· Elueerimise võib lõpetada, kui väljuv eluaat on värvitu. Fraktsioonide analüüsimine · Antud töös väljendatakse aine kontsentratsiooni igas fraktsioonis lahuse absorbtsiooni ehk optilise tiheduse väärtusena, mida mõõdetakse aine neeldumismaksimumile vastaval lainepikkusel. · Täiesti värvusetute fraktsioonide absorptsiooni väärtused võrduvad 0-ga ja neid fraktsioone pole vaja mõõta. · Koostatakse 3-veeruline katseandmete tabel, mis on aluseks kromatogrammi koostamisele ja töö tulemuste väljatoomisele. Kolonni täidiseks oleva Sephadex'i mark G-75, seda iseloomustav tegur k=0,1 Geelisamba kõrgus L=32,7 cm Diameeter d=1,6 (raadius r=0,8) Vt=r2L=*0,82*32,7=65,75 cm3 Geelimaatriksi maht Vg=k*Vt=0,1*65,75=6,575 cm3 Maksimalne elueerimismaht Vxmax=Vt-Vg=65,75-7,575=59,175 cm3 Fraktsioonide üldarv n=Vxmax/2=59,175/230 Voolutuslahus 20mM Tris 0,15M NaCl pH=7,5
5. Kolonni voolutamine. Kuni kollonni allaosa jõuab kõige kiiremini liikub komponent (meie juhul dekstraansinine) kogume eluaadi ühendatud fraktsiooniga ühe kolbi. Pärast esimese komponentide kolonni alla jõudmisel kogume 2 ml kaupa. 6. Fraktsioonide analüüsimine. Meie töös väljendame aine kontsentratsiooni igasfraktsioois lahuse optilise tiheduse järgi. Iga aine absorbeerib erinevatel lainepikkusel. Kasutame spektrofotomeetri meetodi. 7. Koostame 3-veeruline katseandmet tabel, mis on alusel krommatogrami jaoks. Tulemused: Kasautatud kolonni paraametrid: · Täidise materjal ja mark: geel G-75. · Täidist iseloomustav tegur k : K=0,1 · Täidise kõrgus ja kolonni sisediaameter: D=1,8cm , L=32,7 · Arvutatud täidise kogumaht Vt: Vt= r2 *L = 3,14*0,9*32,7= 83,21cm3 · Arvutatud maksimaalne elueerimismaht Vx max : Vg= K*Vt , Vmax =Vt-Vg Vg = 0,1 *83,21 =8,321 Vmax=83,21 -8,321 =74,89.
4. Elueerimise võib lõpetada, kui väljuv eluaat on värvitu. Fraktsioonide analüüsimine 1. Antud töös väljendatakse aine kontsentratsiooni igas fraktsioonis lahuse absorbtsiooni ehk optilise tiheduse väärtusena, mida mõõdetakse aine neeldumismaksimumile vastaval lainepikkusel. 2. Täiesti värvusetute fraktsioonide absorptsiooni väärtused võrduvad 0-ga ja neid fraktsioone pole vaja mõõta. 3. Koostatakse 3-veeruline katseandmete tabel, mis on aluseks kromatogrammi koostamisele ja töö tulemuste väljatoomisele. Kolonni täidiseks oleva Sephadex’i mark – G-75, seda iseloomustav tegur k=0,1 Geelisamba kõrgus L=30,9 cm Diameeter d=1,6 (raadius r=0,8) Vt=πr2L=π*0,82*30,9=62,10 cm3 Geelimaatriksi maht Vg=k*Vt=0,1*62,10=6,21 cm3 Maksimalne elueerimismaht Vxmax=Vt-Vg=62,10- 6,21=55,89 cm3 Fraktsioonide üldarv n=Vxmax/2= 55,89/2≈27,945 Voolutuslahus 20mM Tris 0,15M NaCl pH=7,5
