Ekstraheerimine kestis seni, kuni petrooleetri lahus muutus värvituks. Ekstraheerimine toimub tõmbekapi all. Spektrofotomeetriga analüüsitakse saadud lahust, et teha kindlaks, missuguseid karotenoide lahus sisaldab. Saadud andmete põhjal arvutatakse välja ka karotenoidide kvantitatiivsed kogused lahuses. Katseandmed Lahuse spekteranalüüsil on näha kolme tippu e. maksimumkohta. Lahuse lahuse neoksantiini E1cm1% lainepikkus , nm neelduvus lainepikkus, nm 464 0,4886 467 3110 435 0,5632 439 2270 414,5 0,4248 415 1550 Katseandmeid analüüsides leidsin, et apelsini koores leidub neoksantiini. Kirjandusallikad kinnitavad katse tulemust. Karotenoidide sisaldude kvantitatiivne analüüs
Ekstraheerimine kestis seni, kuni oktaani lahus muutus värvituks. Ekstraheerimine toimub tõmbekapi all. Spektrofotomeetriga analüüsitakse saadud lahust, et teha kindlaks, missuguseid karotenoide lahus sisaldab. Saadud andmete põhjal arvutatakse välja ka karotenoidide kvantitatiivsed kogused lahuses. Katseandmed Lahuse spekteranalüüsil on näha kolme tippu e. maksimumkohta. Lahuse lahuse LÜKOPEEN E1cm1% lainepikkus , nm neelduvus I lainepikkus, nm 447 0,4518 446 473 0,6298 474 3450 504,5 0,5306 506 LÜKOPEEN Katseandmeid analüüsides leidsin, et TOMATIS LEIDUB LÜKOPEENI. Kirjandusallikad kinnitavad katse tulemust. Karotenoidide sisaldude kvantitatiivne analüüs
(porgand) sisaldas -karoteeni. ABS nm 0,922 424,0 nm 1,207 449,0 nm 1,070 476,0 nm 3. Karoteeni kvalitatiivne määramine: kasutan optilist tihedust mis on mõõdetud lainepikkusel 450 nm. K = D * V * d * 103 / E1cm1% * g D ekstrakti optiline tihedus 1,207 ABS E1cm1% - 1%-lise karoteeni lahuse 2560 ABS ekstinktsioon (optiline tihedus) lainepikkusel 450 nm V ekstrakti kogumaht 23,5 ml d ekstrahendi tihedus 0,69 g/cm3 g uuritava proovi mass 1,33 g 103 tegur üleminekuks grammidel 103
ksantofüll ekstraktis domineerib. Viga tuleneb suure tõenäosusega sellest, et kasutasin liiga palju ekstrahenti ja minu apelsinikoore ekstrakt oli selle tulemusena äärmiselt hele, võib öelda, et praktiliselt värvitu. Oleksin pidanud saama tulemused, mis oleksid sobitunud lainepikkustega 416 nm, 440 nm ja 468 nm. Sellises suurusjärgus neeldumismaksimumid oleksid vastanud ksantofüllile neoksantiin, mille ekstinktsioonikoefitsent E1cm1%=2270. (Minu katse põhjal võib öelda, et neeldumismaksimumide vahemikud 453,5 nm ja 426,0 nm on õiges suurusjärgus ja vahemikus, kuid edasine tulemus ei klapi.) Karotenoidi sisalduse arvutamine (kvantitatiivne analüüs) Karotenoidi sisalduse arvutamiseks kasutatakse neeldumisspektri analüüsimisel saadud andmeid ehk neeldumismaksimumidele max vastavaid absorptisooni (A) väärtusi. Reeglina
3. Kirjutada ära iseloomulikud neeldumisspektrite maksimaalsed väärtused ja nende optilised tihedused (teoreetiliselt peaks kolm erinevat neeldumisspektrit olema ja kolm erinevat optilist tihedust). 4. Välja trükkida neeldumisspekter ja analüüsida. Karotenoidi sisalduse arvutamine (kvantitatiivne analüüs) Uuritavad lahuses oleva karoteeni isomeeri sisalduse määramist saab ära arvutada kasutades järgnevat valemit: K = (A * V * d * 103) / (E1cm1% * g) kus, A absorptiooni väärus, mis vastab arvutuse aluseks valitud neeldumismaksimumile. E1cm1% - vaadeldava karotenoidi ekstinktsioonikoefitsient. V- ekstrakti kogumaht d kasutatud ekstrahendi tihedus, g/cm3 g uurimiseks võetud taimse materjali mass, g. 103 tegur milligramidele üleminekuks. Arvutatud tulemust võrrelda teoreetilise tulemusega ja analüüsida töö õnnestumust. Andmed m(porgand) = 0,51 g V(ekstrakt) = 28 ml
