embrüonaalkloonimisel (lõhestuse meetodil) 1)munarakk viljastatakse in vitro meetodil 2)varajane embrüo jaotatakse osadeks 3)osad taastuvad & need siiratakse eri vastuvõtjateemakasse.Tuumkloonimisevastuseis:õnnestub väga harva, pole eetiline kloonida teisi organisme, rakud pole noored.Tüvirakkude iseärasus: ´võib muutuda sellele koele omaseks rakuks...Kasutatakse organite saamiseks Juuretise kasutamine .. nt. leib,sai(pärmseened), jogurt,juust(piimhappebakter), õlu(pärmseened) Monoklonaalseid antikehi kasut. vastavate ainete määramiseks, haiguste kindlaks tegemiseks. Dolly sünniga tõestati, et keharaku tuumas on olemas uue organismi arenguks vajalik informatsioon Mõisted:1.Kloonimine-DNA-fragmentide, rakkude v organismide geneetiliselt identsete järglaste tekitamine 2.Meristeem-taimede algkude 3.totipotentsus-rakkude arenguline täisvõimelisus 4.Feromoonid-loomade poolt keskkonda eritatavad bioaktiivsed ained, mis samasse liiki
Nad on totipotentsed "kõikvõimelised". Hübridoomitehnoloogia ja monoklonaalsed antikehad Teatud antigeen viiakse hiiresse. Hiires tekivad vastavaid antikehi tootvad Blümfotsüüdid. B-lümfotsüüdid viiakse kokku kasvajarak- kudega need on hübridoomid. Selektiivsöötmel jäävad ellu ja paljunevad ainult hübridoomid. Nüüd on puhaskultuur ühte tüüpi antikehi tootvatest, hästi paljunevatest rakkudest. Monoklonaalseid antikehi kasutatakse: Antigeenide määramiseks Teatud valkude puhtaks eraldamiseks Haiguste avastamiseks Rasedustestis. Testjoon värvub ainult siis, kui proov sisaldab kooriongonadotropiini. Ka meditsiin kasutab biotehnoloogiat juba terve sajandi Antibiootikumid seentest ja bakteritest (penitsilliin ja etratsükliin) A. Fleming avastas penitsilliini 1929.a Alkaloidid, mida kasutatakse Parkinsoni tõve ja migreeni raviks.
Antigeen tootmine Rakud ühen- datakse Kasvajarakud Antikehasid tootvad paljunevad hästi B-lümfotsüüdid http://www3.niaid.nih.gov/ topics/immuneSystem/frontier Monoklonaalsed antikehad Images.htm Monoklonaalseid antikehi kasutatakse: 1. Antigeenide määramiseks 2. Teatud valkude puhtaks eraldamiseks 3. Haiguste avastamiseks 4. Rasedustestis. Testjoon värvub ainult siis, kui proov sisaldab kooriongonadotropiini. http://thejenniferblog.files.wordpress.com/2008/01/pregnancy_test.jpg Embrüosiirdamine ja viljastamine in vitro Superovulatsioonil küpseb lehmal palju munarakke. Pärast seemendamist pestakse embrüod välja. Nende hulgast valitakse parimad ja viiakse surrogaatemasse.
Antigeen tootmine Rakud ühen- datakse Kasvajarakud Antikehasid tootvad paljunevad hästi B-lümfotsüüdid http://www3.niaid.nih.gov/ topics/immuneSystem/frontier Monoklonaalsed antikehad Images.htm Monoklonaalseid antikehi kasutatakse: 1. Antigeenide määramiseks 2. Teatud valkude puhtaks eraldamiseks 3. Haiguste avastamiseks 4. Rasedustestis. Testjoon värvub ainult siis, kui proov sisaldab kooriongonadotropiini. http://thejenniferblog.files.wordpress.com/2008/01/pregnancy_test.jpg Embrüosiirdamine ja viljastamine in vitro Superovulatsioonil küpseb lehmal palju munarakke. Pärast seemendamist pestakse embrüod välja. Nende hulgast valitakse parimad ja viiakse surrogaatemasse.