· aine kontsentratsiooni väljendatakse igas fraktsioonis lahuse absorptsiooni ehk optilise tiheduse väärtusena, mida mõõdetakse aine neeldumismaksimumile vastaval lainepikkusel · absorptsiooni mõõdetakse spektrofotomeetril · värviliste segude puhu mõõdetakse vaid selliste fraktsioonide absorptsiooni, milles võib täheldada vähimatki värvust · koostatakse 3-veeruline katseandmete tabel, mille alusel tehakse kromatogramm 3. Tulemused A. kolonni iseloomustavad parameetrid Täidise materjal ja mark: Dekstraan, Sephadex G-75 Pundumistegur: k = 0,1 Täidise kõrgus ja kolonni sisediameeter: L = 26,3; d = 1,8 Täidise kogumaht: Vt = 66,93 Geelmaatriksi maht: Vg = k*Vt = 0,1*66,93 = 6,69 Arvutatud maksimaalne elueerimismaht: Vxmax = Vt Vg = 66,93 6,69 = 60,24
· teha arvutusi ja kuvada nende tulemusi · kuvada pilte, diagramme või alamekraanivorme · esitada andmeid pilkupüüdval kujul · kujundada rakenduse töökeskkonda. 9.1. Vormi loomine Vormide loomiseks võib kasutada dialoogiakent New Form (joonis 9.1). Selleks, kas: · klikatakse andmebaasiakna vormivaate nupul · valitakse menüükäsk Insert Form. Kujundusvaade Vormitark Veeruline Tabulaarne automaatvorm automaatvorm Tabelikujuline Diagrammitark automaatvorm Tabeli või Liigendtabelitark päringu valik Joonis 9.35 Uue vormi loomine
1. liitmine: + = (a1 + b1; a2 + b2; ...; an + bn) 2. skalaariga korrutamine: a = (aa1; aa2; ...; aan) Lineaarsed tehted aritmeetiliste vektoritega rahuldavad samu omadusi mis geomeetriliste vektorite korral. Nullvektori osas on = (0; 0; ...; 0); - = (- a1; -a2; ... -an) = (-1); - = + (-) = + (-1) 6. Maatriksi defnitsioon ja tähistused. Lineaarsed tehted maatriksitega ja nende omadused. K - korpus; m, n - positiivsed naturaalarvud; (mxn)-maatriks üle korpuse K - m-realine ja n-veeruline skalaaride tabel; K(mxn) - kõigi (mxn)-maatriksite hulk üle korpuse K (mxn)-maatriksiks nimetatakse m reast ja n veerust koosnevat ristkülikukujulist arvude tabelit A = ||aij|| = (aij R iga i ja j korral) Erikujulised maatriksid: 1. ruutmaatriksid (m=n) 2. diagonaalmaatriks (m=n; aij = 0 ij) 3. skalaarmaatriks (m=n; aij = 0 ij; a11 = a22 = ... = ann) Lineaarsed tehted maatriksitega A = ||aij|| Kmxn; B = ||bij|| Kmxn; c K 1
ultraviolettkiirguse (UV) abil lainepikkusel 280 nm. Värviliste segude puhul mõõdetakse vaid selliste fraktsioonide absorptsiooni, milles võib silma järgi täheldada vähimatki värvust. Täiesti värvusetute fraktsioonide absorptsiooni väärtused võrduvad 0-ga ja neid fraktsioone pole vaja mõõta. Värvusetute segude lahutamisel mdetakse kõigi fraktsioonide optilised tihedused, reguleerides spektrofotomeetri vajalikule lainepikkusele. Koostatakse 3-veeruline katseandmete tabel, mis on aluseks kromatogrammi koostamisele ja töö tulemuste väljatoomisele. Mõõtmistulemused kantakse tabelisse, fikseerides ka 55 värvusetute fraktsioonide numbrid ja elueerumismahud, märkides nende optilise tiheduse väärtuseks 0. NB! Kuna iga segus sisalduva aine optilise tiheduse väärtust mõõdetakse ainele iseloomulikul neeldumismaksimumi lainepikkusel max, siis ei tohi unustada spektro-