iseloomulikud neeldumismaksimumid ja nendele vastavad optilise tiheduse väärtused · Neeldumismaksimumid: o 445,5 nm, 0,2659 A o 470,0 nm, 0,3481 A o 500,5 nm, 0,2671 A · Neeldumisspekter trükitakse välja · Iseloomulikke neeldumismaksimume võrreldakse teatmeteostes leiduvate andmetega · Kirjanduse põhjal on tegemist lükopeeniga (tegelikud neeldumismaksimumid petrooleetris 505; 472; 446 nm. Vastavad E1cm1% väärtused: 3150; 3450; 2250) Karotenoidi sisalduse arvutamine (kvantitatiivne analüüs) Sisalduse määramiseks uuritavas proovis kasutatakse neeldumisspektri analüüsimisel saadud andmeid neeldumismaksimumine vastavaid absorptsiooni väärtusi. Reeglina võetakse aluseks selline absorptsiooni väärtus, mis vastab neeldumisspektril kõige kõrgemale tipule. Arvutus põhineb nimetatud lainepikkusele vastava A väärtuse ja samal lainepikkusel
Võrdlesin saadud tulemusi laborimaterjalidega, sain tulemuseks, et minu proov sisaldas lükopeeni. ABS nm 0,648 500,5 nm 0,768 469,5 nm 0,542 443,0 nm 3. Lükopeeni kvalitatiivne määramine: kasutan optilist tihedust mis on mõõdetud lainepikkusel 450 nm. K = D * V * d * 103 / E1cm1% * g D ekstrakti optiline tihedus 0,768 ABS E1cm1% - 1%-lise karoteeni lahuse 3450 ABS ekstinktsioon (optiline tihedus) lainepikkusel 450 nm V ekstrakti kogumaht 29 ml d ekstrahendi tihedus 0,69 g/cm3 g uuritava proovi mass 1,1 g 103 tegur üleminekuks grammidel 103 K = 0,768 * 29 * 0,69 * 103 / 3450 * 1,1 = 4,05 mg% Järeldus: Tomatis sisaldub põhiliselt lükopeen.
Protsessi korrata kuni sademe kohal olev ekstraks muutub värvituks. Kõik ekstraktid kogutakse samasse nõusse, määratakse kindlaks ekstrakti kogumaht ja võetakse neeldumisspekter. Karotenoidide neeldumisspekter mõõdetakse lainepikkuste vahemikus 350- 650 nm, kasutades võrdluslahusena puhast lahustit (ekstrahenti). Tulemused: Neeldumisspektri maksimumid: 447,5 nm D=0,6426 473,0 nm D=0,8838 505,0 nm D=0,7256 E1cm1%=3450 V = 8,2 ml Kirjanduse alusel domineerib tomatites lükopeen maksimumidega 446, 474, 506 d = 0,704 g/cm3 Karotenoidi sisalduse arvutamine (kvantitatiivne analüüs) Kus A absorbtsiooni väärtus, mis vastab arvutuse aluseks valitud neeldumismaksimumile max (kõrgeimale ,,tipule"vastav A väärtus) E1cm1% - vaadeldava karotenoidi ekstinktsioonikoefitsent (1%-lise karotenoidi lahuse absorbtsioon) sama max juures V ekstrakti kogumaht, ml
võetakse arvutamisel aluseks selline absorptsiooni väärtus, mis vastab neeldumisspektri kõige kõrgemale ,,tipule". Arvutus põhinebki nimetatud lainepikkusele max vastava A väärtuse ja samal lainepikkusel mõõdetud ekstinktsioonikoefitsiendi väärtuse suhtele. Karotenoidi sisaldus (K, mg%) uuritavas proovis arvutatakse vastavalt valemile: , kus A absorptsiooniväärtus, mis vastab aluseks valitud neeldumismaksimumile max (kõrgeimale ,,tipule" vastav A väärtus E1cm1% - vaadeldava karotenoidi ektstinktsioonikoefitsient (1%-lise karotenoidi lahuse absorptisoon) sama max juures V ekstrakti kogumaht, mL d kasutatud ekstrahendi tihedus, g/cm3 0,704 g uurimiseks võetud taimse materjali mass, g 103 tegur milligrammidele üleminekuks Tulemus 1,24 mg% näitab, et 100 g porru lehes sisaldub 1,24 mg -karoteeni.
