käitlemisel rangete hügieenireeglite järgimine, toitude kuumutamine vähemalt 60 kraadini Celsiuse järgi, vähendavad kõik märgatavalt noroviiruse levikut ja nakatumisvõimalust. Ainuüksi regulaarne kätepesemine vee ja seebiga vähendab haigestumisi soolenakkustesse enam kui kolmandiku võrra. Saastunud pinnad puhastada ja desinfitseerida, kasutades kloorisisaldavat puhastusvahendit. Viirusega saastunud riided ja voodipesu pesta, kasutades kuuma vett ja detergenti. WC pott ja selle ümbrus hoida puhtana. Noroviirusega nakatunud isikud ei tohi valmistada toitu haigusnähtude esinemise ajal kuni kolm päeva pärast haigusest paranemist. Iseseisev töö II osa Õendusplaan Õendus probleem Kõhulahtisus, nõrkus, janu, oksendamine 1. Õendusdiagnoos Kõhulahtisus, mi on põhjustatud viirusinfektsioonist ja mis väljendub kõhuvalus, vedelas väljaheites üle kolme korra päevas ja pakilises roojamisvajaduses. 2. Õendusdiagnoos
surnud naharakke, sammuti vajadusel valmistada nahka ette paiksetele ravivahenditele. Paljudel inimestel on väärettekujutus, et nad peavad nahka "sügavpuhastama" ja eemaldama kogu rasu. Sellisel juhul eemaldatakse ka kogu nahka kaitsev lipiidkiht ja nahk muutub väga kuivaks. Enamus standardseid kehaseepe on liigselt kuivatavad näole. Näo pesemiseks eelistage seebivaba, mitte-kuivatavat, niiskust säilitavat puhastusvahendit. Isegi tooted tundlikule nahale võivad mõnikord sisaldada detergenti, mis liialt kuivatab nahka. Juhul, kui toode osutub liialt niisutavaks, jättes naha "libedaks", võib kasutada vahtusid. Vahud jätavad sageli värskema ja puhtama tunde. Kuivale ja tundlikule nahale sobivad lipiidsemad puhastajad, mis sisaldavad kas tsetüülalkoholi, veebaasilisi kreeme või vanniõlisid. Aknele kalduva, probleemse naha puhastajatesse on mõnikord lisatud salitsüülhapet, benzoüülperoksiidi või antibakteriaalseid aineid, mis omavad kas
15ml falkon tuub 2,4 ÷ 0,2=12 1,5 ml tuubid PCR plaadi tükk Töö käik: Teen 15-ml falkon tuubi 5,5ml 30% homogeenset pesuvahendilahust Võtan kaks 1,5ml- tuubi ning pipeteerin mõlemasse 1,55ml lahust. Pipeteerin alles jäänud lahuse 200µl kaupa PCR plaadi aukudesse. Tulemus: Sain 7,5 auku täidetud, kuigi oleks pidanud jätkuma 12 tuubi jaoks. Viga tuli sellest, et detergenti pipeteerides jäid sisse õhumullid, mida tegelikkuses ei oleks tohtinud seal olla. II HARJUTUS Eesmärk: Õppida silma järgi hindama pipeteeritava koguse mahtu. Materjalid: Erinevate veekogustega tuubulid Töö käik: Esimeses tuubulis on 200µl Hinnata silmaga, mis kogused on järgnevates tuubulites. Tulemused: Minu arvatud Tegelik 200 µl
c) geelfiltratsioon-kromatograafia-vastavalt valgumolekuli suurusele d) afiinsuskromatograafia-vastavalt valkude interaktsioonidele 3. Elektroforees, SDS-PAGE põhimõte, isoelektriline fokuseerimine, 2D elektroforees, valgu sõrmejälg Elektroforees- laetud molekulide liikumine elektriväljas, viiakse läbi pooltahkes keskkonnas – geelis e) SDS-PAGE – geelelektrofereesi meetod, kasutatakse ioonset detergenti SDS (sodium dodecylsulfate). Valgud denatureeritakse ja „laetakse“ SDS molekulidega (SDS’l on negatiivne laeng ja on võimeline katma suvalisi valgu molekule. Valgu pinnale tekib tugev negatiivse laenguga kate. SDS molekule on kattes nii palju, et valgule endale iseloomulik laeng tähtsust enam ei oma), sellisel juhul sõltub liikumiskiirus vaid molekuli suurusest. f) Isoelektriliseks fokuseerimiseks (IEF) – valkude lahutamist elektriväljas
