kahjustada tervist või raskendada praegust olukorda. Tänapäeval kasutatavad vähiravi meetodid on: Kirurgiline ravi Kiiritusravi kasvajarakkude hävitamine radioaktiivse kiirguse abil Keemiaravi kasvajarakkude hävitamine valikuliselt neile toimivate rakumürkide abil Allikas: Kasvaja.net Hormoonravi kasvajarakkude kasvu pidurdamine hormoonpreparaatide või nende antagonistide abil Bioloogiline ravi -kasvajarakkude ründamine monoklonaalsete antikehadega Immunoloogiline ravi püütakse tõsta organismi kaitsevõimet ja aktiivsust võitluses kasvajarakkudega. 12 ohumärki Kui kehas on midagi valesti, reageerib keha tavaliselt mitmesuguste vaevustega. Teatud vaevused võivad olla põhjustatud vähist ja sellisel juhul on vaja pöörduda arsti poole. Niisugused vaevused ei pruugi aga alati tähendada vähki haigestumist, sageli on neil muud, enamasti ohutud põhjused.
Hübridoomitehnoloogia ja monoklonaalsed antikehad • Teatud antigeen viiakse hiiresse. • Hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad B-lümfotsüüdid. • B-lümfotsüüdid viiakse kokku kasvajarak- kudega – need on hübridoomid. • Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. • Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monoklonaalsete antikehade Antigeen tootmine Rakud ühen- datakse Kasvajarakud Antikehasid tootvad paljunevad hästi B-lümfotsüüdid http://www3.niaid.nih.gov/ topics/immuneSystem/frontier Monoklonaalsed antikehad Images.htm
edu/potatoes/CSS322WebNotes.html Hübridoomitehnoloogia ja monoklonaalsed antikehad · Teatud antigeen viiakse hiiresse. · Hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad B- lümfotsüüdid. · B-lümfotsüüdid viiakse kokku kasvajarak- kudega need on hübridoomid. · Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. · Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monoklonaalsete antikehade Antigeen tootmine Rakud ühen- datakse Kasvajarakud Antikehasid tootvad paljunevad hästi B-lümfotsüüdid http://www3.niaid.nih.gov/ topics/immuneSystem/frontier Monoklonaalsed antikehad Images.htm
Antikeha e immunoglobuliin (IgG). Vere glükoproteiin, koosnedes kahest lühikesest 23 kD ja kahest pikast 50-75 kD peptiidahelast, mis on seotud omavahel disulfiidsidemetega. Eksisteerivad di- või pentameeridena (IgA või IgM). Antikeha seob antigeeni elektrilise või hüdrofoobse interaktsiooniga, mis on nõrk ning oleneb antikeha ja -geenige kujudest, olles tasakaaluline. Segades sobivas suhtes antigeeni ja antikeha, tekib võreline struktuur, mis sadeneb ja on detekteeritav. Polü- ja monoklonaalsete antikehade valmistamine Polüklonaalne antikeha - pole spetsiifiline Monoklonaalne antikeha - üheainsa lümfotsüüdi toodetud Valmistamine: Loomale süstitakse puhast antigeeni, antigeeni tootev loom peab erinema võimalikult palju antikeha tootvast loomast. Loom hakkab tootma polüklonaalseid antikehi ning monoklonaalne antikeha saadakse, kui katselooma põrnast võetakse üks lümfotsüüt ja seda paljundatakse. Koduse rasedusetesti tööpõhimõte
B- raku rekombineerunud DNA ahela V piirkonda tekitatakse punktmutatsioonid (single nt mutations). Suureneb Ab ja ag vaheline afiinsus (seondumise tugevus). Ensüüm AID (activation induced cytidine deaminase) tekitab mutatsioone. Eelis: tekitab lisa mitmekesisuse CDR3 hüpervariaablis regioonis Puudus: võivad tekkida paardumata nukleotiidid, lugemisraam võib minna katki. 11. Monoklonaalsete antikehade valmistamise põhimõte ja kasutamine teraapias. Milline peaks olema edukas ravim? Monoklonaalne antikeha on antikeha, mis on produtseeritud ühe raku või rakuliini poolt, mis on ühest rakust arenenud. On identsed ja omavad unikaalset aminohappe järjestust, kasvavad identselt. Reageerivad vaid ühe epitoobiga antigeeni molekulis. Hiirt immuniseeritakse antigeeniga, eraldatakse põrnarakud, fuseeritakse müeloomi rakkudega, kasvatatakse HAT söötmel (Aminopteriin blokeerib
