vajalike ainete tootmiseks ning organismide sigimise ja pärilikkuse muutmiseks · Antibiootikumide tootmine: takistavad valgusünteesi, rakukesta sünteesi, DNA replikatsiooni, raku membraani lagundamine. Enimakasutatav aktinomütseedid(tetratsükliin) · DNA replikatsioon- DNA kahekordistumine · Kirby-Baueri meetod: ühe bakteriliigi külv Petri tassile, erinevate toimemehhanismidega antibiootikumide lisamine sektoriks jagatud lõikudele, bakterikultuuri kasvatamine termostaadis, erinevate antibiootikumide mõju hindamine antibiootikumide ümber tekkinud puhta ala suurusel alusel · Bakterite abil toodetakse vitamiine; aminohappeid(lõhna- ja maitsetugevdajaid- naatriumglutanaat), toidupaksendajatena(majonees) · Bakterite poolt toodetud ensüümid pesupulbrites lagundavad valke, tärklist ja rasvu · Bakterite ensüüme kasutatakse geenide transpordil(molekulaarbioloogias) · Viirusresistentsete taimede saamine
nende kasv vähenes suhkrusisalduse kasvades järsult. 40% suhkrulahuses Pseudomonas ei kasvanud üldse ning Bacillus kasvas äärmiselt vähe. Saccharomyces cerevisae kasv oli 20%-ses suhkrulahuses kiirem kui 0%-ses lahuses, seega võib teda pidada osmofiiliks. Samas suhkrusisalduse kasvades 40 %-ni Saccharomycese kasv vähenes uuesti. Temperatuuri mõju: Vaatluse tulemusena võib öelda, et kõik kolm uuritavat kultuuri (2 bakterikultuuri ja 1 pärmikultuur) eelistasid kasvamiseks sama temperatuuri. Nii Bacillus sp Ps 42 kui ka Pseudomonas sp 105 optimaalne kasvutemperatuur jäi 20oC ja 35oC vahele, nende temperatuuride juures oli kasv võrdselt suur. Mingil määral toimus kasv ka 5 oC, 50oC juures kultuurid ei kasvanud. Seega võib öelda, et nende näol on tegemist mesofiilidega, kuna nende temperatuuri optimum on vahemikus 20-35 oC. Ka Saccharomyces cerevisiae optimaalsed temperatuurid kasvuks olid 20 oC ja 35 oC. 35 oC
Preparaadid surmatud mikroorganismidest Rakkude kuju, asetuse, ehituse jm parameetrite kindlakstegemiseks uuritakse põhiliselt surnud mikroorganisme. Äigepreparaadi valmistamine Hästipuhastatud, rasvavabale esemeklaasile tehakse 1 - 5 preparaati. Põletileegis kuumutatud külviaasaga võetakse katseklaasist aseptiliselt tilk steriilset vett ja viiakse esemeklaasile. Tahkel söötmel kasvanud preparaadist võetakse steriilse külviaasaga veidi bakterikultuuri ning viiakse see esemeklaasil asuvasse veetilka ja segatakse hoolikalt. Vedelsöötmes oleva kultuuri puhul võetakse kuumutatud külviaasaga aseptiliselt tilk söödet esemeklaasile. Preparaati - õhukese suspensioonikihiga kaetud umbes 1 cm diameetriga ümarat laiku - kuivatatakse toatemperatuuril õhu käes. Vältida tuleb tugevat kuumutamist, sest termilisel töötlemisel valk denatureerub ja rakkude struktuur võib muutuda. Kuiv preparaat fikseeritakse, et
Campylobacter jejuni Termofiilsete kampülobakterite isoleerimisviis sõltub põhiliselt proovi tüübist ja oletatavast kampülobakteriga saastumise astmest. Proovid linnulihast või mõnest teisest kõrgelt saastunud allikast võib külvata otse selektiivagarile. Vähesel määral saastunud proove tuleb eelnevalt rikastada selektiivses puljongis. Värsket liha rikastatakse Prestoni puljongis. Külmutatud või kuivatatud liha rikastamiseks ning kahjustatud bakterikultuuri elustamiseks soovitatakse Parki ja Sandersi puljongit. Inokuleeritud puljongit, mis sisaldab vankomütsiini ja trimetoprimi, inkubeeritakse 44 3132 °C juures 4 tundi. Sellele järgneb tsefoperasooni ja tsükloheksimiidi lisamine ning inkubeerimine 37 °C juures 2 tundi. Seejärel tõstetakse temperatuur 42 kraadini ja inkubeeritakse 4042 tundi. Mõlemad inkubeerimised (rikastamise puljong ja plaadid) peavad toimuma atmosfääris, kus on 5-7% hapnikku, 10%
Rakkude kasvukiirust väljendatakse generatsiooniajaga ehk ajaga, mille jooksul bakterite arvukus kahekordistub. G generatsiooniaeg, t aeg, n generatsiooni arv t G= n G generatsiooniaeg, t aeg, B bakterite arv ajaintervalli alguses, b bakterite arv ajaintervalli lõpus 5 t G= b 3,3 log B Bakterikultuuri kasvukiirus sõltub kasvutingimustest. Näiteks E. coli generatsiooniaeg laboris kasvata-des on 15 20 minutit, kuid looduslikes tingimustes (imetajate soolestikus) on generatsiooniaeg 12 24 tundi. Üldiselt jääb kultiveeritavate bakterite generatsiooniaeg laboritingimustes 15 minuti ja 1 tunni vahele. Sümbiontsetel bakteritel nagu Rhizobium on generatsiooniaeg pikem. Patogeenidel, nagu Mycobacterium tuberculosis ja Treponema pallidum on generatsiooniaeg eriti pikk.
