C1 taandavate suhkrute sisaldus 0-proovis, mg/ml, = 2 C2 taandavate suhkrute sisaldus ajahetkel T võetud proovis, mg/ml, =10,3 V1 reaktsioonisegu (hüdrolüüsisegu) üldmaht, ml, = 26 ml 10^3 tegur üleminekuks mikrogrammidele, T hüdrolüüsi kestus, s, 180 glükoosi molekulmass, V3 proovi maht taandavate suhkrute määramiseks, 1 ml, V4 ensüümireaktsiooni viidud invertaasi töölahuse maht, 1 ml, A1= ((10.3-2) x 26 x 1000 x 50) / ( 13 x 60 x 180 x 1 x 1) =76,9 mikrokatalit/ ml A2=((17,5-2) x 26 x 1000 x 50) / ( 24 x 60 x 180 x 1 x 1) =77,7 mikrokatalit/ ml Esimene hüdrolüüsi kestvuse viga oli umbes 3 minutit, teisel juhul umbes 1 minut. Ebatäpsused tulenesid mõõtmisvigadest ja 0-proovi aeglaselt võtmisest, mille tulemusena nihkusid ka teiste proovide ajad.
Türosiini juurdekasv on 0,0044 · CTyr türosiini kontsentratsiooni muutus ajavahemikus, · t valitud ajavahemik, 1 min = 60 s · V1 reaktsioonisegu üldmaht, 26 ml · V2 valmistatud ensüümilahuse üldmaht, 5 ml · V3 proovi maht hüdrolüüsisegus, 1 ml · g proteaasi preparaadi kaalutis, 7,6 mg = 0,0076 g Järeldus: Praktilise töö käigus õnnestus määrata kasutatava alkalaasiproovi aktiivsus, milleks on 13,8606 mikrokatalit grammi kohta. See tähendab, et 1 gramm alkalaasi hüdrolüüsib ühe sekundiga 30 kraadi juures 13,8606 mikromooli peptiidsidemeid. Kaod võisid tekkida näiteks ensüümi ülekandmisel mõõteklaasist katseklaasi, või liiga vara reaktsioonisegust võetud proovide tõttu.
Kust selline C väärtus? Milline on tegelikult C, mis vastab hüdrolüüsi kestvusele 300 sekundit? C türosiini kontsentratsiooni muutus mg/ml 0,078-0,064=0,014 t hüdrolüüsi kestus s 600 sek V1 hüdrolüüsisegu üldmaht ml 26 ml 2 TKÄ lahusest tingitud lahjendus 2 V2 ensüümilahuse üldmaht ml 5 V3 ensüümi maht hüdrolüüsisegus ml 1 g proteaasi kaalutis g 0,0049 181 türosiini molekulmass. 181 - 9,77 mikrokatalit grammi kohta 1 g ensüümi katalüütiline aktiivsus on 9,77 katalit. ? Mis toimub 1g ensüümipreparaadi toimel? PARANDUSED: Töö oli küll eeskirja järgselt läbi viidud, kui aktiivsus on umbes 3 korda madalam tegelikkusest. Ilmselt on tulnud kusagile viga töö käigus. 6,84 µkat/g 1 g ensüümi katalüütiline aktiivsus on 6,84 katalit 1 g ensüümpreparaadi toimel hüdrolüüsub 6,84 µmooli peptiidsidemeid sekundis.
Tabel 1-st võib välja lugeda, et mida kauem oli invertaas sahharoosi lahuse sees, seda suuremaks läks CuSO4 maht tiitrimise ajal, et värvuse erinevus tekiks. CuSO 4 lahuse ruumala suurenemine kajastab taandatud monosahhariidide hulka proovis. Kuna temperatuur ei olnud tegur mis oleks saanud invertaasi aktiivsust muuta siis mõlema ajaproovi aktiivsuse peaksid olema enamvähem samad. Invertaasi aktiivsus nii 10 minuti ja 20 minuti vältel suutsid püsida enamvähem samad. Mõnikümmend mikrokatalit grammi kohta siia sinna. Vea protsendiks tuli 2,85 protsenti mis on enamvähem lubatav. Invertaasi aktiivsuse määramisel võis sisse tulla mitu erinevaid vea allikaid nagu näiteks: tiitrimise ebatäpsus, ajastuse ebatäpsus. Tiitrimisel oli palutud, et lahus mis sisaldas komplekslahust, invertaasi-sahharoosi lahust ja mureksiidi lahust oleks saavutanud rohekama tooni. Tiitrimisel on tilga täpsus oluline invertaasi aktiivsuse määramisel. Katseklaasid kus olid