taandavate suhkrute kontsentratsioon reaktsioonisegus. Invertaasi aktiivsus avaldatakse vedela ensüümipreparaadi korral mikrokatalites ensüümilahuse 1 ml kohta (kat/ml). 2. Töö käik Ensüümipreparaadist töölahuse valmistamine (vedelast ensüümipreparaadist) Lahustina kasutatakse atsetaatpuhvrit, mille pH = 4,8. Juhendaja etteantud andmetel tuli töölahust valmistada 5 ml, ehk teha vedelast invertiinist 50-kordne lahjendus. Automaatpipeti abil võtsin 100l invertiini ning lisasin 5-ml kriipsuni atsetaatpuhvrit. Sulgesin katseklaasi korgiga ning loksutasin, et kontsentratsioon ühtlustuks Ensüümireaktsiooni (sahharoosi hüdrolüüsi) läbiviimine · Võetakse 50 ml mahuga katseklaas, kuhu pipeteeritakse 25 ml substraati (7%-line sahharoosi lahus atsetaatpuhvris), katseklaas suletakse korgiga ja jäetakse vesitermostaati ~30 juurde soojenema.
9)Mõõta spekter ning määata korrelatsioontabelite abil neeldumismaksimumidele vastavad sidemete võnkumised 10) Pesta tableti tegemiseks kasutatud vahendid( v.a tabletihoidja) kraani all veega ning kuivatada hoolikalt 11) Tabletihoidja puhastada niiske vatiga ja kuivatada Vedela aine spektri mõõtmine 1) Puhta vedeliku spektri mõõtmiseks kasutada KBr plaate, mis lasevad IP-kiirgust läbi 2) NB! KBr plaadid kardavad niiskust( tuleb hoida servadest) ning purunevad kukkudes 3) Viia automaatpipeti abil ( millele on pandud ühekordseks kasutamiseks plastikots) uuritava aine tilk ühele KBr plaadile 4) Asetada servadest hoides teine KBr plaat peale nii, et plaatide vahe oleks ühtlaselt ilma õhumullideta vedelikuga täidetud 5) Asetada plaadid koos uuritava prooviga küvetihoidjasse 6) Fikseerida ühtlaselt reguleerimismutrite abil, et õhk ei pääseks KBr plaatide vahele( liiga kõvasti keerates võivad KBr plaadid katki minna)
0,02 M vasksulfaadi lahust. Protsessi käigus komplekseerub triloon-B uuesti Cu (II) ioonidega. Lahusesse lisatud indikaator mureksiid muutub rohekaks, kui vastav kompleks on tekkinud. Tiitrimisel toimuv reaktsioon: Tiitrimiseks kulunud vasksulfaadi lahuse mahu järgi leitakse kaliibrimissirgelt taandavate suhkrute kontsentratsioon reaktsioonisegus. Invertaasi aktiivsus avaldataks e mikrokatalites ensüümlahuse 1 ml kohta. Töö käik Ensüümpreparaadist töölahuse valmistamine Automaatpipeti abil viiakse gradueeritud katseklaasi 0,25 ml vedelat ensüümpreparaati. Katseklaas täidetakse 10 ml-ni puhverlahusega. Katseklaas suletakse korgiga ja loksutatakse kontsentratsiooni ühtlustamiseks. Ensüümreaktsiooni läbiviimine 50 ml katseklaasi pipetaaritakse 25 ml substraati: 7% sahharoosi lahus atsetaatpuhvris pH-ga 4,8. Katseklaas suletakse korgiga ning asetatakse 5-10 minutiks vesitermostaati soojenema.
värvuse muutumise järgi. Tiitrimisel: Tiitrimiseks kulunud lahuse hulga järgi leitakse kaliibrimissirgelt taandavate suhkrute kontsentratsioon reaktsioonisegus. Invertaasi aktiivsus avaldatakse vedela ensüümipreparaadi korral ja tahke ensüümipreparaadi korral. 1 mikrokatal ensüümi aktiivsuse ühik, mille puhul 1 sekudi jooksul juures produtseeritakse 1 mikromool produkti. Töö käik: Ensüümipreparaadist töölahuse valmistamine. · Doseerisin ensüümipreparaati sobiva automaatpipeti abil ja viisin otse lahuse valmistamiseks ettenähtud gradueeritud katseklaasi, kuhu lisasin sobiva lahjendusmäära saavutamiseks vajalik kogus puhvrit. Katseklaasi lisasin 0,5 ml invertiini lahust ja 9,5 ml atsetaati, et saavutada 20 kordne lahjendus. · Katseklaasi sulgesin korgiga ja loksutasin lahust kontsentratsiooni ühtlustamiseks. Ensüümireaktsiooni (sahharoosi hüdrolüüsi) läbiviimine.
tiivselt) lahuse valmistamiseks ettenähtud anumasse (reeglina gradueeritud katseklaasi) ja lisatakse vajalik puhvri kogus. Klaasi sisu segatakse umbes 5 min vältel ettevaatlikult 76 klaaspulgaga kuni ühtlase suspensiooni moodustumiseni. Selget lahust ei teki, kuna uuritakse tehnilist ensüümipreparaati, mis lisaks ensüümivalgule sisaldab muid valke ja täiteaineid. Vedelat ensüümipreparaati doseeritakse sobiva mõõt- või automaatpipeti abil ja viiakse otse lahuse valmistamiseks ettenähtud gradueeritud katseklaasi, kuhu lisatakse sobiva lahjendusmäära saavutamiseks vajalik kogus puhvrit. Katseklaas suletakse korgiga ja lahust loksutatakse kontsentratsiooni ühtlustamiseks. Ensüümireaktsiooni (sahharoosi hüdrolüüsi) läbiviimine · Võetakse 50 ml mahuga katseklaas, kuhu pipeteeritakse 25 ml substraati, milleks on 7%-line sahharoosi lahus atsetaatpuhvris pH väärtusega 4,8. Katseklaas varusta-
annaabi.ee 
