Varieerub fosfataasi kontsentratsioon, teised parameetrid on konstantsed. Töö käik: Eppendorf tuubi segasin puhverlahuse(pH=9,5), MilliQ vee ja pNPP. Inkubeerisin 2 minutit ning seejärel lisasin ensüümi (120 000x lahjendus) ning inkubeerisin 15 minutit. Reaktsiooni lõpetasin 0,1 M NaOH lisamisega. Seejärel määrasime optilise tiheduse 410 nm juures. Andmed: A=0,059 Ao=1 Co=1mg/ml Küveti laius: l=0,5 cm Ekstinktsioonikoefitsent: ε410 nm=18400 M-1cm-1 Reaktsiooniaeg: t=15 min Arvutused: Produkti kontsentratsiooni arvutan optilise tiheduse järgi (Lambert-Beeri A seadus A=C produkt ∗ε∗l ) = > C produkt = , ε = 18400 M-1/cm-1) ja ε∗l reaktsiooni kiiruse ( v =C produkt /t ) Selleks, et koostada graafik teljestikus v/E, pean leidma E ehk ensüümi
39 2 7800 8200 0 6300 0 3300 4900 0 30500 40 Minimeeritav eesmärk 3 0 4800 0 0 0 4400 5600 3600 18400 41 Kogukulu 40300 4 0 0 8000 5000 6800 0 6700 4200 30700 42 5 7200 6400 0 3900 6400 2800 0 3000 29700
22.01.2010 Kadak Priit Tali tamm 5 111 24.01.2010 Karu Salme Tali mänd 5 179 25.01.2010 Meigas Reijo Abja saar 3 92 26.01.2010 Kadak Priit Tali saar 1 203 28.01.2010 Karu Salme Tali lepp 2 283 30.01.2010 Karu Salme Tali kask 4 287 20100 4533460 hind maksumus 910 92820 800 63200 710 144130 1130 148030 620 32240 780 65520 800 18400 1240 50840 760 68400 830 258960 720 16560 1080 898560 1120 482720 800 672000 1010 122210 800 160800 850 290700 1050 116550 720 128880 910 83720 1010 205030 740 209420 710 203770 Koondid - kogus ja maksumus müüjate lõikes Müüja Kogus Maksumus kogus Kaasik Reijo 84 65520 >300 Meigas Reijo 115 102120 Mikson Aarne 0 0 Muld Reijo 0 0
1997 1 1 3900 2 2 4000 3 3 3900 4 4 3700 3875 1998 1 5 4700 4075 1 15500 2 6 5000 4325 2 18500 3 7 4200 4400 3 18400 4 8 4600 4625 4 18700 1999 1 9 4000 4450 5 25100 2 10 4700 4375 6 32500 3 11 4300 4400 7 36700 4 12 5400 4600 8 46900 2000 1 13 4100 4625 2005
Aluselise fosfataasi aktiivsuse määramiseks kasutatakse kromogeenset substraati p- nitrofenüülfosfaati (pNPP), mille hüdrolüüsi on võimalik kvantitatiivselt jälgida. Ensüümreaktsiooni käigus hüdrolüüsitakse pNPP p-nitrofenooliks ja anorgaaniliseks fosfaadiks. Protoneeritud vormis p-nitrofenool ei neela nähtavat valgust, kuid aluselises keskkonnas deprotoneeritud vormis (p-nitrofenolaat) neelab intensiivselt valgust lainepikkustel 400-415 nm (ekstinktsioonikoefitsient 410 = 18400 M-1cm-1). Kuivõrd pNPP neelab ainult spektri ultraviolettpiirkonnas (vt joonis 2), saab spektrofotomeetri abil jälgida p- nitrofenolaadi tekkimist ning määrata reaktsiooni toimumise kiiruse. Antud töös kasutatakse peatatud reaktsiooni meetodit, kus reaktsioon lõpetatakse NaOH lisamise teel. Tekkinud produkti hulga/kontsentratsiooni arvutamiseks määratakse optiline tihedus lainepikkusel 410 nm. 1)ENSÜÜMI KONTSENTRATSIOONI (E) MÕJU REAKTSIOONI KIIRUSELE (v)
tellis 120 × 65 Puit- 50 × 50 375 110 270 69 20 426 720 klots × 150 Paekivi d = 50, 98,17 245 255 4,08 10,19 2495,7 2507,5 h = 50 Silikaat- 250 × 2640 5100 5600 9,8 18,9 1931,8 2121,2 tellis 120 × 88 Betoon 20 × 20 8000 18400 19100 3,8 8,75 2300 2387,5 × 20 TÖÖ NR.3 PUIDU SURVETUGEVUSE MÄÄRAMINE PIKI KIUDU Survetugevuse määramiseks kasutatakse proovikehasid ristlõike mõõtmetega 40 ×40 mm ja pikkusega kiu suunas 60 mm. Proovikeha ristlõike mõõtmed mõõdetakse veaga mitte üle 0,1 mm. Katsetamisel koormatakse proovikeha ühtlaselt ja sellise kiirusega, et ta puruneks 1 ± 0,5 minuti pärast peale koormamise algust.
Pan-sool 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 98 22800 ### 43 1000 100 360 0,89 Puljongipulber 125 20 3 - 4 4 - 0 0 0 - 0,05 0,33 12,5 - - - - 68 18400 1700 60 120 430 - 2,9 Kartulitärklis 341 1 0 0 0 83 0 1,4 0 0 0 0,01 0 0,33 0,08 0,01 - 0 0,29 3,5 60 18 7,6 72 4 0,61
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 99 39600 37 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 98 22800 13000 0 0 - 0,05 0,33 12,5 - - - - - - 68 18400 1700 0 0 0 0,01 0 0,33 0,08 0,01 - - - 0 0,29 3,5 60 0 0 0,2 0,71 1,7 13 0,6 0 1250 3,5 60 0 2,4 16 610 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 20 89
- 0,01 0 0 VITAMIIN B12, µg 0 - - 1250 0 FOOLHAPE, µg - - 3,5 0 PANT, HAPE, mg 0,4 - - 60 0 BIOTIIN, µg - 0 0 0 VITAMIIN C, mg 0 68 0,29 2,4 0 TUHK, g 11 18400 3,5 16 20 NAATRIUM, mg 100 1700 60 610 89 KAALIUM, mg 3900 60 18 25 15 KALTStUM, mg 170 120 7,6 59 22 MAGNEESIUM, mg 410 430 72 390 32 FOSFOR, mg 400 200 10 - 19 VÄÄVEL, mg 190
2525 18340 6/17/2011 Medium 28 2526 18341 7/18/2010 Critical 39 2527 18368 11/30/2012 Not Specified 3 2528 18368 11/30/2012 Not Specified 35 2529 18368 11/30/2012 Not Specified 3 2530 18370 1/13/2011 Low 41 2531 18371 9/18/2009 Medium 30 2532 18373 4/12/2012 Critical 35 2533 18374 9/30/2012 Low 21 2534 18375 9/22/2011 Low 20 2535 18400 12/6/2011 Not Specified 29 2536 18402 8/29/2009 Low 5 2537 18402 8/29/2009 Low 3 2538 18405 1/7/2009 Medium 30 2539 18405 1/7/2009 Medium 2 2540 18432 3/12/2011 High 42 2541 18432 3/12/2011 High 15 2542 18432 3/12/2011 High 5 2543 18432 3/12/2011 High 12 2544 18464 3/28/2012 High 27 2545 18464 3/28/2012 High 37