Surrogaat e asendusema [ kloonlammas Dolly-geneetiliselt identne tuumadoonoriga]. HÜBRIDOOMITEHNOLOOGIA:..somaatiliste rakkude hübriidimise meetod monakloonsete antikehade tootmiseks. 1)Hiir immuniseeritakse mingi antigeeniga.2)Kahe nädala pärast eraldatakse hiire põrnast lümfotsüüdid,millest osa toodab vastavat antikeha.Need rakud ei suuda väljaspool organismi kaua elada.3)Lümfotsüüdid ja kasvajarakud pannakse segusse,mis stimuleerib nende ühinemist. Rakkude ühinemisel tekivad hübridoomid.4)Rakud viiakse selektiivsöötmele, milles jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid.5) Hübridoomid kloonitakse lahjendusmeetodil.Minikannudes kasvavaid kloone testitakse vajaliku antikeha sünteesi suhtes. 6)Valitud kloone kasvatatakse antikehade tootmiseks elusorganismis või kunslikes tingimustes. 7)Antikehad eraldatakse kasvukeskkonnast. Antiseerum-vereseerum,mis sisaldab organismi toodetud antikehade segu kas ühe või mitme antigeeni vastu.
saamiseks (orhidee), hävimisohus taimeliikide kaitseks, kartulid, maasikad, viljapuud, pohlad, nelgi d jne. Meristeempaljundamine: meristeemrakkude võtmine, rakud pannakse kasvama kasvusöötmele, rakkudest kujunenud võrse, võrsed üksikuna toitelahusesse, istikud istututatakse. Hübridoomtehnoloogia: teatud antigeen viiakse hiiresse, hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad B-lümfotsüüdid, B-l viiakse kokku kasvajarakkudega need on hübridoomid, selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid, nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monokloonsete antikehade kasut: antigeenide määramine, teatud valkude puhtaks eraldamiseks, haiguste avastamiseks, rasedustestis.
Hübridoom- antikeha sünteesitava lümfotsüüdi ja müeloomiraku hübriid; luuakse monokloonse antikeha saamiseks. Monokloone antikeha- kitsa antigeenispetsiifikaga antikeha, mida produtseerib kindel hübridoomikloon. Hübridoomide saamine: 1)Hiir immuniseeritakse mingi antigeeniga 2)Kahe nädala pärast eraldatakse hiire põrnast lümfotsüüdid 3)Lümfotsüüdid ja kasvuaja rakud pannakse segusse, mis stimuleerib nende ühinemist. Rakkude ühinemisel teikivad hübridoomid 4)Rakud viiakse selektiivsöötmele, milles jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid 5)Hübridoomid kloonitakse lahjendusmeetodil 6)Valitud kloone kasvatatakse antikehade tootmiseks elusorganismis või kunstlikes tingimustes 7)Antikehad eraldatakse kasvukeskkonnast. Hübridoomi omadus on et aktiveeritud lümfotsüüdist pärineb võime toota antikeha kasutatud antigeeni vastu ja müeloomist tuleneb kasvajarakule omane piiramatu jagunemise võime.
KLOONIMINE GENEETILISELT IDENTSE JÄRGLASKONNA SAAMINE PALJUNDATAVAST ÜKSIKOBJEKTIST (DNA MOLEKUL RAKK, ORGANISM). KLOON GENEETILISELT IDENTNE JÄRGLASKOND. MERISTEEMPALJUNDUS MERISTEEMIRAKKUDE KASUTAMINE VEGETATIIVSETE JÄRGLASTE SAAMISEKS. MERISTEEM TAIMEDE ALGKUDE. TOTIPOTENTSUS RAKKUDE VÕIME MUUTUDA MIS TAHES TÜÜPI ORGANISMIOMASTEKS RAKKUDEKS JA ARENEDA TERVIKORGANISMIKS. MERISTEEMPALJUNDUSE KASUTAMINE: 1) RASKESTI PALJUNDATAVATE TAIMEDE (ORHIDEED, VILJAPUUD) ISTUTUSMATERJALI KIIRE TOOTMINE; 2) VIIRUSVABADE TAIMEDE TOOTMINE, MISTÕTTU TAIMED ON JÕULISEMA KASUVGA, ÕITSEVAD LOPSAKAMALT JA ANNAVAD RIKKALIKUMAT SAAKI; 3) LOODUSKAITSES HÄVIMISOHUS TAIMELIIKIDE KAITSMINE. HÜBRIDOOMITEHNOLOOGIA LEITUTATI MONOKLOONSETE ANTIKEHADE TOOTMISEKS. 1) ANTIGEENIGA IMMUNISEERITUD IMETAJA PÕRGNAST ERALDATUD LÜMFOTSÜÜDID VIIAKSE KOKKU IMETAJA KASVAJARAKKUDEGA LAHUSES, MIS STIMULEERIB RAKKUDE ÜHINEMIST. TEKIVAD HÜBRIDOOMID. RAKKUDE LAHJENDATUD ...
