. Tavaliselt kaasneb valgu väljasadestumine. Tavaliselt kaasneb denatureerumisega valgu väljasadestumine lahusest. Töö käik: Kahte katseklaasi valame 2ml munavalgu lahust. Ühte katseklaasi lisame 1ml konts. äädikhapet. Mõlemaid katseklaase kuumutame keeval vesivannil. Lahus, kus oli ainilt munavalk, värvus valgeks (hägune), aga lahusega, kus oli munavalk ja äädikhape, mittemidagi ei juhtu. Järeldus: Valku denatureerimine sõltub temperatuurist ja pH-st. Kaitses me näeme, et happelises keskkonnas (pH<7) valk ei sadestu, aga samal temperaturil munavalk, mille keskkond on neutraalne (pH=7), sadestus. Kui aga keskkonna pH väärtus erineb tunduvalt valgu isoelektrilise täpi (pI)
Kasutatud ained: 2katseklaasi: I katseklaas: 1 ml laktoos II katseklaas: 1 ml glükoosi. Mõlemasse katseklaasi lisada 3 ml Barfoed´ reaktiivi. Barfoed´ reaktiiv: [vask(II)atsetaadi Cu(CH3COO)2 lahus äädikhappes] Töö käik: Peale Barfoed´ reaktiivi lisamist, segame hoolikalt ning kuumutame keeval veevannil lahust 3-4 minutit. Lahus laktoosiga, ei tekkinud sadet ning teise lahusesse tekkis punakas sade, mis näitab, et lahuses oli monosahhariide. Laktoos andis nõrgama sade, võrreldes glükoosiga. Laktoosiga lahuses ei tohtinud sadet tekkida. · Kuna laktoosi lahuses ei tohtinud sadet tekkida, saan teha järeldust, et ei lisanud piiisavalt Barfoedi reaktiivi või katseklaas oli must, aga ma ei jälginud seda.
Kõik valgud denatureeruvad kõrgel temperatuuril pöördumatult, kuna nõrgad sidemed katkevad. Tavaliselt kaasneb denatureerumisega valgu väljasadestumine lahusest. Kui aga keskkonna pH väärtus erineb tunduvalt valgu isoelektrilise täpi (pI) väärtusest, siis ei pruugi denatureerunud valk lahusest välja sadestuda. Töö käik: Kahte katseklaasi valame kummassegi 2 ml munavalgu lahust. Ühte katseklaasi lisame 1 ml kontsentreeritud etaan- e äädikhapet. Mõlemaid katseklaase kuumutame keeval vesivannil. Tulemus: Munavalgu lahuses, millesse oli lisatud etaanhapet, ei tekkinud soojendamisel sadet. Teise, kuhu polnud midagi lisatud, tekkis soojendamisel sade. Etaanhappe pH on happeline ning järeldades katsest, erineb tunduvalt valgu isoelektriliselt täpi väärtusest. Sellest tingituna omandasid kõik valgumolekulid ühesuguse millise? (pI-st oluliselt erineva pH väärtusega keskkonnas omandavad kõik valgumolekulid ühesuguse laenguga (,,+" või ,,-,,)) laengu, valk-
karastamisele. Aga esllest siis räägime järgmisel korral. Legeerivate elementide mõju martensiitmuutuse temperatuurile ehk martensiidi tekke termperatuurile, ärme täna räägi. Martensiit on faas, mille poole me püüdleme karastamisel. Me tahame saada 100% martensiiti, et saada suurt kõvadust ja kulumiskindlust. Siinkohal võiks ikkagi vaadelda legeerivate elementide mõju kuumutamisele. Igasugune termotöötlus eeldab (võtame faasidiagrammi ette), et me kuumutame üle mingisuguste temperatuuride. Eesmärk on tavaliselt see, et me püüdleme austeniidi alasse, tahaksime, et lähtestruktuur oleks austeniit ja seda siis jahutame aeglaselt või kiirelt ja saame erinevad struktuurid. Kuna me kuumutame austeniidi alasse ja austeniit on samuti teralise struktuuriga austeniit võib olla jämedateralisem (mida suurem temperatuur, seda suurem tera) või peeneteralisem. Sellest tulenevalt, kuidas nad mõjutavad austeniidi tera suurust, jagatakse