spetsiifikaga antikehade tüüpi. Antiseerum on immuunseerum, mis sisaldab antikehi kas ühe või mitme antigeeni vastu, kusjuures iga antigeen on põhjustanud mitme erineva antikeha tekke. Antiseerumit saadakse tavaliselt suurtelt loomadelt, nt hobustelt, keda on eelnevalt immuniseeritud kindla antigeeniga. Hübridoom on antikeha sünteesiva lümfotsüüdi ja müeloomiraku hübriid; luuakse monokloonse antikeha saamiseks. 8.Monoklonaalseid antikehi kasutatakse: · Antigeenide määramiseks · Teatud valkude puhtaks eraldamiseks · Haiguste avastamiseks · Rasedustestis. Testjoon värvub ainult siis, kui proov sisaldab kooriongonadotropiini. 9.Viljastamine katseklaasis - raseduse saavutamiseks viiakse munarakk ja seemnerakud kokku väljaspool naise organismi (katseklaasis ehk in vitro) ning emakasse siiratakse viljastatud munarakk. 10
Mõlema opi puhul oli 3 naist ja 2meest grupis. Enne opi võeti veeniproov, mis oli algmõõtmeks selle konkreetse patsiendi jaoks. Opi ajal olid narkoosi all. Peale opi võeti kanüülist vereproov 1,3 ja 5 päeval. Põlveliigese opi korral kasutati zgutti. Isheemi aeg oli 94 pluss miinu 7,47 minutit. Proovid võeti peale zgutti vabastamist 5 ja 15 minuti pärast ning siis 1,3 ja 5 päeval. Raku pinnal olevate CD62L ja CD11b ekspresiooni mõõtmiseks kasutati monoklonaalseid antikehasid.. H2O2 tootmise mõõtmiseks isoleeriti rakud ja kasutati Bass i tehnikat et teha kindlaks rakusisest tootmist. Elastaasi taseme leidmiseks kasutati ELISAt (materjal uuringualuse plasma). Von Willebrandi ja slCAM-1 mõõtmiseks kasutati kahe astmelist emsüüm imuunoassay sandwich. 3 LK tulemused Puusaliigese opi järgselt tõusis leukotsüütide tase võrreldes baas tasemega esimesel päeval ning langes tagasi baastasemele 3 päeval. Ja 5. Päeval
juurte teket soodustavaid kasvufaktoreid. Juurdunud ja vajalikul määral kasvanud võrsed istutatakse kasvuhoonesse sobiva koostisega pinnasesse. Eelis: kasutatakse raskestipaljundatavate taimede puhul (orhideed, viljapuud), meristeemrakud on viirusevabad ja jõulisema kasvuga, õitsevad lopsakamalt ja annavad rikkalikumat saaki. Kasutatakse ka looduskaitses hävimisohus taimeliikide kaitses. 9. Kirjelda, kuidas on võimalik hübridoomitehnoloogia abil saada monoklonaalseid antikehi. Millised on sellise tehnoloogia rakenduslikud võimalused? Sellise tehnoloogia rakenduslikud võimalused on viiruste tuvastamine, meditsiiniline ja veterinaarne diagnostika (nt rasedustest). Inimese monokloonseid antikehi on võimalik kasutada ravis nakkushaiguste ja vähi puhul. 10. Mille jaoks kasutatakse embrüosiirdamist? · Loomade puhul saab healt tõult palju järglasi, samuti on võimalik saada mitu korda rohkem järglasi kui loomulikul viisil.
Krooniline toksoplasmoos võib põhjustada autoimmuunsündroomi. 60. Autoantikehad töövahenditena (cDNA raamatukogude skriining jms.). 61. Immunopretsipitatsioonimeetod antikehade määramiseks. 62. In vitro testid lümfotsüütide funktsiooni hindamiseks. In vitro rakulise immuunsuse määramine. Võimalik määrata rakkude hulka. Seda tehakse voolutsütomeetria (FACS) abil. Kasutatakse monoklonaalseid antikehi, mida märgistatakse fluorestsentsmikroskoopias. E rosetid. (PE), CD3-le (FITC). CD8 retseptoreid võib leida NK rakkude pinnalt. Lümfotsüüdid on juhendaja sõnul kõige väiksemad ja kõige väiksemate graanulite sisaldusega. Seda on võimeline voolutsütomeeter eristama teistest klassidest. Lümfotsüütide alaklasse aga see voolutsütomeeter üksteisest eraldada ei oska. Nendeks klassideks on T, B ja NK. CD3 retseptor on T raku pinnal
Iga süstimse tulemusena tekib järjest kõrgema tiitriga antiseerum, mis sisaldab suures hulgas IgG antikehi. 4. Antiseerum saadakse looma verest. Lastakse hüübida, eemaldatakse erütrotsüüdid ja teised vererakud ning mõningad seerumvalgud. 5. Antikehade puhstamine antiseerumist. Homogeenset antikehade populatsiooni on võimalik saada B lümfotsüütide liitmisel kasvajarakkudega. Saadud rakuliine kutsutakse HÜBRIDOOMIDEKS. Toodavad ühte kindlat liiki antikehi MONOKLONAALSEID ANTIKEHI (MKA). Reageerivad vaid ühe epitoobiga antigeeni molekulis. On identsed antikehad, toodetakse ühe klooni poolt. B-RAKKUDE ARENG hõlmab kahte faasi: 1) AG-sõltumatu B-rakkude küpsemise faas luuüdis; 2) küpsete B-rakkude antigeenist sõltuv aktivatsioon ja differentseerumine perifeerias, mille tulemusena tekivad antikehi sekreteerivad plasmarakud ja mälu B-rakud. B-rakkude areng saab alguse lümfoidsetest tüvirakkudest, need prolifereeruvad ja differentseeruvad pro-B
ja suudab leida ühe raku tuhandete teiste seast. Näiteks kui antikeha spetsiifilisele kindlale rakupinna molekulile ühendatakse fluorestsents värv, siis iga rakk, mis seda molekuli kannab, seondub antikehale ja eraldatakse teistest rakkudest, kui see fluorestseerub. Peale sorteerimist saab eraldatud rakku kasvatada kultuuris. FACS-i kasutatakse tavaliselt, et puhastada erinevat tüüpi valgeid vererakke, millest igaüks kannab oma pinnal üht või enamat eristuvad valku ja seetõttu seob monoklonaalseid antikehasid, mis on sellele spetsiifiliselt. Ainult T rakud immuunnsüsteemis omavad nii CD3 kui ka Thyl2 valke. Nende olemasolu muudab T-rakud teistest vererakkudest või põrnarakkudest kergesti eristatavaks. Varieerides monoklonaalsete antikehade kasutamist rakkude eristamisel, kaetakse väikesed magnetilised tilgad 54
annaabi.ee 