Kuld soetakse antkeha külge valguga ning pildil jääb mustana Sorteeriva läbivoolu tsütofluorimeetri tööpõhimõte. Histogramm ja punkt-diagramm analüüs läbivoolu tsütofluorimeetrias. Rakud lastakse üks haaval ja valgustatakse laseriga, on fluorotsentsi detektor ja otsehajumine (suuruse mõõtmine) ja külghajumine (granulaarsust) Histogrammil näha rakkude suurust ja hulka, moodustavad piigid Punkt-diagrammil- flourtsentsi järgi, moodustavad pilved Polüklonaalsete ja monoklonaalsete antikehade erinevus. Monoklonaalsete antikehade saamise meetod ja rakendamine. Polüklonaalsed antikehad saadakse, kui süstitakse looma peptiidi antigeeniga ning seejärel, kui sekundaarne immuunvastus on stimuleeritud, isoleeritakse antikehad tervest seerumist. Seega on polüklonaalsed antikehad heterogeenne segu antikehadest, mis tunnevad ära mitmeid epitoope. Monoklonaalsed antikehad on spetsiifilised üksiku epitoobi suhtes,
piirkondade omavahelist interakteerumist). - Temperatuur. 4. Milliseid rasvu nimetatakse trans-rasvadeks Transrasvadeks nimetatakse mono- või polüküllastamata süsivesinik ahelaid sisaldavaid rasvu. 5. Mis on lateraalne difusioon Molekuli liikumine membraani ühe kihi piires. 6. Mis on hübridoom ja kuidas ning milleks neid tekitatakse Hübridoom on antikehi sünteesiva lümfotsüüdi ja müeloomi raku hübriid, mis luuakse monoklonaalsete antikehade saamiseks. 7. Mida nim membraani sulamistemperatuuriks Temperatuuri, mille juures toimub membraani üleminek korrapärasest geelisarnase struktuuriga faasist mobiilsemasse vedelasse faasi. 8. Millised on valkude membraanidesse kinnitumise viisid? Integraalsed membraanide valgud omavad ühte või mitut segmenti, mis koosnevad hüdrofoobsetest või laenguta aminohapetest ja on sel viisil hüdrofoobete vastasmõjude kaudu (sageli ka täiendavate ioonsete jõudude kaudu)
4.5. Bioloogiline ravi Rinnavähi ravi on kombineeritud ravi. Lisaks kirurgilisele ravile (rinda säilitav lõikus või mastektoomia), kiiritusravile ning traditsioonilisele keemia- ja hormoonravile kasutatakse uue suunana kaugelearenenud rinnavähi ravis bioloogilist e. sihtmärgistatud ravi mis kasutab organismi immuunsüsteemi kasvajarakkude hävitamiseks. (BR 2011) 32 Bioloogilist ravi monoklonaalsete antikehadega, mis on kunstlikult loodud valgud, mis ründavad organismis vähirakke, jättes terved rakud puutumata, kasutatakse konkreetse HER2 geeni defektiga patsientide grupile. Selle geeni muutuse tulemusena tekkinud vähivorm on agressiivsema kuluga ja allub halvemini tavapärasele ravile. Häid tulemusi on saadud bioloogilise ravi kombineerimisel keemiaraviga. See pikendab oluliselt haigete elulemust, parandab ravitulemust elukvaliteeti säilitades ning vähendab haiguse taastekke riski
Peale sorteerimist saab eraldatud rakku kasvatada kultuuris. FACS-i kasutatakse tavaliselt, et puhastada erinevat tüüpi valgeid vererakke, millest igaüks kannab oma pinnal üht või enamat eristuvad valku ja seetõttu seob monoklonaalseid antikehasid, mis on sellele spetsiifiliselt. Ainult T rakud immuunnsüsteemis omavad nii CD3 kui ka Thyl2 valke. Nende olemasolu muudab T-rakud teistest vererakkudest või põrnarakkudest kergesti eristatavaks. Varieerides monoklonaalsete antikehade kasutamist rakkude eristamisel, kaetakse väikesed magnetilised tilgad 54 monoklonaalsete antikehadega, mis on spetsiifilised pinnavalkudele nagu CD3 ja Thyl 2. Nii kinnituvad sinna ainult need rakud, millel on mõlemad valgud olemas ja neid saab taastada ettevalmistamisest adhesiooniga väikesele magnetile katseklaasi küljel.
