kuju ümar väike ja ümar profiil kerkinud, kumer kumer servajoon sirge sirge konsistents limajas, läikiv läikiv värvus valkjas beez fluorestsents KingB-l ei esinenud NIA gramreaktiivsus (preparaat gramnegatiivne gramnegatiivne [2] ja KOH test) raku kuju, agregatsioon lühike pulk, agregeerumata coccobacillus [3] endospoor ei ei [2] liikuvus väga hästi liikuv liikuv [2] C-allikad (hape + gaas): glükoos (O/F test) +/- +/+ [2]
13. Mis tähtsus on rakkude fikseerimisel preparaadi alusklaasil? Rakud kleepuvad alusklaasile paremini ja värv difundeerub paremini rakku. 14. Mis eelis on rakkude keemilisel fikseerimisel? Muudab vähem rakkude morfoloogiat kui nt kuumfikseerimine 15. Mis on peptidoglükaan. Polümeerne molekul rakukestas, polüsahhariidse ahela moodustavad NAM (N- atsetüülmuraamhape) ja NAG (N-atsetüülglükosamiin), mis on ühenduses 1,4-β-glükosiidsidemega. 16. Millel põhineb gramreaktiivsus? Gram(+) ja gram (-) bakterite rakukesta ehituse erinevustel. 17. Mis funktsioon on etanooli lahusel Etanool peseb gram(-) värvi maha, kuna neil on õhuke PDG ja etanool muutis polüsahhariidse välismembraani läbilaskvaks. 18. Millised on Grami järgi värvimise põhietapid ja kuidas värvuvad neil etappidel GN ja GP bakterid? 1. kuumfikseeritud preparaadile kantakse peale kristallviolett 2. Lugoli lahusega töödeltakse preparaati, jood kinnitab värvi 3. etanooliga pestakse preparaati 4
Petri tassil või kaldagaril kasvanud säilituskultuurist või tardsöötmele tehtud väljakülvist võetakse steriilse külviaasaga aseptiliselt ühest kolooniast pärinevat biomassi ja viiakse see katseklaasis olevasse steriliseeritud vedelsöötmesse, mille soovitav kogus on 5 10 ml. Vedelsöötmesse külvamisel on soovitav külvimäär ~ 1:10 (st inokuleeritav külvimaterjal moodustab kultuuri mahust umbkaudu 10%). 2) Selgitage, millest on tingitud erinev gramreaktiivsus. Milleks kasutatakse grami järgi värvimist? Põhietapid ning tähendatavad muutused? Kuidas värvuvad endospoore moodustavad mikroobitüved? Tänu tsütoplasma keemilise koostise ja membraanide ehituse erinevusele mõjub sama värv erinevatele mikroorganismidele erinevalt. Värvi valik sõltub eesmärgist. Olenevalt kasutatavast värvist võivad mitmesugused raku osad - tsütoplasma, tuum, viburid, eosed, kest - erinevalt värvuda
Mis on nende märklauaks? Valgulised rakukestad arhedel. Baktereid saab jagada rakukesta järgi: o Mükoplasmad - rakukest puudub. o grampositiivsed bakterid - rakukest paks, koosneb peamiselt peptidoglükaanist o gramnegatiivsed bakterid - rakukest mitmekihiline, peptidoglükaani kestas vähe, rakukestas välismembraan o valgulise kestaga bakterid (osad arhed, Planctomycese rühm, klamüüdiad) NB! Grami järgi värvumine ehk gramreaktiivsus näitab rakukesta ehitustüüpi! Rakukesta funktsioonid o mehhaaniline kaitse (raku sees kõrge osmootne rõhk, 2-5 atm ja isegi enam). o väliskuju säilitamine rakukest (just peptidoglükaankiht selles) määrab raku kuju (kui kest eemaldada, võtavad kõik rakud kera kuju). o viburi toestamine. o kleepumine pinnale (adhesiinid on seotud kestaga). o antigeensete omaduste määramine (lipoplüsahhariidid jne).
5. Viburite kinnitamine rakule ja viburi töölepanek. Rakukesta (cell wall) ehitus 1. Mükoplasmad: rakukest puudub. 2. Grampositiivsed bakterid: rakukest paks, koosneb peamiselt peptidoglükaanist. 3. Gramnegatiivsed bakterid- rakukest mitmekihiline, peptidoglükaani rakukestas vähe, rakukestas välismembraan. 4. Valgulise kestaga bakterid (osad arhed, Planctomycese rühm, klamüüdiad). Peptidoglükaan puudub. GRAMREAKTIIVSUS NÄITAB RAKUKESTA EHITUSTÜÜPI!!! Rakukesta funktsioonid 1. Mehhaaniline kaitse (kaitseb RAKU SEEST tuleva surve eest: raku sees kõrge osmootne rõhk, 2-5 atm ning isegi rohkem) 2. Väliskuju säilitamine- rakukest (just peptidoglükaankiht selles) määrab raku kuju (kesta eemaldamisel võtavad kõik rakud kera kuju). 3. Viburi toestamine 4. Kleepumine pinnale (adhesiinid- kleepimisvõimelised ained/molekulid- seotud kestaga) 5
annaabi.ee 
