0,310 0,155 Fraktsioonide analüüsimine Koostage kromotogramm, mille y-teljel on optiline tihedus ja x+teljel eluaadi maht, märkides ära Vminx, Vx ja Vmaxx asukohad. Rf(müoglobiin)=(46-26)/(72-26)=0,43 Järeldus: Segus sisaldunud komponendid väljusid niisuguses järjekorras, sest dekstraansisnine molekullmass on kõige suurem, ta väljus kolonnist esimisena. DNP-aspartaati molekullimass on kõige väiksem, ta liigub kolonnis aeglaselt.
taandavate suhkrute sisaldus mg/ml. · Leiame invertaasi aktiivuse A (µkat/g). Kasutame antud valemi: A=(C2-C1)* V1* V2 *103/T * 180 *V3 *V4*g Kus: C1-taandavate suhkrute sisaldus 0-proovis. C2-taandavate suhkrute sisaldus ajahetkel T võetud proovis (mg/ml) V1-reaktsioonisegu üldmaht (ml) V2-ensüümi töölahuse üldmaht (ml) T -hüdrolüüsi ketus (s) 180-glükoosi molekullmass V3 -proovi maht taandavate suhkrute määramiseks (ml) V4-ensüümireaktsiooni viidud invertaasi töölahusemaht (ml) g -ensüümiprepraati kaalutis (g) Töö tulemused! :D Proovi number Kuulunud CuSO4 Glyc mg/ml ml 0 (0 minutil võtnud) 2,3 2 1 (10 minutil) 12,6 11,1 2 (20 minutil) 23,3 18
A= Ctyr 103 V1 V2 2/t 181 V3 g Kus: Ctyr -türosiini kontsentratsiooni muudus valiud ajavahemikus (mg/ml) t -hüdrolüüsi kestus (s) V1 -reaktsoonisegu üldmaht (ml) V2-valmistatud ensümilahuse üldmaht (ml) 2 TKÄlahusest tingitud proovi lahjendus V3- ensüümi maht hüdrolüsisegus (ml) g - proteaasi preparaadi kaalutis (g) 181 türosiini molekullmass. Töö tulemused. Proovi number (0 minutil) Optiline tihedus lainepikusel Türosiini kontsentratsioon. 280 nm (ABS) (mg/ml) Proov 0 0,441 0,070 Proov 1 (5 minutil võetud) 0,545 0,086 Proov 2 (10 minutil) 0,660 0,105 Proov 3 (15 minutil) 0,840 0,133
pooridesse ja liikuvad kiiresti nende vahel. Kromatogrammi järgi me näeme,et dekstraansinise elueerimismaht V1 min=24ml 2) Müoglobiin. Absorbeerib lainepikkusel 410nm. Pruun värvus. Väljub teisena, kuna tol on väiksem molekulmass kui dekstraanil.V2=34ml 3) DNA DNP-Aspartaat. Absorbeerib lainepikkusel 360 nm. Kollane värvus. Väljub viimasena, kuna temal on kõige väiksem molekullmass, ja molekulid hästi mahuvad pooridesse, mis pidurdavad nende liikumist.V3max=74 ml.... Kui kõik on õigesti tehtud siis V3max ja arvutatud Vxmax peavad kokku langem. Arvutatud Vxmax on 74,9 ml.....siis kõik on õige. ·Arvutame liikuvusteguri Rf väärtus müoglobiini jaoks: Kasutame antud valemi Rf= Vx Vxmin / Vxmax -Vxmin Rf = 34-24/74-24= 0,2 Kokkuvõte: Antud eksperiment demonstreerib ainete segu lahutamise meetodi. Geelkromatograafia
Segu värvus tumepruuniks ning vastu valgust vaadates oli näha ülipeent sadet (sadet oli veidi keeruline näha, kuna NaOH liigse lisamise tõttu oli kogu lahus suhteliselt tume). Järeldus: Positiivne katse tulemus näitas, et munavalgus esineb tsüsteiini. 1.1.5 Valkude sadestamine trikloroäädikhappega Trikloroäädikhape (TKÄ) on valke denatureeriv ja väljasadestav regent, kuid see ei sadesta peptiide, mille molekullmass on alla 10000. TKÄ-d saab asutada valkude eraldamiseks madalmolekulaarsetest lämmastikühenditest. Töö käik: Valsin katseklaasi 1ml munavalgu lahust ja lisasin 2 tilka CCl3COOH lahust. Loksutasin ning selle tulemusena tekkis valge peen kolloidne sade. Järeldus: Kuna TKÄ toimel tekkis sade võib järeldada, et munavalgus sisaldub peptiide, mille molekulmass on üle 10000. 1.1.6 Valkude väljasoolastamine (globuliinide ja albumiinide eraldamine)
annaabi.ee 
