· + 2ml Molischi reaktiivi, segatakse · + 1ml H2SO4 NB! Hape peab voolama mööda katseklaasi külge selle põhja uuritava lahuse alla, kusjuures happe ja proovi segunemist tuleb hoolikalt vältida! Tulemuste analüüs ja kokkuvõte: Reaktsioonisegu muutus roosaks. See tähendab, et lahuses oli süsivesikud, mis reageerisid Molchi reaktiiviga, mille tulemusena tekkis purpurne kondensatsiooni produkt. Molchi test aitab detekteerima süsivesikud lahustes. 1.2.2 Osasoonide saamine. Teoreetilised alused: Osasoonid redutseeriva suhkru ja kahe molekuli fenüülhüdrasiini liitumise produkt. Kristallide kuju ja sulamistemperatuur on lähtesuhkrule iseloomulikud. Nende järgi võib suhkru identifitseerida. Töö käik: · Kahte klaasi valatakse 2ml erineva taandava suhkru (minu juhul glükoos ja laktoos) lahust.
lisasin fruktoosi(monosahhariid) ja maltoosi(oligosahhariid). 2 Lisasin mõlemasse katseklaasi 5-6 tilka Molisch'i reaktiivi, mis kujutab endast -naftooli lahust alkoholis. 3 Katseklaaside sisu loksutasin hoolikalt. 4 Hoides katseklaasi kaldasendis, lisasin ettevaatlikult tilkhaaval 1 ml kontsentreeritud väävelhapet. 5 Alumises kihis muutusid mõlemas katseklaasis lahused roosaks. Kahe kihi piirile tekkis must- lillakas kiht. Järeldus: Molchi test aitab detekteerima süsivesikud lahustes. Reaktsioonisegud muutusid roosaks. See tähendab, et lahustes oli süsivesikud, mis reageerisid Molchi reaktiiviga. Kontsentreeritud väävelhappe toimel nii sahharoos kui ka fruktoos dehürdreerus ja moodustas furfuraale ja 5- hüdroksümetüülfurfuraale, mis siis reageerisid edasi -naftooliga. Sellest andis tunnistust mõlemas katseklaasis tumeda purpurse kihi tege süsivesiku lahuse ja happe piirile. 1.2
Algkiirus produkti puhul . [P]0 on 0. Produkti puhul mõõdame väikest muutust 0 taustal, substraadi puhul mõõdame väikest muutust suurel taustal ([S0]). ALATI on parem vaadata väikest muutust väikesel taustal. Pideva jälgimisega meetodid x-teljel on t ja y-teljel on [P]. Täppide tihedus sõltub detektori ajalise lahutuvuse võimest (mis on ajavahemik, mille tagant on detektor võimeline detekteerima uut signaali). Meil on võimalik reaktsiooni kulgu otse reaktsiooni keskkonnast detekteerida. o Spektrofotomeetria o Fluoromeetria o Elektrokeemilised meetodid- võimaldavad pidevat jälgimist. Siin peab olema sobiv elektrood, millel toimub reaktsioon. Harvaesinevad, aga tundlikud meetodid. Astmelise jälgimisega meetodid Pole võimalik otse reaktsiooni segust detekteerida signaale, vaja välja võtta ajapunkte
Sööde sisaldab väga väikeses koguses (mikromolaarsetes kogustes) C-allikana kasutatavat kemoatraktanti. Kui viia ühte punkti söötme pinnale väike kogus (ligikaudu 107) rakke, kasutavad need lokaalse C-allika ära ning liiguvad seejärel edasi atraktandi kõrgema kontsentratsiooni suunas. Seal rakud paljunevad, kasutavad ära C-allika ning liiguvad jälle edasi. Nii moodustuvad rakkudest söötmele kontsentrilised ringid. Mutandid, mis ei ole võimelised kas liikuma või detekteerima kemoatraktanti, jäävad söötmel algsesse inokuleerimise kohta, moodustades seal väikese, teravalt piiritletud koloonia. MCP valkude kaudu kontrollitud kemotaksis enterobakteritel Mutante, mille viburid pöörlevad ainult ühes suunas ja ei ole mõjutatavad kemotaksise stiimulite kaudu, on hakatud tähistama Che- mutantidena (non-chemotactic mutants). Selle rühma mutandid on enamasti defektsed Che valkude CheA, CheW, CheY või CheZ suhtes. MCP-sõltuva kemotaksise response-
Sööde sisaldab väga väikeses koguses (mikromolaarsetes kogustes) C-allikana kasutatavat kemoatraktanti. Kui viia ühte punkti söötme pinnale väike kogus (ligikaudu 107) rakke, kasutavad need lokaalse C-allika ära ning liiguvad seejärel edasi atraktandi kõrgema kontsentratsiooni suunas. Seal rakud paljunevad, kasutavad ära C-allika ning liiguvad jälle edasi. Nii moodustuvad rakkudest söötmele kontsentrilised ringid. Mutandid, mis ei ole võimelised kas liikuma või detekteerima kemoatraktanti, jäävad söötmel algsesse inokuleerimise kohta, moodustades seal väikese, teravalt piiritletud koloonia. MCP valkude kaudu kontrollitud kemotaksis enterobakteritel Mutante, mille viburid pöörlevad ainult ühes suunas ja ei ole mõjutatavad kemotaksise stiimulite kaudu, on hakatud tähistama Che- mutantidena (non-chemotactic mutants). Selle rühma mutandid on enamasti defektsed Che valkude CheA, CheW, CheY või CheZ suhtes