meristeemrakud on viirusevabad ja jõulisema kasvuga, õitsevad osa toodab vastavat antikeha. Need rakud ei suuda väljaspool organismi kaua lopsakamalt ja annavad rikkalikumat saaki. Kasutatakse ka looduskaitses elada. Lümfotsüüdid ja kasvajarakud pannakse segusse, mis stimuleerib nende hävimisohus taimeliikide kaitses. Hübridoomitehnoloogia: Hiir ühinemist. Rakkude ühinemisel tekivad hübridoomid. Rakud viiakse immuniseeritakse mingi antigeeniga. Kahe nädala pärast eraldatakse hiire selektiivsöötmele, milles jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. põrnast lümfotsüüdid, millest osa toodab vastavat antikeha. Need rakud ei Hübridoomid kloonitakse lahjendusmeetodil. Minikannudes kasvavaid kloone testitakse vajaliku antikeha sünteesi suhtes. Valitud kloone kasvatatakse
Hübrodoomitehnoloogia ja monokloonsed antikehad Eri liikide, näiteks inimese ja hiire rakkude ühendamine ehk somaatiliste rakkude hübriidimise meetod. · Hiir immuniseeritakse mingi antigeeniga · Kahe nädala pärast eraldatakse hiire põrnast lümfotsüüdid, millest osa toodab vastavat antikeha. Need rakud ei suuda kaua väljaspool organismi elada · Lümfotsüüdid ja kasvajarakud pannakse segusse, mis stimuleerib nende ühinemist. Rakkude ühinemisel tekivad hübridoomid · Rakud viiakse selektiivsöötmele, milles jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid · Hübridoomid kloonitakse lahjendusmeetodil. Minikannudes kasvavaid kloone testitakse vajaliku antikeha sünteesi suhtes. · Valitud kloone kasvatatakse antikehade tootmiseks elusorganismis või kunstlikes tingimustes · Antikehad eraldatakse ksavukeskkonnast Lümfotsüüdid- vere leukotsüütide (valgeliblede) hulka kuuluvad rakud.
