Uue nukleotiidi suhkrujäägi 5’ otsa liidetakse eelmise nukleotiidi 3’ otsaga fosfaatjäägi kaudu. DNA replikatsioon on poolkonservatiivne Poolkonservatiivne- tähendab, et replikatsiooni käigus sünteesitakse (kopeeritakse) mõlema vanemahela pealt uus komplementaarne tütarahel. DNA replikatsiooniks on vaja DNA ahelad teineteisest lahutada: Kaheahelalise DNA lahtikeerdumine ja replikatsioon toimuvad samaaegselt. Kaksikahela lahtikeerdumisel tekib torsionaalne pingestumine. Lahtikeerdumise eest vastutavad helikaas valgud. Torsioonjõudude leevendamiseks on vaja DNA ahelal katkete tekitamine- seda teevad topoisomeraas valgud. DNA replikatsiooni alguspunkt ja replikon Kaheahelise DNA lahti harutamine toimub replikatsiooni alguspunktist (origin). Tekib replikatsioonisilm, mille mõlemasse otsa moodustub Y-kujuline struktuur, mida nimetatakse replikatsioonikahvliks. Replikon on replitseerunud DNA-segment, mis on lähtunud ühest alguspunktist
topoisomeraasiga (güraasiga), teisenenud güraas, mutandid ofloksatsiin, Pseudomonas arginosa, Acinetobacter spp.), G- kokid, hoiavad ära bakteriaalse DNA reeglina tundlikud ravimi tsiprofloksatsiin intratsellulaarsed (makrofaagidesse tungivad) bakterid. Toime lahtikeerdumise, replikatsiooni. suurtele konts-idele. streptokokkidesse, anaeroobidesse vähene. Loomsete güraaside • Poriinide muutus bakteri Kasutatakse uroinfektsioonide, gonorröa puhul. pärssimiseks oleks vaja välismembraanis
5.6 Vedrurõngas Ei taga piisavat kinnitust kuna vedru “sureb ära” Traatlukustus Poldi peadest avad läbi puuritud. Neist läbi pandud traadi otsad keerutatakse kokku. Lukustusseib Seibi osa painutatakse peale poldi pingutamist poldi pea ühele küljele ja seibi nina üle serva või vastavasse pilusse. Kiillukustusega paarisseib Seibi välispindadel ribid ja sisepindadel kiilu kuju. Peale pingutamist välispinnad deformeeruvad ja vähimagi lahtikeerdumise korral suureneb kiilukujulistel pindadel järsult hõõrdejõud. Plasthülsiga mutter Mutri sees olevasse plastist hülssi lõigatakse koostamisel keere, mis aitab hoida mutrit täiendavalt paigal. NB! Mutrit tohib vaid 1 kord kasutada. Kroonmutter Poldi keermest puuritakse ava läbi. Mutrist ja poldist pistetakse läbi lõhis, mille otsad painutatakse ümber
Kromatiin keerdub omakorda -> tekib kromotiid. Ja kromotiidist koosnem kromosoom. 24. DNA replikatsioon Replikatsioon – ehk DNA süntees, mille käigus DNA kahekordistatakse ehk duplitseeritakse. Replikatsioon on vajalik raku jagunemiseks, et uued rakud saaksid võrdselt identsed DNAd. Komplementaarsusprintsiip – nukleotiidide vastavus üksteisele. (A-T, C-G) Etapid: 1. Ensüüm nimega helikaas lõhub DNA biheeliksi ning tekitab ahelate lahtikeerdumise 2. Ensüüm nimega DNA-polümeraas liitub ühe lahku läinud DNA ahelaga Sünteesib suunal 5’-3’ (DNA polümeraas) Juhtahel sünteesitakse pidevana, mahajääv ahel Okazaki fragmentidena (on vaja 3’OH otsa, mis tuleb RNA praimerist – seda sünteesib DNA primaas) Tühimikud täidab DNA polümeraas ja erifragmendid ühendab DNA ligaas 3
replikatsioon on alanud). Ta tekitab esimese ahelate lahutamise. Seostub ORI-ga järjestusspetsiifiliselt, harutab lahti ORI-kõrval oleva DNA, tekib replikatsiooni mull (silm). - Initsiaator kutsub kohale teisi valke (helikaase), mis seonduvad lahti tehtud DNA piirkonnaga ja replikatsioon läheb edasi. E. colil ORI – 3x13 piirkond + 4x9 piirkond. Dna – seondub 9-aluspaarilistele kordustele, tekib DNA topoloogia muutus, see kutsub esile ahelate lahtikeerdumise, et ahel ei katkeks, vajab topoisomeraasi. DnaB – DNA helikaas DnaC – DNA helikaasi laadija – suurendavad replikatsioonisilma Pärast DnaB ja DnaC seostumist toimub praimeri süntees. seejärel seostub DNA polümeraas III holoensüüm, sünteesitakse veidi DNA-d, lisandub libisev klamber DNA polümeraas III-le → täielik replikatsiooni mehhanism nüüd koos. See replikatsioon vajab ühe valgu sünteesi. DnaA lagundatakse. Järgmise
neks õigesti. Tihend liibub pindadele paremini, kui ta eel- nevalt katta grafiitpulbriga. Riknemisel võib tehasetihendi asendada punasest vasest rõngaga. Elastsuse tõstmiseks kuumutatakse rõngas kuni hõõgumiseni ja kastetakse külma vette. Küünla kinnitusava keerme riknemisel puuritakse ava suuremaks, keermetatakse (M20X1,5) ja sellesse keera- pinnas). Ligikaudu saab silindri kulumust määrata ülemise takse pinguga messing- või pronkskork. Lahtikeerdumise kolvirõnga lukupilu järgi. Selleks lükatakse rõngas kolvi vältimiseks kuumutatakse kaant enne korgi sissekeeramist. põhjaga silindrisse 25 mm kaugusele ülemisest servast ja Seejärel puuritakse korki auk ja lõigatakse sellesse keere mõõdetakse lehtkaliibriga lukupilu (joon. 125), Kui näi- M14Xl;25. teks silindri nimimõõdule vastav pilu oli 0,4 mm ja mõõt- Silindri kuliimuse määramine