(relaksatsioon). Üleminekud toimuvad ainult siis, kui neelduv või emiteeritav energiahulk vastab täpselt energianivoode vahele. E1-E0 või E2-E0 5. Elektromagnetiline spekter 6. Neeldumise ja emissiooni spektrite seos Neeldumise ja emissionni spektrid on seotud nii, et nad esinevad samadel lainepikkustel. Neeldumine esined kui me külmutame gaasi ning ta hakkab valgust absorbeerima. Emissioon toimub kui me kuumutame gaasi ja ta hakkab valgust kiirgama. 7. Kiirgusallikad spektroskoopias Peab olema intensiivne, stabiilne. Lambid, laserid. Pideva spektriga KA-d - kiirgavad laias lainepikkuste vahemikus, milles erinevate lainepikkuste intensiivsused on enam-vähem samad. Näiteks: Vesiniku/deuteeriumi lamp, Volframlamp, Xe lamp. Joonspektriga KA-d - produtseerivad teatud lainepikkustega kiirgust. Näiteks: Gaaslahenduslamp, Hõõglamp, Laser. 8. Kindla lainepikkuse valimine filtrite abil
võrdub seega nulliga, millest tingituna valgumolekulid sadestuvad kergesti lahusest välja. Kui keskkonna pH erineb väga palju pI väärtusest, omandavad kõik molekulid ühesuguse laengu („+“ või „-„ laeng), mistõttu väljasadestumist ei toimu. Töö käik: Kahte katseklaasi valame kummassegi 2 ml munavalgu lahust. Ühte katseklaasi lisame 1 ml kontsentreeritud etaan- e äädikhapet. Mõlemaid katseklaase kuumutame keeval vesivannil. Tulemus: Katseklaasis, kuhu oli lisatud äädikhapet valgu väljasadestumist ei toimunud, teises katseklaasis tekkis sade. 5 Järeldus: Happe lisamine ühte katseklaasi põhjustas pH muutuse, mis erines valgu isoelektrilisest täpist, mistõttu väljasadestumist ei toimunud. 1.1.8 Valkude sadestamine orgaaniliste lahustitega Orgaaniliste lahustite (etanool, atsetoon jt) mõjul toimub valgu dehüdratiseerimine ning
Järelikult on fruktoosi puhul tegemist ketoosiga ja glükoosi puhul aldoosiga. 1.2.7 Tärklise reaktsioon joodiga Tärklistele iseloomulik omadus moodustada joodiga intensiivselt lillakas-siniseid komplekse on tingitud polüsahhariidi ahelate keerdumisest joodi molekuli ümber. Tekkinud kompleks laguned kõrgel temperatuuril ja kaotab värvuse. Töö käik: Katseklaasi valame 4-5 ml tärkliselahust ja lisame tilk joodilahust. Segu loksutatakse ja kuumutame keemiseni. Seejärel katseklaasi alumise poole jahutame jääs. Tulemus: Kuumutamisel intensiivne värv kadus, sest kõrgel temperatuuril kompleksid lagunesid ja toimus pöörduv reaktsioon. Jääs aga jälle taastusid ning värv tuli ka tagasi. Võimalus oli ka vaadata läbi mikroskoobi kartuli ja maisi tärklise proove. Selleks kantakse mikroskoobi alusklaasile kartuli tärklise ja maisi tärklise proovid. Lisatakse 1 tilk lahjendatud joodilahust
või 30g 5. Maitsesta brändiga. Saadud segu pane niisutatud vormis suhkur 50 g sügavkülma. jõhvikad 80g värske tüümian, 6. Kastmeks: sulata või ja lisa suhkur. Kuumuta kuni tekib karamellmass ja lisa purustatud jõhvikad. värske pune must pipar 7. Kuumutame edasi ja lisame vasthakitud värsked kaunistuseks jõhvikad, mis võib kasta maitsetaimed: tüümian ja pune. suhkrusiirupisse ja siis tuhksuhkrusse. 8. Lõpus maitsesta musta pipraga ja soovi korral veel suhkruga. 5.SEENESUFLEE Bruto Neto 1. Puhasta seened ja koori sinul. sampinjonid 44g 40g 2. Prae kooritud peeneks hakitud sibul ning peeneks
(lõppkontsentratsioon 0,05µg/ml) Arvutused: 1,5 0,05× 300 Agaroosi pulber: 300 × =4,5 g EtBr: =0,0015 ml=1,5 µ l 100 10000 , aga meie paneme EtBr 2x rohkem, kuna õppejõud ütles nii. Parem karta kui kahetseda. Töö käik: Lahustame agaroosi pulbri TAE puhvris Kuumutame seda mikrolaineahjus, et kõik pulber lahustuks Jahutame ja seejärel lisame EtBr. Kanname segu geelialusele, kuhu on eelnevalt lisatud hammaste tekkimiseks „kamm“ Jälgida, et mulle ei tekiks ja eemaldada need. Millise % geeli valasime? Miks? Vaatasime lk 32 olemat tabelit nr. 6 ja otsustasime teha 1,5% geeli. Tabel näitab, et see geel sobib DNA’le pikkuses 0,2-3kb ja see on igati sobilik kõigi grupis