taimele. Diferentseerunud loomarakust pole võimalik mitte mingil tingimusel regenereerida uut terviklikku organismi, taimeraku puhul on see aga võimalik. 31. Valik rakubioloogia meetoditest. Valgusmikroskoopia eri liigid (faaskontrast-, interferents-, tumeväli-, fluorestsents-, dekonvulsiooni- ja konfokaalmikroskoopia). FRET meetod. Flourestseeruvad valgud. Läbivoolu tsütofluorimeetria põhimõte ja kasutusvõimalused. Polü- ja monoklonaalsete antikehade saamise põhimõte ning nende kasutamine teaduslikus uurimistöös ja meditsiinis. Lektiinide kasutamine rakubioloogias.
Diferentseerunud loomarakust pole võimalik mitte mingil tingimusel regenereerida uut terviklikku organismi, taimeraku puhul on see aga võimalik. 31. Valik rakubioloogia meetoditest. Valgusmikroskoopia eri liigid (faaskontrast-, interferents-, tumeväli-, fluorestsents-, dekonvulsiooni- ja konfokaalmikroskoopia). FRET meetod. Flourestseeruvad valgud. Läbivoolu tsütofluorimeetria põhimõte ja kasutusvõimalused. Polü- ja monoklonaalsete antikehade saamise põhimõte ning nende kasutamine teaduslikus uurimistöös ja meditsiinis. Lektiinide kasutamine rakubioloogias.
taktikat. 4. Diagnostilised kriteeriumid, uuringud 4.1. Ebaselge tähendusega monoklonaalne gammopaatia (MGUS) Ebaselge tähendusega monoklonaalne gammopaatia (monoclonal gammopathy of unknown significance) – monoklonaalse valgu (M-komponendi) esinemine pat- siendil, kellel ei saa diagnoosida hulgimüeloomi, makroglobulineemiat, amüloidoosi või lümfoproliferatiivset haigust Monoklonaalsete gammopaatiate sagedus tõuseb seoses eaga: >25 aastastel 1%-l, >70 aastastel 3%-l, >80 aastastel 10%-l, >90 aastastel 14%-l Ravi ei vaja; patsiente jälgitakse esialgu 3 kuulise vahega, et kindlaks teha, kas M- -5- komponent püsib stabiilsel tasemel; kui selle suurenemist ei esine, kontroll 6-12 kuu järel Kulg: 25%-l haigus progresseerub ja areneb hulgimüeloom, makroglobulineemia,
kui toksiine. Antigeeni määramise sensitiivsus on 97,6% ja spetsiifilisus 87,0%, toksiinide määramise sensitiivsus ja spetsiifilisus üle 99%. Antigeeni detekteerimisel kasutatakse immuunmeetodit kõikidele C. difficile tüvedele ühise antigeeni glutamaadi hüdrogenaasi (GDH) vastaste antikehadega. Test ei erista toksilisi ja mittetoksilisi C. difficile tüvesid. Toksiini määramiseks on kasutusel immuunmeetod (kommertsiaalne kitt) monoklonaalsete toksiin A ja B vastaste antikehadega. 35 Mittespetsiifiline anaeroobne infektsioon HAIGUSTEKITAJAD. Bacteroides spp., Porphyromonas spp., Fusobacterium spp., Prevotella spp., Peptococcus spp., Peptostreptococcus spp. jne. UURITAV MATERJAL. Sõltuvalt haigusprotsessi lokalisatsioonist kas mäda, haavaeritis, pleura- ja peritoneumipunktaat, veri vm. DIAGNOSTIKA. Algmaterjali mikroskoopiline uurimine on orienteeruva tähendusega.
