Protokoll- lehepigmentide eraldamine (0)

Protokoll - lehepigmentide eraldamine
Katsevahendid

• Lehter
  
• Uhmer
  
• 5 g mädarõika lehti
  
• Filterpaber
  
• 96% piiritus 10 ml
  
• Katseklaasid
  
• Kraani vesi 2-3 tilka
  
• Kolb
  
• Pipett
  
• Bensiin 3 ml
  
• NaOH 0,5g
  

Töökäik
Kaaluda 5 grammi mädarõika lehti ja uhmerdada neid senikaua , kuni need on ühtlaseks massiks. Mõõta 10ml 96%-list piiritust ja lisada see purustatud massile. Jätkata uhmerdamist, kuni taimerakud on purunenud ja alkohol intensiivselt roheliseks värvunud. (vt joonis 1).
Saadud klorofüllilahus valada klaaspulga abil läbi filtri keeduklaasi. Purustatud massile lisada uuesti 10ml 96%-list piiritust ja uhmerdada jälle senikaua, kuni alkohol on intensiivselt roheliseks muutunud. Klorofüllilahus valada uuesti klaaspulga abil läbi filtri keeduklaasi. Ükski tilk ei tohi kaduma minna! (vt joonis 2)
Pigmentide eraldamine Krause meetodil
Valada kokku 5ml saadud pigmentide alkohollahust, 3ml bensiini ja 2-3 tilka vett ning valada saadud lahus katseklaasi. Sulgeda katseklaas korgiga ning hakata intensiivselt loksutama. Loksutada 5 min ning jätta seejärel seisma. Tekib kaks kihti- ülemine kiht bensiin ning alumine alkohol. (vt joonis 3)
Eraldada kihid pipetiga ning bensiin valada katseklaasi.
Leelise toime klorofüllisse
Saadud bensiinile lisada 0,5 g NaOH. Sulgeda katseklaas korgiga ning intensiivselt loksutada. Peale loksutamist jätta seisma. Kihid sadenevad seekord vastupidiselt- üleval bensiini kiht, mis sisaldab karotiini ning all alkoholi kiht, mis sisaldab leelise toimel seebistunud klorofülli ja lisaks veel ksantofüll. (vt joonis 4)
Joonised
Joonis 1. Uhmerdamine Joonis 2. Filtreerimine
Joonis 4. Joonis 3.
Jooniste autor Liina Koppelman
Pigmentide tähtsus

Klorofüll
Klorofüll ehk leheroheline, esineb taimede kloroplastiidides koos karotiini ja ksantofülliga, alamail taimedel kromatofoorides sisalduv pigment , mis annab taimedele rohelise värvuse. Keemiliselt on kolrofüll parfüriin, mille molekuli kuuluvad lämmastiku aatomid on seotud magneesiumi aatomiga. Klorofülli tähtsaim ülesanne on valgusenergia muundamine keemiliseks energiaks.

Ksantofüll
Taimede lehtedes, õites ja viljades leiduv kollane pigment mis on hapniku sisaldav karotinoid . Tekib plastiidides koos miteme teise pigmendiga, esineb looduses nii vabalt kui ka estrite koostises. Moodustub karotiini oksüdeerumisel. Värv on kollasest punaseni.

Karoteen
Karotenoidide või ka tetraterpeenide klassi kuuluvad ühendid. . Nende ühendite pikad konjugeeritud kaksiksidemete ahelad neelavad valikuliselt valgust ja tänu sellele omadusele on looduslikud värvained ehk pigmendid . Neile ühenditele on iseloomulik kollane kuni punane värvus.
Karoteenid ei lahustu vees, küll aga orgaanilistes lahustites.
Karoteenide biosüntees toimub taimedes, kuid mitte loomsetes rakkudes. Karoteenid võivad ladestuda maksas ja rasvkoes ningkonverteeruda retinaaliks olles A-vitamiini provitamiinideks.
Erinev lahustumine bensiinis ja alkoholis
Bensiini ja alkoholi keemiline ehitus on teine, mis tähendab, et nende ainete lahustamis võime on erinev. Enamasti sõltub aine lahustuvus vabade vesinik ja hapnik sidemete olemasolust.
1) Kõik pigmendid lahustuvad alkoholis.
2) Bensiinis lahustuvad klorofüll ja karoteen
3) Bensiini tihedus on väiksem kui etanooli tihedus
4) NaOH toimel klorofüll seebistub ja selle lahustuvus etanooli vesilahuses suureneb, kuid see ei lahustu bensiinis.
Allikad
Struktuur http://et.wikipedia.org/wiki/Klorof%C3%BCll 17.10.2014
Ksantofüllid http://et.wikipedia.org/wiki/Ksantof%C3%BCllid 17.10.2014
Karoteenid http://et.wikipedia.org/wiki/Karoteenid 17.10.2014