GASP mutatsioonide geneetiline tagapõhi. GASP fenotüübi tagas just sigma faktori osaline funktsiooni kadu. Mutandid, kus RpoS on täielikult inaktiveeritud, GASP fenotüüpi ei oma. RpoS osalist funktsiooni kadu mutatsioonide tõttu rpoS geenis on täheldatud ka paljudel looduslikel isolaatidel. Eraldi tasub rõhutada, et rpoS geenis toimunud mutatsioonidest põhjustatud GASP fenotüüp ilmneb bakteritel ainult teatud kasvutingimustel (rikas aereeritud sööde). Bakterikultuuri vananedes ilmuvad uued GASP mutandid, mis sisaldavad lisaks rpoS mutatsioonidele mutatsioone ka teistes alleelides. Nii on leitud mutatsioonid geenides sgaA, sgaB ja sgaC (stationary-phase growth advantage). Kõik need mutandid kasvavad võrreldes metsiktüüpi rakkudega kiiremini teatud aminohapetel, kasutades neid C-allikana. Erinevad mutandid eelistavad kasvuks erinevaid aminohappeid. Aminohapete katabolismiradade ekspressioonitaseme tõus võimaldab mutantidel kasutada
(statsionaarse faasi-spetsiifiline sigama faktor) aktiivsus. GASP fenotüübi tagas just sigma faktori osaline funktsiooni kadu. Mutandid, kus RpoS on täielikult inaktiveeritud, GASP fenotüüpi ei oma. RpoS osalist funktsiooni kadu mutatsioonide tõttu rpoS geenis on täheldatud ka paljudel looduslikel isolaatidel. Eraldi tasub rõhutada, et rpoS geenis toimunud mutatsioonidest põhjustatud GASP fenotüüp ilmneb bakteritel ainult teatud kasvutingimustel (rikas aereeritud sööde). Bakterikultuuri vananedes ilmuvad uued GASP mutandid, mis sisaldavad lisaks rpoS mutatsioonidele mutatsioone ka teistes alleelides. Nii on leitud mutatsioonid geenides sgaA, sgaB ja sgaC (stationary-phase growth advantage). Kõik need mutandid kasvavad võrreldes metsiktüüpi rakkudega kiiremini teatud aminohapetel, kasutades neid C-allikana. Erinevad mutandid eelistavad kasvuks erinevaid aminohappeid. Aminohapete katabolismiradade ekspressioonitaseme tõus võimaldab mutantidel kasutada efektiivsemalt
võimaldab huvipakkuva tunnuse osas bakteripopulatsioonis korraga läbi testida palju individuaalseid rakke. Kui külvata piisavalt lahjendatud bakterikultuur tardsöötmele, moodustuvad sinna bakterikolooniad (iga bakterikoloonia agarsöötmel on ühe bakteriraku järglaskond). Jäljendkülvi abil on võimalik testida näiteks ka seda, kas bakteripopulatsioonis oli streptomütsiini resistentseid mutante enne bakterite kokkupuutumist streptomütsiiniga. Bakterikultuuri lahjendatakse sellisel määral, et lahjendatud kultuuri viimisel Petri tassil olevale tardsöötmele (agarsöötmele) moodustub ligikaudu paarsada üksikkolooniat. Külve tehakse paljudele Petri tassidele ja nii saadakse testimiseks palju üksikkolooniaid. Kolooniatega tembeldatakse steriilset sametit (kolooniatega Petri tass surutakse vastu sametit, iga koloonia puutub kokku sameti pinnaga ja jätab
võimaldab huvipakkuva tunnuse osas bakteripopulatsioonis korraga läbi testida palju individuaalseid rakke. Kui külvata piisavalt lahjendatud bakterikultuur tardsöötmele, moodustuvad sinna bakterikolooniad (iga bakterikoloonia agarsöötmel on ühe bakteriraku järglaskond). Jäljendkülvi abil on võimalik testida näiteks ka seda, kas bakteripopulatsioonis oli streptomütsiini resistentseid mutante enne bakterite kokkupuutumist streptomütsiiniga. Bakterikultuuri lahjendatakse sellisel määral, et lahjendatud kultuuri viimisel Petri tassil olevale tardsöötmele (agarsöötmele) moodustub ligikaudu paarsada üksikkolooniat. Külve tehakse paljudele Petri tassidele ja nii saadakse testimiseks palju üksikkolooniaid. Kolooniatega tembeldatakse steriilset sametit (kolooniatega Petri tass surutakse vastu sametit, iga koloonia puutub kokku sameti pinnaga ja jätab
annaabi.ee 