Samuti on see hea meetod hävimisohus taimeliikide isotootmiseks ja kaitseks. Meristeem kuda on algkude/on taimedel võrd-sete tippudes, pungades. Meristeemkoed on totipotentsed, rakud paljunevad kiiresti, jagunemisvõimalised, viirustevabad.Meristeemirakud on säilitanud jagunemisvõime ja neist võivad tekkida pisikudede rakud. Sobivates tingimustes võivad meristeemirakud panna aluse kogu taime arengule. St, et väikestest koetõkist võib kasvada terviklik taim.Hübridoomid-antikehad sünteesivad lümfotsüüdi ja müeloomiraku hübriidi. Hürbidoome saadakse. Kui lümfotsüüdid viiakse kokku müeloomi rakkudega lahuses, mis stimuleerib rakkude ühinemist. Hübridoomtehnoloogia loodi monokloonsete antikehade tootmiseks. See lahendas sellised probleemid nagu paljude haiguste, raseduse tuvastamine. Samuti võimaldas ravi nii nakkus- haiguste kui vähi puhul. Monokloonsed antikehad erinevad tavaliselt antiseerumid spetsiifiliste omaduste poolt
Kasulikkus:1)viirusvabad istikud-suurem saagikus, 2)võimalik saada suur kogus istikuid korraga, 3)hävimisohus liikide kaitse-populatsiooni taastamine Hübridoomitehnoloogia somaatiliste rakkude hübriidimise meetod monokloonsete antikehade tootmiseks Etapid: 1)hiir immuniseeritakse antigeeniga, 2)hiire põrnast eraldatakse lümfotsüüdid, millest osa toodab antikehi, 3)hübridoomide tekkimine, 4)rakud viiakse selektiivsöötmele, milles jäävad ellu ainult hübridoomid, 5)hübridoomid kloonitakse lahjendusmeetodil, 6)valitud kloone kasvatatakse antikehade tootmiseks elusorganismis, 7)antikehad eraldatakse kasvukeskkonnast Kasutamine:1)haigustekitajate tuvastamiseks, 2)rasedustestid, 3)inimeste vähiravi Embrüosiirdamine - seisneb arengu algusjärgus oleva embrüo ülekandes indleva emaslooma või rasestumisvalmis naise emakasse Embrüosiirdamine põllumajandusloomadel: 1)Lehmal kutsutakse esile superovulatsioon (korraga küpseb 5-10 munarakku)
Neid saab kasutada mingi koe kahjustumise korral uue koe ,,ehitamiseks". Milles seisneb kloonimise erinevus looduses ja biotehnoloogias ? Looduses tekivad kloonid vegetatiivsel paljunemisel. Biotehnoloogias kasutatakse meristeempaljundust alkgoe kasutamine, suure arvu viirusvabade vegetatiivsete järglaste saamiseks. Millistele bioloogilistele nähtustele tuginedes sai võimalikuks meristeempaljundus ? Meristeemrakud on totipotentsed ehk arenguliselt täisvõimelised. Mis on hübridoomid ning kuidas neid saadakse ? Hübridoom on B-lümfotsüüdi ja kasvajaraku hübriid, mis toodab monokloonseid antikehi. Hiir immuniseeritakse mingi antigeeniga ning kahe nädala pärast eraldatakse tema põrnast B- lümfotsüüdid, millest osad muutuvad plasmarakkudeks, mis toodavad antikehi selle kindla antigeeni vastu. Kuna B-lümfotsüüdid pole võimelised ise paljunema või väljaspool organismi kaua elama, pannakse need kasvajarakkudega ühisesse segusse, mis soodustab nende ühinemist
VILJASTAMINE IN VITRO munarakk eraldatakse munajuhast või otse munasarjast ja viljastatakse kehaväliselt, EMBRÜOSIIRDAMINE seisneb arengu algusjärgus oleva ebrüo ülekandes indleva emaslooma või rasestumisvalmis naise emakasse. Hübridoomitehnoloogia põhimõte Kahe erineva organismi rakkude ühendamine Monokloonsete antikehade tootmine ja kasutamine. TOOTMINE: *Antikehi tootvad B-lümfotsüüdid ühendatakse kasvajarakkudega tekivad hübridoomid. *Rakke kasvatatakse söötmel. *Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. *Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest KASUTAMINE: *Teatud kindla aine olemasolu tuvastamisel mingis keerulises bioloogilises segus. *Vastava antigeeni esinemise ja kontsentratsiooni määramiseks rakus. *Meditsiiniliseks ja veterinaarseks diagnostikaks (nt rasedustestid)