mis vastab neeldumisspektri kõige kõrgemale ,,tipule". Arvutus põhinebki nimetatud lainepikkusele max vastava A väärtuse ja samal lainepikkusel mõõdetud ekstinktsioonikoefitsiendi väärtuse suhtele. Karotenoidi sisaldus (K, mg%) uuritavas proovis arvutatakse vastavalt valemile: , kus A absorptsiooniväärtus, mis vastab aluseks valitud neeldumismaksimumile max (kõrgeimale ,,tipule" vastav A väärtus E1cm1% - vaadeldava karotenoidi ektstinktsioonikoefitsient (1%-lise karotenoidi lahuse absorptisoon) sama max juures 3 V ekstrakti kogumaht, mL d kasutatud ekstrahendi tihedus, g/cm 3 g uurimiseks võetud taimse materjali mass, g 103 tegur milligrammidele üleminekuks ehk 2260 g Tulemus 2,26 mg% näitab, et 100 g porgandit sisaldab 2, 26 mg - karoteeni ??
d. Kordasin seda, kuni sademe kohal oleva ekstrakt muutus värvusetuks. e. Kõik ekstraktid viisin samasse kogumisnõusse. f. Määrasin kindlaks ekstrakti kogumahu V= 43 ml 5. Edasi uurisin saadud ekstrakti neeldumisspektri all. Spekter mõõtis vahemikus 350-600 nm. Tulemused: Neeldumismaksimumid: I 530 nm; 0,298 A II 471 nm ; 0,361 A ( E1cm1% = 3454 ) II 446,5 nm; 0,260 A Kirjanduse alusel domineerib paprikas lükopeen neeldumismaksimumidega 446, 474, 506 nm. Karotenoidi sisalduse arvutamine 3 A ∙V ∙ d ∙ 10 K= 1 mg E 1 cm ∙ g 0,361 ∙ 43∙ 0,65 ∙ 1000 K= =1,8 mg 3453∙ 1,62 See tähendab, et 100g punast kirsstomatit sisaldab 1,8 mg lükopeeni. D – ekstrakti optiline tihedus= 0,361
Lükopeen (446; 472; 506) nm E%1cm = 3450 Kapsantiin (504; 475; 462) nm E%1cm = 1905 Karotenoidi sisalduse arvutamine (kvantitatiivne analüüs) Karotenoidi sisaldus (K, mg %) uuritavas proovis arvutatakse vastavalt siintoodud valemile: A V d 103 K= mg , E11 cm g kus A - absorptsiooni väärtus, mis vastab arvutuse aluseks valitud neeldumismaksimumile max (kõrgeimale ,,tipule" vastav A väärtus), E1cm1% - vaadeldava karotenoidi ekstinktsioonikoefitsient (1%-lise karotenoidi lahuse absorptsioon) sama max juures, V - ekstrakti kogumaht, ml, d - kasutatud ekstrahendi tihedus, g/cm3, g - uurimiseks võetud taimse materjali mass, g, 103 - tegur milligrammidele üleminekuks. Lükopeen: 3 0,5487 15,5 0,72 10 K= = 2,86 mg 3450 0,62 Kepsantiin: 3 0,5487 15,5 0,72 10
ekstinktsioonikoefitsiendi väärtuse suhtele. Teatmekirjandused leiduvad andmed väga paljude karotenoidide ekstinktsioonikoefitsientide väärtuste kohta: 1 %-liste lahuste absorptsiooni väärtuste kohta. Seega tueb kirjandusest leida uuritavas lahuses domineerivaima karotenoidi ekstinktsioonikoefitsiendi väärtus ja kasutada seda arvutusvalemis: A absorptsiooni väärtus, mis vastab arvutuse aluseks valitud neeldumismaksimumile E1cm1% - vaadeldava karotenoidi ekstinktsioonikoefitsient V ekstrakti kogumaht ml d kasutatud ekstrahendi tihedus g uurimiseks võetud taimse materjali mass 1000 tegur milligrammidele üleminekuks Kuna minul katse ebaõnnestus ning neeldumisspektrit ei olnud võimalik võtta, otsisin kirjanduseest infot paprikas ja tema sugulastes sisalduvate karotenoidide kohta. Karotenoidid paprikas ja tema sugulastes Karotenoidid on üks suuremaid fütotoitainete rühmi
annaabi.ee 