Tallinna Tehnikaülikool Matemaatika-Loodusteaduskond Geenitehnoloogia Instituut Molekulaar- ja rakubioloogia praktikum Aruanne Koostanud: Luise Tiks YASB61 112332 Tallinn 2014 Pipeteerimine Harjutus 1 1 ml pipetti kasutades pipeteerisin 15-ml falconisse 1,65 ml detergenti, 3,85 ml vett (kokku 5,5 ml 30% lahust). Detergendi pipeteerimiseks kasutasin pahupidi tehnikat. Pipeteerisin kahte eppendorfi 1,55 ml lahust, allesjäänud 2,4 ml pipeteerisin 200 l kaupa eppendorfidesse sain 11 ja pool eppendorfi. Harjutus 2 Hindasin silmaga vee koguseid: 1. 200 l 2. 60 l 3. 100 l 4. 20 l 5. 7 l 6. 90 l 7. 40 l 8. 150 l Hinnangud polnud küll päris täpsed, aga siiski küllaltki lähedased. Harjutus 3
103. RNAd kasutatakse enamasti cDNA sünteesiks ja seda omakorda amplifitseeritakse, et määrata erinevate mRNA-de ekspressioonitasemeid rakkudes. 104. 105. Valkude eraldamine imetajarakkudest 106. Valkude eraldamiseks lüüsitakse rakud pehmemates tingimustes kui DNA eraldamisel. Lüüsipuhver peab sisaldama puhverdavaid aineid, mis hoiavad pH enam-vähem neutraalse (Tris-HCl, HEPES-NaOH), NaCl osmootse tasakaalu säilitamiseks (100-500 mM), detergenti membraanide lahustamiseks (SDS, Triton X-100, NP-40), lisaks veel glütserooli, vajadusel EDTA-d või muid lisandeid. Lüüsipuhvri koostis sõltub sellest, milliseid valke täpselt uurida soovitakse. 107. Saadud valgulüsaati kasutatakse edasi n. immuunosadestamiseks, Western blotiks, ELISA analüüsiks. 1. Valmistada 15 ml tuubi 5 ml lüüsipuhvrit. Segada: 250 μl 1M Tris-HCl, 150 μl 5M NaCl,
kergesti. RNAd kasutatakse enamasti cDNA sünteesiks ja seda omakorda amplifitseeritakse, et määrata erinevate mRNA-de ekspressioonitasemeid rakkudes (qPCR). Valkude eraldamine imetajarakkudest Valkude eraldamiseks lüüsitakse rakud pehmemates tingimustes kui DNA eraldamisel. Lüüsipuhver peab sisaldama puhverdavaid aineid, mis hoiavad pH enam-vähem neutraalse (Tris-HCl, HEPES-NaOH), NaCl osmootse tasakaalu säilitamiseks (100-500 mM), detergenti membraanide lahustamiseks (SDS, Triton X-100, NP-40), lisaks veel glütserooli, vajadusel EDTA-d või muid lisandeid. Lüüsipuhvri koostis sõltub sellest, milliseid valke täpselt uurida soovitakse. Saadud valgulüsaati kasutatakse edasi n. immuunosadestamiseks, Western blotiks, ELISA analüüsiks. Lüüsipuhvri valmistamine Segada omavahel 15 ml tuubis: 250 μl 1M Tris-HCl lõppkonts. 50 mM, 150 μl 5M NaCl (lõppkonts. 150 mM)
näitajate muutust. Töödeldud esemed ei tohi avaldada toksilist mõju. Puhastamine (sanitatsioon) protsess, mis eemaldab esemetelt võõrained (muld, orgaaniline materjal, mikroorganismid). Puhastamine on kogu aseptilise tegevuse alus. Puhastatud pind on visuaalselt puhas. Puhastamine peab eelnema desinfektsioonile ja sterilisatsioonile. Puhastamisel kasutatakse tavaliselt vett, mehhaanilist mõju ja detergenti. Puhastada võib käsitsi või mehhaaniliselt (masinaga). Puhastatud esemetele jääb alles teatud hulk mikroobe, mis soodsates tingimustes hakkavad paljunema. Desinfektsioon protsess, mis elututel esemetel või naha pinnal hävitab või vähendab patogeensete mikroobide arvu (mitte eoseid!), olles samal ajal tervisele kahjutu. Desinfektsioon ei ole küllaldane nende instrumentide jaoks, millega läbistatakse patsiendi nahka või limaskesti
annaabi.ee 
