Geenitehnoloogia (0)

Geenitehnoloogia - valitud DNA lõikude eraldamine, töötlemine in vitro ja siirdamine sama või muu liigi isendi geneetilisse struktuuri-kromosoomi, plasmiidi või viirusesse(geenide ülekanne).
Rekombinantne DNA- DNA molekul , milles on ühendatud eri liikidelt pärit DNA osad.
Rakkudesse viiakse võõraid geene viirusvektori abil, plasmiidse geenivektoriga, Agrobakteriga, DNA-püssiga või mikropipetiga.
Restriktaastehnika: 1. Sama restriktaas tunneb ära sama järjestuse DNA eri molekulides. 2. Restriktaas „lõikab“ DNA ahelad pooleks nii, et tekivad „kleepuvate“ otstega DNA lõigud. 3. Eri päritolu DNA lõigud viiakse lahuses kokku; lõigud ühinevad komplementaarsuse alusel; kleepuvate otste vahele tekivad vesiniksidemed . 4. Ensüüm ligaasi abil ühendatakse eri päritolu DNA lõigud omavahel kovalentsete sidemetega kokku – tekib rekombinantne DNA molekul.
Plasmiidne geenivektor (TAIM):1. Restriktaas lõikab DNA lahti kindla järjestuse kohalt. 2. sama restriktaasiga lõigatakse välja siiratavat geeni sisaldav DNA osa. 3. plasmiid ja DNA-osa segatakse kokku; „kleepuvad“ otsad ühinevad. 4.DNA ühendatakse ligaasiga töötlemisel.( bakter võtab plasmiide endasse ümbritsevast kk-st – saab viia teistesse bakteritesse).
Agrobakteriga- 1.agrobakteri plasmiidi sisestatakse geen, 2.bakter paljuneb, 3. meristeemsed taimerakud ja agrobakterid viiakse ühisele kasvusöötmele,4. Agrobakteri plasmiid tungib taimerakku ja võõrgeen siirdub kromosoomi.
DNA-püssiga- taimerakku tulistatakse kulla või volframiosakesi, mille peale on eelnevalt seotud võõras DNA.
Transgeenne organism-organism, kelle genoomi on siirdatud võõrliigi geene, mis organismis avalduvad ja päranduvad järglastele.
Kimäär-erineva genotüübiga ja eri organismidest pärit rakkudest koosnev organism.
Nokautorganism – oraganism, kellel on rikutud mingi geen, et see ei avalduks
Transgeenseid organisme ja taimi- ravimiseks(vigase geeni asendamine tervega), ravimite katsetamiseks ning tugevanate ja paremate organismide tegemiseks(GMO). (kuidas?).
TG Taimed:-putukaresistentsus; viirusresistentsus( kartul , papaia ); herbitsiidiresistentsus( peet , mais, raps ); paremad omadused. Kasulikkus:-suurem saak-lihtsam kasvatada-vähem keskkonnamürke. Kahjulikkus:-geenid võivad kanduda üle umbrohule-eri org geenide koostoime ettearvamatu , kahjurid immuunseks.
Geeniteraapia - puudest või haigusest vabanemiseks. Normaalselt talitlev geen siiratakse raske gen puudega inimese koe rakkudesse.//Luuüdist rakud rakukultuuri>neisse sisestatakse normaalgeen retroviiruse abil> siirdega raku klooniakse ja paljundatakse ning siiratakse haigesse.(struktuuri siiratav geen sisestada sobiva koespetsiifilise promootoriga ülekandevektorisse)
Geenivaigistusmeetod-kindla mRNA-molekuli blokeerimine või lammutamine nn. mikro -RNA-dekaudu>geen ei avaldu.
Geenitehnoloogia- valitud DNA lõikude eraldamine, töötlemine in vitro ja siirdamine sama või muu liigi isendi geneetilisse struktuuri-kromosoomi, plasmiidi või viirusesse(geenide ülekanne).
Rekombinantne DNA- DNA molekul, milles on ühendatud eri liikidelt pärit DNA osad.
Rakkudesse viiakse võõraid geene viirusvektori abil, plasmiidse geenivektoriga, Agrobakteriga, DNA-püssiga või mikropipetiga.
Restriktaastehnika: 1. Sama restriktaas tunneb ära sama järjestuse DNA eri molekulides. 2. Restriktaas „lõikab“ DNA ahelad pooleks nii, et tekivad „kleepuvate“ otstega DNA lõigud. 3. Eri päritolu DNA lõigud viiakse lahuses kokku; lõigud ühinevad komplementaarsuse alusel; kleepuvate otste vahele tekivad vesiniksidemed. 4. Ensüüm ligaasi abil ühendatakse eri päritolu DNA lõigud omavahel kovalentsete sidemetega kokku – tekib rekombinantne DNA molekul.
Plasmiidne geenivektor(TAIM):1. Restriktaas lõikab DNA lahti kindla järjestuse kohalt. 2. sama restriktaasiga lõigatakse välja siiratavat geeni sisaldav DNA osa. 3. plasmiid ja DNA-osa segatakse kokku; „kleepuvad“ otsad ühinevad. 4.DNA ühendatakse ligaasiga töötlemisel.(bakter võtab plasmiide endasse ümbritsevast kk-st – saab viia teistesse bakteritesse).
Agrobakteriga- 1.agrobakteri plasmiidi sisestatakse geen, 2.bakter paljuneb, 3. meristeemsed taimerakud ja agrobakterid viiakse ühisele kasvusöötmele,4. Agrobakteri plasmiid tungib taimerakku ja võõrgeen siirdub kromosoomi.
DNA-püssiga- taimerakku tulistatakse kulla või volframiosakesi, mille peale on eelnevalt seotud võõras DNA.
Transgeenne organism-organism, kelle genoomi on siirdatud võõrliigi geene, mis organismis avalduvad ja päranduvad järglastele.
Kimäär-erineva genotüübiga ja eri organismidest pärit rakkudest koosnev organism.
Nokautorganism – oraganism, kellel on rikutud mingi geen, et see ei avalduks
Transgeenseid organisme ja taimi- ravimiseks(vigase geeni asendamine tervega), ravimite katsetamiseks ning tugevanate ja paremate organismide tegemiseks(GMO). (kuidas?).
TG Taimed:-putukaresistentsus; viirusresistentsus(kartul,papaia); herbitsiidiresistentsus(peet, mais, raps); paremad omadused. Kasulikkus:-suurem saak-lihtsam kasvatada-vähem keskkonnamürke. Kahjulikkus:-geenid võivad kanduda üle umbrohule-eri org geenide koostoime ettearvamatu, kahjurid immuunseks.
Geeniteraapia- puudest või haigusest vabanemiseks. Normaalselt talitlev geen siiratakse raske gen puudega inimese koe rakkudesse.//Luuüdist rakud rakukultuuri>neisse sisestatakse normaalgeen retroviiruse abil>siirdega raku klooniakse ja paljundatakse ning siiratakse haigesse.(struktuuri siiratav geen sisestada sobiva koespetsiifilise promootoriga ülekandevektorisse)
Geenivaigistusmeetod-kindla mRNA-molekuli blokeerimine või lammutamine nn. mikro-RNA-dekaudu>geen ei avaldu.