Kasutades samu lahutustingimusi viia läbi analüüs tundmatu seguga (teha 3 paralleeli). Tarkvaraabil määrata piigide retentsiooniaeg, pindala (A) ja piigi laius nulljoone juures. Arvutada keskmine väärtus, standardhälve ja suhteline standardhälve retentsiooniaja ja pindala väärtusele. Kasutades alkaanide ja segu retentsiooniajade väärtusi, arvutada igale tundmatu piigile RI. Võrrelda neid ja identifitseerida segu komponendid (vt Tabel 1). OSA 3 – Kromatograafiliste parameetrite arvutamine Arvutada kõik võimalikud kromatograafilised parameetrid segu 2 ja 3 piigi jaoks (valemid juhendis 1, 3-7). OSA 4 – Segu kvantitatiivne analüüs Kasutades andmeid osast 2.2., arvutada segu iga põhikomponendi %-sisaldust proovis (juhendis valem 11). Tabel 1. Mõningate ainete retentsiooniindeksid (RI) DB-1 kolonniga (kandegaas H2) 3 Tulemused 3
2) RI = 100 ∙ 8+100 ( 855 ¿¿ ( 4,777−4,099 ) aineaeg−t R 8 ) 3) RI =100 ∙ 8+100 ( 865 ¿¿ 3 4 3.3. Kromatograafiliste parameetrite arvutamine Pii Mahtuvustegu Efektiivsus Teor.tald.kõrgus Lahutuvus Selektiivsus k r 2 0,97 44288 6,8 ∙ 10–4 m 0,74 1,03 3 1,00 32979 9,1 ∙ 10–4 m Mahtuvustegur (k’): tR2 = 4,472 min; t0 = 2,27 min k’= (tR – t0) / t0 = (4,472 – 2,27) / 2,27 = 0,97 Efektiivsus (N):
tRZ) 4,408 - 3,336 2 = 100 8 + 100 [ ] = 880,179 880 4,673 - 3,336 3) Kolmas aine piik asub kromatogrammil nonaani (C9) ja dekaani (C10) vahel, kus tR9 ja tR10 on nonaani ja dekaani retentsiooniajad (aine aeg - tRZ) 4,8687-4,673 3 = 100 9 + 100 [ 6,181-4,673 ] = 912,905913 3.3. Kromatograafiliste parameetrite arvutamine Piik Mahtuvustegur Efektiivsus Teor.tald.kõrgus Lahutuvus Selektiivsus 2 3,408 16468 0,00182 11,862 1,14 3 3,382 23660 0,00127 Mahtuvustegur e. retentsiooni faktor k' - 0 = 0 4,408 - 1,111 2 = = 3,408 1,111 4,8687 - 1,111 3 = = 3,382 1,111 Kolonni efektiivsust 2 = 5,54 ( )
163 200 0 0 5 10 15 20 25 30 35 Kontsentratsioon [μg/mL]μg/mL]g/mL] Graafik 2. Kofeiini kalibratsioonigraafik. Kalibratsioonivõrrandid: teobromiiin y = 60.133x - 21.272 kofeiin y = 57.885x - 15.863 3.2. Kromatograafiliste parameetrite arvutamine (T – teobromiin, K-kofeiin) (arvutatud kasutades analüüsi tulemusi, mis olid saadud kontsentratsiooniga 10 μg/mL (ruumala 1mL)g/mL) Algandmed: Surnud aeg, t0 = 2,332 min Retensiooniaeg, tR, min Piigi laius, min Teobromiin 2,67 0,105
Liikuvaks faasiks on (erinevalt gaaskromatograafias kasutatavast gaasist) vedelik, mida nimetatakse eluendiks. Olenevalt analüütide omadustest, kasutatakse vedelikkromatograafias erinevaid detektoreid Detektorid: · UVVIS ( ultravioleti või nähtava valguse), · elektrokeemiline, · massspektromeetriline, · konduktomeetriline, · RI, · Fluorestsents http://www.ttk.ee/~laine/kromatograafia/vedelikkromatograafia_tphimte.html Vedelik-kromatograafiliste ja massispektromeetriliste (LC-MS) ning ioonkromatograafiliste metoodikate arendamine saasteainete määramiseks mitmesugustes maatriksites. See on rakenduslik uurimissuund, milles suur osa tööd käib mitmesuguste koostööprojektide raames. Koostöös Soome Tollilaboriga juurutati metoodika 14 pestitsiidijäägi analüüsiks puu- ja köögiviljades ning akrediteeriti see. Pestitsiidijääkide määramise alal on käimas terve rida
Spetsiifilised: permanganaat ise ja tärklis joodiga. Üldised redoksindikaatorid reageerivad lahuse redokspotentsiaalile, nt ferroiin. Spetsiifilised redoksindikaatorid reageerivad lahuses olevatele konkreetsetele ainetele, nt KMnO4 (mis on ise indikaatoriks) ja tärklis (spetsiifiline joodi määramiseks). SISSEJUHATUS KROMATOGRAAFILISTESSE ANALÜÜSI¬MEETODITESSE 104. Kromatograafia põhimõte ja kromatograafiliste meetodite jaotus Kromatograafia on meetodite grupp ainete eraldamiseks teineteisest. Ained eraldatakse adsorptsiooni- või jaotusomaduste erinevuste järgi. Moodsamad seadmed ka mõõdavad vastava aine sisalduse proovis. Põhimõte mobiilne faas kannab erinevaid aineid läbi statsionaarse faasi erineva kiirusega, mistõttu ained eralduvad. Jaotus mobiilse faasi järgi: vedelik- ja gaasikromatograafia. Jaotus vastasmõju järgi: adsorptsioon-, jaotus-, ioonkromatograafia, ...
annaabi.ee 