· Hübridoom on antikeha sünteesiva lümfotsüüdi ja müeloomirau (kasvajaraku) hübriid · HÜBRIDOOM= LÜMFOTSÜÜT + KASVAJARAKK o Lümfotsüüdid ei ole võimelised jagunema ja väljaspool organismi eksisteerima o Toodavad antikeha kasutatud antigeeni vastu o Kasvajarakk on piiramatu jagunemisvõimega · Hübridoomide tootmine o Hübridoomirakud viiakse selektiivsöötmele, milles jäävad ellu ja kasvavad ainult hübridoomid (Laboris) o Hübridoomide kloonimine o Hübridoom produtseerib ainult üht tüüpi antikehi monokloonsed antikehad · Monokloonseid antikehi kasutatakse: o Teatud kindla aine olemasolu tuvastamisel mingis keerulises bioloogilises segus (nt vereseerumis, uriinis) o Vastava antigeeni esinemise ja kontsentratsiooni määramiseks rakus (nt düstrofiini tuvastamiseks inimese lihasrakus)
VILJASTAMINE IN VITRO munarakk eraldatakse munajuhast või otse munasarjast ja viljastatakse kehaväliselt, EMBRÜOSIIRDAMINE seisneb arengu algusjärgus oleva ebrüo ülekandes indleva emaslooma või rasestumisvalmis naise emakasse. Hübridoomitehnoloogia põhimõte Kahe erineva organismi rakkude ühendamine Monokloonsete antikehade tootmine ja kasutamine. TOOTMINE: *Antikehi tootvad B-lümfotsüüdid ühendatakse kasvajarakkudega tekivad hübridoomid. *Rakke kasvatatakse söötmel. *Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. *Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest KASUTAMINE: *Teatud kindla aine olemasolu tuvastamisel mingis keerulises bioloogilises segus. *Vastava antigeeni esinemise ja kontsentratsiooni määramiseks rakus. *Meditsiiniliseks ja veterinaarseks diagnostikaks (nt rasedustestid)
Kloonimine on geneetiliselt identsete järglaste saamine, Ka vegetatiivne paljunemine on kloonimine. Meristeempaljundus on uuem meetod: Meristeemrakud on diferentseerumata ja paljunemisvõimelised. Nad on totipotentsed "kõikvõimelised". Hübridoomitehnoloogia ja monoklonaalsed antikehad Teatud antigeen viiakse hiiresse. Hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad Blümfotsüüdid. B-lümfotsüüdid viiakse kokku kasvajarak- kudega need on hübridoomid. Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monoklonaalseid antikehi kasutatakse: Antigeenide määramiseks Teatud valkude puhtaks eraldamiseks Haiguste avastamiseks Rasedustestis. Testjoon värvub ainult siis, kui proov sisaldab kooriongonadotropiini. Ka meditsiin kasutab biotehnoloogiat juba terve sajandi
Kloonimine on geneetiliselt identsete järglaste saamine, Ka vegetatiivne paljunemine on kloonimine. Meristeempaljundus on uuem meetod: Meristeemrakud on diferentseerumata ja paljunemisvõimelised. Nad on totipotentsed – “kõikvõimelised”. Hübridoomitehnoloogia ja monoklonaalsed antikehad • Teatud antigeen viiakse hiiresse. • Hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad B-lümfotsüüdid. • B-lümfotsüüdid viiakse kokku kasvajarak- kudega – need on hübridoomid. • Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. • Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monoklonaalsete antikehade Antigeen tootmine Rakud ühen- datakse Kasvajarakud Antikehasid tootvad paljunevad hästi B-lümfotsüüdid
