Võrdlesin uuritava lahuse neeldumisspektril esinevaid neeldumismaksimumide asukohti teatmeteostes leiduvate andmetega erinevate karotenoidide neeldumismaksimumide paiknemise kohta . Selgus, et antud tulemused on väga sarnased -karoteeni omadele (425; 451; 482 Karotenoidi sisalduse arvutamine (kvantitatiivne analüüs) Karotenoidi sisalduse arvutamiseks kasutatakse neeldumisspektri analüüsimisel saadud andmeid ehk neeldumismaksimumidele max vastavaid absorptisooni (A) väärtusi. Reeglina võetakse arvutamisel aluseks selline absorptsiooni väärtus, mis vastab neeldumisspektri kõige kõrgemale ,,tipule". Arvutus põhinebki nimetatud lainepikkusele max vastava A väärtuse ja samal lainepikkusel mõõdetud ekstinktsioonikoefitsiendi väärtuse suhtele. Karotenoidi sisaldus (K, mg%) uuritavas proovis arvutatakse vastavalt valemile: , kus A absorptsiooniväärtus, mis vastab aluseks valitud neeldumismaksimumile max
2 451,5 0,566 3 426,0 0,4587 -karoteen max 1 max 2 max 3 E% 1cm Heksaan 482 451 425 2650 Karotenoidi sisalduse arvutamine (kvantitatiivne analüüs) Karotenoidi sisalduse arvutamiseks kasutatakse neeldumisspektri analüüsimisel saadud andmeid ehk neeldumismaksimumidele max vastavaid absorptisooni (A) väärtusi. Reeglina võetakse arvutamisel aluseks selline absorptsiooni väärtus, mis vastab neeldumisspektri kõige kõrgemale ,,tipule". Arvutus põhinebki nimetatud lainepikkusele max vastava A väärtuse ja samal lainepikkusel mõõdetud ekstinktsioonikoefitsiendi väärtuse suhtele. Karotenoidi sisaldus (K, mg%) uuritavas proovis arvutatakse vastavalt valemile: , kus A absorptsiooniväärtus, mis vastab aluseks valitud neeldumismaksimumile
468 nm. Sellises suurusjärgus neeldumismaksimumid oleksid vastanud ksantofüllile neoksantiin, mille ekstinktsioonikoefitsent E1cm1%=2270. (Minu katse põhjal võib öelda, et neeldumismaksimumide vahemikud 453,5 nm ja 426,0 nm on õiges suurusjärgus ja vahemikus, kuid edasine tulemus ei klapi.) Karotenoidi sisalduse arvutamine (kvantitatiivne analüüs) Karotenoidi sisalduse arvutamiseks kasutatakse neeldumisspektri analüüsimisel saadud andmeid ehk neeldumismaksimumidele max vastavaid absorptisooni (A) väärtusi. Reeglina võetakse arvutamisel aluseks selline absorptsiooni väärtus, mis vastab neeldumisspektri kõige kõrgemale ,,tipule". Arvutus põhinebki nimetatud lainepikkusele max vastava A väärtuse ja samal lainepikkusel mõõdetud ekstinktsioonikoefitsiendi väärtuse suhtele. Kuna minu spektri analüüs ei tulnud suure ektrsahendi koguse võtmise tõttu välja, siis kasutan arvutustes ksantofüllile neoksantiin vastavat ekstinktsioonikoefitsenti väärtust ning lainepikkust.
Katseklaas nr 4 (C4 = 0,25 mg/mL) 0,1493 - 0,0135 = 0,1358 ABS Katseklaas nr 5 (C5 = 0,125 mg/mL) 0,0627 - 0,0135 = 0,0492 ABS Katseklaas nr 6 (C6 = 0,062 mg/mL) 0,0226 - 0,0135 = 0,0091 ABS Tabel . Katseandmed Kaliibrimisgraafiku koostamine ja glükoosi kontsentratsiooni kindlakstegemine Kaliibrimisgraafiku koostasin standardlahuse lahjendamisel saadud kindla glükoosikontsentratsiooniga proovide absorptisooni väärtuste alusel. Graafiku x-telg näitab glükoosi kontsentratsiooni ja y-telg proovi absorptsiooni väärtust. Kasutasin korrigeeritud absorptsiooni väärtuseid. Joonis . Kaliibrimisgraafik Paralleelproovide keskmine optiline tihedus: Kaliibrimissgraafikult leidsin, et sellele optilisele tihedusele vastab glükoosi kontsentratsioon: Cglükoos/sidrunimahl = 0,2206 mg/mL (25 korda lahjendatud lahuses) Tundmatu proovi glükoosisisaldus on seega:
optilise tiheduse näidu, siis korrigeerisin kõikide glükoosi sisaldavate lahuste optilise tiheduse väärtuseid, lahutades neist kontrollproovi optilise tiheduse väärtuse. Korrigeeritud väärtusi tuleb kasutada kalibreerimisgraafiku koostamisel. KALIBREERIMISGRAAFIKU KOOSTAMINE JA GLÜKOOSI KONTSENTRATSIOONI KINDLAKSTEGEMINE: Kalibreerimisgraafiku koostasin standardlahuse lahjendamisel saadud kindla glükoosi kontsentratsiooniga proovide absorptisooni väärtuste alusel. Graafiku x-telg näitab glükoosi kontsentratsiooni (C) ja y-telg proovi absorptsiooni väärtust (ABS). Excelisse sisestatud tabel: Glükoosi Optiline sisaldus tihedus (mg/ml) (ABS) 0 0 0,062 0,034 0,125 0,076 0,25 0,153 Saadud graafik: Sirge läbib põhimõtteliselt kõiki nelja punkti lineaarselt. GLÜKOOSI KONTSENTRATSIOONI KINDLAKSTEGEMINE:
Katseklaas nr 3 (II paralleelproov) 0,120 - 0,004 = 0,116 Katseklaas nr 4 (C4 = 0,25 mg/mL) 0,157 - 0,004 = 0,153 Katseklaas nr 5 (C5 = 0,125 mg/mL) 0,087 - 0,004 = 0,083 Katseklaas nr 6 (C6 = 0,062 mg/mL) 0,036 -0,004 = 0,032 Kaliibrimisgraafiku koostamine ja glükoosi kontsentratsiooni kindlakstegemine Kaliibrimisgraafiku koostasin standardlahuse lahjendamisel saadud kindla glükoosikontsentratsiooniga proovide absorptisooni väärtuste alusel. Graafiku x-telg näitab glükoosi kontsentratsiooni ja y-telg proovi absorptsiooni väärtust. Kaliibrimisgraafik Proovi absorptsiooni väärtus (A) 0.03 0.08 0.13 0.18 0.23 0.28 0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 Glükoosi konsentratsioon C mg/mL
annaabi.ee 