Keemiliselt soetud vesi mullas kuulub kas savimineraalide või huumuse koostisse ja see vesi eraldub mullast vaid väga kõrgel temperatuuril mulda kuumutades. Seda vett nimetatakse konstitutsiooniliseks veeks. Kuid vesi võib olla ka mitmesuguste ühendite mineraalide koostises kristallisatsiooniveena. Näiteks kipsi molekulis 21 % vett massist. See keemiliselt seotud vesi ei ole liikuv ja ei ole taimedele kättesaadav. Kui me määrame mulla vee sisaldust siis tavaliselt kuumutame mulda termostaadis 5 kraadi juures. Vee aur mullas - Mullal on võime siduda vett selle kohal olevast õhust. Mida madalam on mulla kohal oleva õhu relatiivne niiskus, seda tugevamini on seal seotud vesi mulla osakeste poolt kinni hoitud. Esimene vee mahutavuse liik on maksimaalne atsortsiooniniiskus, mis määratakse kui mulla kohal oleva õhu relatiivne niiskus on alla 40 %. Mulla osakesed aga on võimelised siduma vett isegi senikaua kuni relatiivne niiskus läheneb sajale
muidu läheb halvasti. See on üks sedasorti kunts, mis aitab ettevõtmise kordaminekule kaasa. Pöialõnga tuleb kedrata kaks pooli, pöiast ülejäänud lõngast saab suka põlvepealse ehk ülemise valge osa kududa. Sukakirjades kasutatakse viit värvi lõnga: valget, lambamusta, madarapunast, potisinist, kollast (lehekolnõ või putkõ-õiõkolnõ) Kollane: putkeõied, kaselehed, paakspuulehed, maarjajää. Kollast annavad ka sibulakoored. Värvimine: Kõigepealt teeme kolletuse: kuumutame vee keema ning valame värvinõusse. Lisame maarjajää: 1 liitrile supilusikatäis maarjajääd (võib olla ka veidi vähem). Segame, lahustame. Paneme puhtaks pestud lõnga ööseks vedelikku likku, vahetevahel segame, et lõng oleks ühtlaselt hapu. Öeldakse, et lõng on kollotusõs.Hommikul keedame vees putkeõisi või paakspuulehti. Lehti korjatakse, kui need on noored (kevadepoole) siis tuleb ilusam värv. Korjan ikka keskmise korvitäie putkeõisi või puulehti, siis panen veega keema.
Sellega DNA ahela paljundamine toimub ekpotentsiaalselt. 2.2 Praktikum – geeli valmimine Esialgu tuleb valida mille kontsentratsiooniga geeli on vaja valmistada. Kuna mul oli tegu lühe DNA lõiguga (335 bp), valisin PCRi produkti detekteerimiseks 1,5% geeli. Geelistavaks aineks on agaroos, mis on pärit vetikatest. Segasime kokku 100 ml 1x TAE puhvrit ja 1,5 g agaroosi. Kuna agaroos ei lahustu hästi, kuumutame segu mikrolaineahis keemiseni (mitte päris keemiseni, et ei keeks üle!) ja vahepael loksutame ringjate liigutusega kuni kõik agaroos on sulanud ja lahus on homogeenne. Pärast jätame segu jahtuma tasakesi 5 loksutades (et ei tarduks ära) ~ 50 C-ni, et
laserkiirt). Kirjutamisel tekitatakse valgust mittepeegeldavaid alasid, mis ei ole süvendid vaid materjali kerge sulatamisega mittepeegeldavaks muudetud piirkonnad, mis laseri poolt ära tuntakse. CD-RW ehk ümberkirjutatava optilise ketta andmekihi pind koosneb erilistest keemilistest komponentidest, mis võivad olenevalt temperatuurist oma olekut korduvalt muuta ja säilitada. Laserikiire abil kuumutatakse materjal teatud temperatuuriini ja seejärel jahutatakse, aine kristalliseerub. Kui kuumutame teise temperatuurini ja jahutame võtab aine mittekristalliseerunud oleku. Kui aine on kristalliseerunud peegeldab ta rohkem valgust. Seega peab korduvkirjutamisel kasutama kahte erinevat laserikiire võimsust. Erineva pöördus viisiga mälud :FILO, FIFO, assotsiatiivmälu, kahe pordiga mälu. ||||||||||| Pinumälu (stack) realiseerimine ja kasutamine protsessoris. Pinumälu (FILO) on mälu, kus viimasena loetakse välja esimesena salvestatud sõna (FilO First In Last Out)