rikkalikumat saaki. Lisaks saab selle abil ka raskesti paljundatavate taimede istutusmaterjali kiiremini ( nt orhideed, viljapuud ). Sel viisil saab kaitsta ka hävimisohus taimeliike. 9. Millega peab arvestama, kui ostad ja soovid istutada meristeemselt paljundatud taimi? Ostad: * kallim * tuleb kontrollida müüjat * teine paljundus on ka kasutamiskõlblik Istutad: * tuleb kasutada vahekultuuri teisest sugukonnas, nt teravili koos kartuliga * ei tohi istutada vana põllu serva 10. Mis on hübridoomid ja kuidas neid saadakse? Milline roll on hübridoomi loomises kasvajarakul? Hübridoom antikeha sünteesiva lümfotsüüdi ja müeloomiraku (kasvajarakk) hübriid; toodetakse hübridoomitehnoloogiaga; luuakse monokloonse antikeha saamiseks. 11. Millised probleemid lahendas hübridoomitehnoloogia loomine. (Milleks kasutatakse monokloonseid antikehi?) Monokloonsed antikehad on spetsiifiliste omadustega antikehad, mida saab
Milles see tehnoloogia seisneb ja kuidas kasutatakse? (meristeempaljundus, embrüosiirdamine, rakuteraapia, tüvirakud, kloonimine) Taimede meristeempaljundus- taime algkoest kasvatatakse uusi taimi. Kasutatakse, et kiiresti toota taimi ning aretada viirusvabasid taimi (jõulisema kasvuga, lopsakamad, rikkalikuma saagiga) Hübridoomitehnoloogia- antikehade kiire tootmine (kasvajarakud ja lümfotsüüdid(mis ei paljune pmst) viiakse kokku, tulemuseks hübridoomid kiiresti paljunevad antikehi kandvad lümfotsüüdid) Nt rasedustestid, antiseerumid Embrüosiirdamine- embrüo viimine surrogaatemasse, e kunstlik seemendamine. Nt tõupullide aretamine in vitro viljastamine-katseklaasiviljastamine. Geneetiliselt väärtuslikelt loomadelt paljude järglaste saamine; hõlbus transport Rakuteraapia- ravimeetod, mille puhul organismi härvinud rakke vüi organite kahjustunud funktsioone taastatakse tüvirakkude siirdamisega
Rakendusbioloogia seisneb bioloogia haruteaduste järglaskonna saamist paljundatavast poolt avastatu praktilise kasutamise võimaluste ja üksikobjektist, olgu selleks objektiks DNA lahenduste uurimises ja teostamises. molekul, rakk või organism. Saadud järglaskond 3.Biotehnoloogia, bioonika, küberneetika moodustab klooni. Biotehnoloogiaks nimetatakse 8.Hübridoomitehnoloogia, hübridoomid, rakendusbioloogilisi meetodeid ja protseduure, monokloonsed antikehad mille puhul elusorganismidele omaseid protsesse Hübridoomitehnoloogia - Rakutehnoloogiliste kasutatakse tehnilistes seadmetes mitmesuguste võtete kogum hübridoomide loomiseks ainete tootmiseks ning organismide sigimise ja immuniseerimine, rakkude liitmine ja kloonimine; pärilikkuse muutmiseks. Viimastel aastakümnetel immunoloogiline testimine ja monokloonsete
Kasvukuhikust võetakse mõned rakud, pannakse söötmesse (steriilselt). Ühest meristeemist võib saada sadu võrseid. Saadakse viirusvabasid taimi: kartul, maasikas, nelk, krüsanteem. http://oregonstate.edu/potatoes/CSS322WebNotes.html Hübridoomitehnoloogia ja monoklonaalsed antikehad · Teatud antigeen viiakse hiiresse. · Hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad B- lümfotsüüdid. · B-lümfotsüüdid viiakse kokku kasvajarak- kudega need on hübridoomid. · Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. · Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monoklonaalsete antikehade Antigeen tootmine Rakud ühen- datakse Kasvajarakud Antikehasid tootvad paljunevad hästi B-lümfotsüüdid