Immunoregulatsiooni häired Th2 tsütokiinide suurema produktsiooni suureneb vastuvõtlikkus rakusisestele infektsioonidele Luuüdi: Luuüdis täheldatakse CD5+ B-lümfotsüütide hulga suurenemist, mis tingib: IgM tüüpi antikehade ning madala afiinsuse ja reaktsioonivõimega antikehade tekke Mitmesuguste autoantikehade tekke Põhjuseks B-rakkude küpsemise häired (ka klonaalne B-rakkude ekspansioon monoklonaalsete immunoglobuliinide teke) Samuti: NK-rakkude hulk ja funktsionaalne aktiivsus suureneb, et kompenseerida T-rakkude puudulikkust. TNFa, IL-6 ja IL-1 produktsiooni suurenemine: madaldab organismis põletikuliste protsesside tekke läve muudab põletikulised protsessid raskekujulisemaks Lisaks: antikehade produktsiooni erinevused vanuritel Kõrgesse vanusesse jõudnutel väga efektiivne immuunsüsteem.
Tsütohalasiin B on mikrofilamentide moodustumist takistav ühend. See ühend seetõttu takistab tsütokineesi. Meetodid rakubioloogias Milliseid geenitehnoloogilisi meetodeid kasutatakse valgu lokalisatsiooni muutuse jälgimiseks elusas rakus? Valk märgistatakse fluorestseeruva aminohappe järjestusega, mida valk endaga kaasas veab ja mida on fluorestsentsmikroskoobis näha. Kuidas toimite, kui tahate näha ühe spetsiifilise valgu lokalisatsiooni rakus? Monoklonaalsete antikehade kasutamine. Mille poolest erineb uuritavast objektist tavalise fluorestsentsmikroskoobi abil saadav kujutis konfokaalse fluorestsentsmikroskoobi abil saadavast kujutisest? Võimaldab kõrgkvaliteedilist kujutist ka suhteliselt paksust koematerjalist, ei ole vaja teha üliõhukesi lõike. Kujutis tekib ainult sellest tasapinnast, mis on fookuses. Fookusest väljas olevad piirkonnad jäävad mustaks, neid ei näe
entroopiliste faktoritega, st kontsentratsioonide erinevustega kahel pool membraani. (joonised!) Difusioon- toimub kontsentratsiooni alanemise suunas, kiirus on võrdeline gradiendi suurusega ning sõltub konkreetse molekuli omadustest (steroidid, hapnik, vesi...) 6. Mis on hübridoom ja kuidas ning milleks neid tekitatakse: Hübridoom on rakuliin, mis on saadud antikehasid tootva B-lümfotsüüdi ja lümfotsütaarsest kasvajast pärineva raku ühendamisel. Kasutatakse monoklonaalsete antikehade tootmiseks. 7. Mida nim membraani sulamistemperatuuriks: Liposoomide lahuse kuumutamisel membraanid lähevad hästi korrapärase geelisarnase struktuuri faasist üle mobiilsemasse vedelasse faasi. Seda nähtust nim faaside üleminekuks. Mida lühema ahelaga ja vähem küllastunud on lipiidid, seda madalamal temperatuuril üleminek toimub. See on tingitud sellest, et geeli struktuur tagatakse põhiliselt van der Waalsi jõududega, mis lühemate ahelate puhul on väiksemad