molekulide kineetilisest energiast. Molekulaarse difusiooni liikumapanevaks jõuks on kontsentratsioonide erinevus. Difusioon kulgeb kõige kiiremini gaasides, järgmisena vedelikes, kõige aeglasemalt tahketes ainetes. Looduses on difusioon esindatud nt loomadel imbuvad toitained soolestikust verre või inimestem imbub hapnik mingil määral ka läbi naha organismi. Tootmises: Kui ühe metalli pinda katame teisega. Kroomime terast, siis paneme terase kroomipulbrisse ja kuumutame 1000oc juures. Kroomipulber imbub terase pinnakihti. Või keevitamine. enamikes neis protsessides kasutatakse ka suurt temperatuuri, kuna siis on difusioon kiirem (suurem kin e). Adsorptsioon on süsteemi mingi komponendi isevooluline kogunemine faaside (tahke-gaas, vedelik- gaas) eralduspinnale. Adsorptsioon on pinnanähtus, mille puhul vedeliku või gaasi molekulid kogunevad molekulaarjõudude toimel keha pinnale. Ainet, mida adsorptsiooni käigus eemaldatakse,
Difusiooni intensiivsus sõltub molekulide kineetilisest energiast. Molekulaarse difusiooni liikumapanevaks jõuks on kontsentratsioonide erinevus ehk gradient. Difusioon kulgeb kõige kiiremini gaasides, järgmisena vedelikes, kõige aeglasemalt tahketes ainetes. Difusioon on looduses suht. tähtis. Nt. loomadel imbuvad toitained soolestikust verre või inimestel imbub hapnik läbi naha. Tootmises nt. kui ühe metalli pinda katame teisega. Kroomime terast, siis paneme terase kroomipulbrisse ja kuumutame 1000*C juurde. Kroomipulber imbub terase pinnakihti (difusioon). Või keevitamine. Pmst ühe aine molekulide teise lükkamine difusioon. Enamikes neis protsessides kasutatakse ka suurt temperatuuri kuna siis on difusioon kiirem (molekulide suurem kineetiline energia) Adsorptsioon süsteemi mingi komponendi isevooluline kogunemine faaside (tahke-gaas, vedelik-gaas) eralduspinnale Adsorptsioon on pinnanähtus, mille puhul vedeliku või gaasi molekulid kogunevad
Samuti mõjutab Maa külgetõmbejõud. Loomadel imbuvad toitained soolestikust verre või inimestel imbub hapnik läbi naha. Difusiooni kasutamine tööstuses pulbermetallurgia, ehitusmaterjalide paagutamisel nt punane tellis, osaliselt sulab, osaliselt difundeerub, väikeste detailide tsinkimine trumlis või vibroalusel, päikesepatareide valmistamine, elektroferees. Kui ühe metalli pinda katame teisega. Kroomime terast, siis paneme terase kroomipulbrisse ja kuumutame 1000C juurde. Kroomipulber imbub terase pinnakihti (difusioon). Adsorptsioon on pinnanähtus, mille puhul vedeliku või gaasi molekulid kogunevad molekulaarsidejõudude (van der Waalsi jõudude) toimel tahke keha pinnale. Ainet, mida adsorptsiooni käigus eemaldatakse, nimetatakse adsorbaadiks; ainet või keskkonda, mille piirpinnal adsorptsioon toimub nimetatakse adsorbendiks. Adsorptsiooniisotermid - adsorbeerunud aine hulga sõltuvus tema
mingis tahkes kehas. Selline massi ülekanne on vältimatult seotud difusiooniga s.o. materjali ülekandega, mis põhineb aatomite liikumisel materjalis. Difusiooniga on seotud lisandite viimine materjali, tahkete lahuste teke ja eraldi uute faaside väljasadenemine. Difusiooni nähtuse seletamiseks vaatleme kahte metallitükki, (näit. Cu, Ni) mis on viidud lähedasse kokkupuutesse. Lähteolek on kirjeldatav joonisega 4.3. Kui kuumutame seda metallide paari mingi aeg suhteliselt kõrgetel temperatuuridel (aga madalamal, kui nende metallide sulamistäpid) ja jahutame, siis näeme, et Cu ja Ni osade vahele on tekkinud ala, kus need metallid esinevad koos ja nende mõlema kontsentratsioon muutub mingi kindla seaduspära järgi (joonis 4.4). Tulemus on tõestuseks, et vase aatomid on difundeerunud niklisse ja nikkel on difundeerunud vaske. Sellist protsessi nimetatakse lisandi difusiooniks (s.o. Ni Cu; Cu Ni).