Tehnoloogiliselt keerukama kloonimisviisina on loodud meriteempaljundus. Meriteempaljunduse positiivne külg: raskesti paljundatavate taimede paljundamine (orhideed), Kiire taimede hulga suurenemine, meristeemrakud on viirustevabad, hävimisohus olevate taimede paljundamine. 5. Hübridoomi loomine-somaatiliste rakkude hübriidimise meetod võimaldab eritüübiliste rakkude ühendamist. Antikehi tootvad B-lümfotsüüdid ühendatakse kasvajarakkudega-tekivad hübridoomid. Valitud rakke saab kasvatada katseklaasis või elusorganismis. Näiteks: luuakse monokloonse antikeha saamiseks. 6. Monokloonsed antikehad-kitsa antigeenispetsiifikaga antikeha, mida produtseerib kindel hübridoomikloon. Monokloonseid antikehi kasutatakse teatud kindla aine olemasolu tuvastamisel mingis keerulises bioloogilises segus (nt. Vereseerumis) ja meditsiiniliseks või veterinaarseks diagnostikaks (nt. Rasedustestid, viiruste,
Nad on jõulisema kasvuga, õitsevad lopsakamalt ja annavad rikkalikumalt saaki. Hübridoomitehnoloogia ja monokloonsed antikehad Hübridoom rakkude hübriidid. Kasvajarakud. Antikeha sünteesiva lümfotsüüdid ja müeloomiraku hübriid. Luuakse monokloonse antikeha saamiseks. Hübridoomitehnoloogia somaatiliste rakkude hübriidimise meetod, mis võimaldab eri liikide rakkude ühendamist. Antikehi tootvad B-lümfotsüüdid ühendatakse kasvajarakkudega tekivad hübridoomid. Monokloone antikeha kitsa antigeenispetsiifikaga antikeha, mida produtseerib kindel hübridoomikloon. Toodab üht tüüpi antikehi. Liidetakse 2 rakku. Tavalisel antiseerumil puudub paljunemisvõime. Antikehi rohkem ning ei saa kasutada konkreetselt ühe antigeeni vastu. Monokloonseid antikehi kasutatakse 1) vastava antigeeni määramiseks,2) teatud valkude puhastamiseks, 3) haiguste avastamisesks, 4) rasedustestis. 1.Hübridoom rakkude hübriid
1)võsu kasvukuhikust võetakse koetükid ning pannakse esmalt kasvusöötmele (toitesegu) 2)meristeemirakkudest hakkab kasvama uus võrse. 3)mikrovõrsed viiakse seejärel juurdumissöötmele, mis stimuleerib juurte kasvu. 4)juurdumissöötmel kasvatatakse taimi seni, kuni neist on arenenud istutusvalmid istikud. Somaatiliste rakkude hübriidimise meetod võimaldab eri liikide rakkude ühendamist. Antikehi tootvad B-lümfotsüüdid ühendatakse kasvajarakkudega ja tekivad hübridoomid. Rakke kasvatatakse söötmel. Hübridoomitehnoloogia-somaatiliste rakkude hübriidimise meetod monokloonsete antikehade tootmiseks. Hübridoom toodab antikehi kasutatud antigeeni vastu ja suudab piiramatult paljuneda. Hübridoomkloon toodab ainult üht tüüpi antikehi (monokloonsed antikehad), neid võib pikka aega säilitada. Võimalik saada antikehi suures koguses, piiramatu jagunemise võime. Lümfotsüüt- vere valgeliblede hulka kuuluv rakk
On identsed ja omavad unikaalset aminohappe järjestust, kasvavad identselt. Reageerivad vaid ühe epitoobiga antigeeni molekulis. Homogeenset antikehade populatsiooni on võimalik saada B lümfotsüütide liitmisel kasvajarakkudega. Saadud rakuliine kutsutakse hübridoomideks . Monoklonaalsed antikehad tekivad kui ühendada B-lümfotsüüdid kasvajarakkudega, need on hübridoomid. Selektiivsöötmel jäävad ellu ainult hübridoomid. Nüüd on puhas kultuur ühte tüüpi antikehi tootavatest, hästi paljunevatest rakkudest. Mis on roheline fluorestseeruv valk, milleks ja kuidas seda kasutatakse? See on meduusist saaadud geen, mis floresseerub rohelises vahemikus ja mis teise valguga liitudes seda ei mõjuta, kuid näitab meile kus see valk ekspresseerub. Millised on objektide detektsiooni piirid valgusmikroskoopias, millised elektronmikroskoopias
heterosügootne, siis saame ühesugused geno- kui ka fenotüübiilised lahknemissuhted (1:1). 56. Mis on hübridoomi meetod ning milleks seda kasutatakse? Detailsed kirjeldused. Töötati välja 1975. Selleks liitsid teadlased hiire kasvajalised müeloomirakud (B rakuline kasvaja), millel on võime piiramatult jaguneda, immuniseeritud hiire põrnarakkudega, mille hulgas on immuniseerimisel kasutatud antigeeni vastaseid antikehi tootvad B rakud. Ainult tekkinud hübriidsed rakud e. hübridoomid suudavad kasvada selektiivsel söötmel ning neil säilivad vanemrakkude kasulikud omadused võime piiramatult jaguneda ja samas toota kindlate omaduste ja spetsiifilisusega antikehi ehk monokloonseid antikehi. Soovitud spetsiifikaga antikehi produtseerivad hübridoomide kloonid on võimalik isoleerida ning kasvatada rakukultuuris antikehade tootmiseks. Kasutatakse haiguste raviks, kuid ei olnud eriti edukas, sest esiteks ei käivitanud hiire antikehad inimese
*embrüokultuur *füsioloogiliselt aktiivsete ainete kasutamine *vaheliikide kasutamine *vegetatiivne lähendamine *tolmendamine tolmuseguga *ploidsuse võrdsustamine *mitmekordne tolmendamine 77. Somaatiline hübridiseerimine- paraseksuaalne protsess, kus omavahel liituvad keharakud. Paraseksuaalne- rakud pole indutseeritavad. Eelised:*liituvad tsütoplasmad *kokku on võimalik viia kaugemaid taksonoomilisi üxusi Tsübriid- somaatiline hübriid. Hübridiseerimist tähistataxe(X). Hübridoomid 78. Resistentsusgeneetika- uurib haiguste resistentsuse sõltuvust pärilikest teguritest taimedel. Loomsetel organismidel tekib immuunsus ontogeneesi vältel Haigustekitajad: seenhaigused, viirused, bakterid, parasiteeruvad õistaimedel, putukakahjurid. Resistentsuse tüübid- *vertikaalne e spetsiifiline- ühe kindla patogeeni rassi suhtes, on determineeritud ühe dominantse geeni kohta *horisontaalne e üldine- paljude rasside suhtes determineeritaxe
*embrüokultuur *füsioloogiliselt aktiivsete ainete kasutamine *vaheliikide kasutamine *vegetatiivne lähendamine *tolmendamine tolmuseguga *ploidsuse võrdsustamine *mitmekordne tolmendamine 77. Somaatiline hübridiseerimine- paraseksuaalne protsess, kus omavahel liituvad keharakud. Paraseksuaalne- rakud pole indutseeritavad. Eelised:*liituvad tsütoplasmad *kokku on võimalik viia kaugemaid taksonoomilisi üxusi Tsübriid- somaatiline hübriid. Hübridiseerimist tähistataxe(X). Hübridoomid 78. Resistentsusgeneetika- uurib haiguste resistentsuse sõltuvust pärilikest teguritest taimedel. Loomsetel organismidel tekib immuunsus ontogeneesi vältel Haigustekitajad: seenhaigused, viirused, bakterid, parasiteeruvad õistaimedel, putukakahjurid. Resistentsuse tüübid- *vertikaalne e spetsiifiline- ühe kindla patogeeni rassi suhtes, on determineeritud ühe dominantse geeni kohta *horisontaalne e üldine- paljude rasside suhtes determineeritaxe polügeenselt.
Saab ühendada kahe erineva rakutüübi omadusi Hübridoomitehnoloogia- somaatiliste rakkude hübriidimise meetod monokloonsete antikehade tootmiseks. 1.Hiir immuniseeritakse mingi antigeeniga. 2. Kahe nädala pärast eraldatakse hiire põrnast lümfotsüüdid, millest osa toodab vastavat antikeha. Need rakud ei suuda väljaspool organismi kaua elada 3. Lümfotsüüdid ja kasvajarakud pannakse segusse, mis stimuleerib nende ühinemist. Rakkude ühinemisel tekivad hübridoomid (lümfotsüüdid+piiramatu paljunemisvõimega kasvajarakud). 4. Rakud viiakse selektiivsöötmele, milles jäävad ellu ja 42 paljunevad ainult hübridoomid 5. Hübridoomid kloonitakse lahjendusmeetodil. Minikannudes kasvavaid kloone testitakse vajaliku antikeha sünteesi suhtes 6. Valitud kloone kasvatatakse antikehade tootmiseks elusorganismis või kunstlikes tingimustes. 7. Antikehad eraldatakse
On identsed ja omavad unikaalset aminohappe järjestust, kasvavad identselt. Reageerivad vaid ühe epitoobiga antigeeni molekulis. Hiirt immuniseeritakse antigeeniga, eraldatakse põrnarakud, fuseeritakse müeloomi rakkudega, kasvatatakse HAT söötmel (Aminopteriin blokeerib nukleotiidide sünteesi põhiraja ning HGPRT defekti tõttu ei saa müeloomirakud kasutada alternatiivseid substraate ja surevad, vanuse tõttu hukkuvad ka põrnarakud. Alles jäävad vaid hübridoomid.), isoleeritakse üksikutest hübridoomidest pärinevad rakukloonid, mis produtseerivad ühesuguste omadustega monokloonseid antikehi immuniseerimisel kasutatud antigeeni vastu, paljundatakse, säilitatakse ja kasutatakse antikehade tootmiseks koekultuuris. Kasutatakse astma, autoimmuunhaiguste ja kasvajate ravis. Edukas ravim peab olema spetsiifiline- toimima ainult teatud rakkude grupile. Ei tohi olla immuunogeenne (ei tohi põhjustada enda vastast immuunvastust)
nagu ritsiin. Või seotakse külge väiksed magneetilised osakese. Paramagneetiline osake, magneetilised omadused siis kui on tugevad magnetväljas, väga väikesed. Monoklonaalsed antikehad-on pärit ühest konkreetsest b-lümfotsüüdist. B-lümfotsüüdid on viidud kokku teise sellise rakuga, millel pole sellist stoppi (kasvaja analoog). Selleks sobivad müeloomid, mis ise ei suuda antikeha sünteesida. Kuidas välja valida, et ellu jääks ainult hübriidsed rakud, hübridoomid-müeloom, b-lümfotsüüt. Neid kasvatatakse selektiivsöötmel ja nii saab rakke välja valida. Neil peavad olema ühesugused MHC molekulid, need saadakse puhaste katseloomade liinide kasutamisel. Selleks, et B-lümfotsüüte oleks piisavalt, immuniseeritakse katseloomi. B-lümfotsüüte mõjutatakse mitmete antigeenidega ja siis tekib plasma rakk. Mikrotiiterplaadile külvatakse üks rakk (ideaalis) ning siis sünteesib ja sekreteerib ta lahusesse antikehi.
transformatsiooni erinevad viisid? Võib tekkida iseeneslikult mutatsioonide tagajärjel, selliseid rakke saab eraldada ka nt kasvajakoest või tekitada nt. telomeraasi kodeeriva geeni sisseviimisega rakku. 8. Rakkude fusioonid rakkude liitumised (teatud tingimustel - PEG, elektriimpulss), milleks kasutatakse - geenide kaardistamiseks, monokloonsete antikehade saamiseks tekitatakse rakkude fusiooni teel hübriidrakud (hübridoomid). 9. Mis on hübridoom hübriidrakk, mis on tekitatud rakkude fusiooni teel, millised on selektsiooni tingimused? Kindlal söötmel kasvavad ainult fuseeritud rakud. 10. Läbivoolu tsütomeetria ja FACS (Fluorescence activated cell sorting), põhimõte ja kasutusvaldkonnad rakud pannakse fluorestseeruma ja need voolavad läbi aparaadi, mis eemaldab laenguta rakud; kasutatakse rakkude sorteerimiseks. Meelespea:
· Rakud võivad teatud tingimustel liituda- rakkude fusioon. Kui liituvad kaks erinevat rakku, tekib hübriidrakk, mida nimetatakse heterokarüooniks (heterokaryon). Selliste rakkude tuumad ühinevad rakkude jagunemisel. · Fusioonid tekivad iseeneslikult väga harva, selle nähtuse suurendamiseks: PEG, elektriimpulss · Eri liikide rakkude fusioonid- geenide kaardistamine · Monokloonsete antikehade saamiseks tekitatakse rakkude fusiooni teel hübriidrakud (hübridoomid) · Monokloonne üks primaarstruktuur IG nt hiired · Polükloonne primaarjärjestus erinev (ükskõik, mis loom nt küülik/lammas) 53 9. Mis on hübridoom, millised on selektsiooni tingimused? Hübridoom on hübriidrakk, mis on saadud rakkude fusioonist (monokloonsete antikehade saamiseks) 10. Viiruste kasutamine rakubioloogias.
annaabi.ee 
