o Terapeutiline (raivotstarbeline eesmärk) Embrüonaalkloonimine · Embrüolühestuse meetodil · Toimub munaraku viljastamine in vitro · Moorula ehk kobarloode (2-16 rakku) jagatakse osadeks · Rakud embrüos on totipotentsed (areneb tervikorganism) · Embrüod siiratakse erinevate retsipientloomade emakasse Tuumkloonimine · Munarakust eemaldatakse munarakust tuum · Keharaku tuum siirdatakse munarakku · Rakku mõjutatakse elektriimpulsiga · Embrüo siiratakse kolmanda looma emakasse · Kloonorganism on geneetiliselt identne tuumadoonoriga Terapeutiline kloonimine · Tekitatakse kloonembrüo keharaku tuuma siirdamisel tuumata munarakku · Embürot kasvatatakse 5-6 päeva blastotsüsti staadiumisse · Blastotsüstist eraldatakse tüvirakud · Tüvirakke kasvatatakse kultuuris ja mõjutatakse diferentseeruma kindlas suunas (kindla koe rakkudeks)
Tuumkloonimise eesmärgid: luua õnnestunud geenisiirdamisega saadud transgeensete loomade geneetilisin koopiaid.Samuti ka arengubioloogiliste teaduslike probleemide uurimine, väärtusliku genotüüpiga põllumajandusloomade paljundamine, väljasuremisohus imetajate populatsioonide taastamine. Etapid: Munarakudoonorilt eemaldatakse tuum ja tuumadoonorilt võetakse tuum, somaatilise raku tuuma siirdamine tuumata munarakku elektriimpulsiga, embrüo areng in vitro, blastsotsüsti siirdamine asendusema emakasse, sünnib kloon laps. Dolly etapid: Tuumadoonorilt võetakse udararakud, munarakudoonorilt munarakud, munaraku tuum eemaldatakse ja rakud liidetakse elektriimpulsiga, udaraku tuuma eelmaldamine, toimub ,,vegetatiivse" sügoodi areng kultuuris, nüüd siirdatakse embrüo 3ndale lambale, seal see areneb surrogaadis kuni sünnini. Terapeutiline kloonimise eesmärgid: inimese ravimine
EMBRÜOSIIRDAMINE: seisneb arengu algusjärgus oleva embrüo ülekandes indleva emaslooma/rasestumisvalmis naise emakasse. IMETAJATE KLOONIMINE:1)Embrüonaalkloonimine-on loomuliku protsessi tehnoloogiline teisend. Mitu isendit tehakse embrüost. 2)Somaatiline e diferentseerunud keharaku tuuma siirdamises munarakku. Lühidalt tuumakloonimine. Imetaja tuumakloonimise Dolly- meetod:1)Tuumadoonori udararakud.2)Munarakudoonor.3)Rakud liidetakse elektriimpulsiga [munaraku tuum eemaldatakse].4)"Vegetatiivse" sügoodi areng kultuuris [Udararaku tuum].5)Embrüosiirdamine kolmandale lambale [varajane embrüo]. 6)Embrüo arenemine. Surrogaat e asendusema [ kloonlammas Dolly-geneetiliselt identne tuumadoonoriga]. HÜBRIDOOMITEHNOLOOGIA:..somaatiliste rakkude hübriidimise meetod monakloonsete antikehade tootmiseks. 1)Hiir immuniseeritakse mingi antigeeniga.2)Kahe nädala pärast eraldatakse hiire põrnast lümfotsüüdid,millest osa toodab vastavat antikeha
Kloonimine (taimel, inimesel) Kloon geneetiliselt identne järglane Kui paljundame taimi vegetatiivselt, saame klooni. Taimede uudne kloonimisviis on meristeempaljundus Imetajate kloonimine: embrüo kloonimine I Embrüonaalkloonimine (loomuliku protsessi tehnoloogiline teisend. II Tuumkloonimine keharaku tuuma siirdamine munarakku. Imetaja tuumkloonimine Dolly-meetod 1) tuumadoonori udararakud ja munarakudoonor 2)munaraku tuum eemaldatakse 3)rakud liidetakse elektriimpulsiga 4)"vegetatiivse" sügoodi areng kultuuris 5) embrüo siirdamine kolmandale lambale 6)embrüo arenemine 7)Kloonlammas Dolly geneetiliselt identne tuumadoonoriga. Siirdamine (loomal, inimestel) Embrüosiirdamine- seisneb arengu algusjärgus oleva embrüo ülekandes indleva emaslooma või rasestumisvalmis naise emakasse. Embrüosiirdamise huvi koduloomadel kui avastati folliikuleid stimuleeriv hormoon (emasloomal kutsutakse esile superovulatsioon e hulgiovulatsioon)
Kloonimismeetodite toimumine: 1)embrüolõhestuse meetodil ehk embrüonaalkloonimine. Varase embrüo lõigusturakud/blastimeerid on kõik võimelised arenema hormonaalseks tervikorganimsmiks- nad on totipotentsed. Sel teel on võimalik saada ühest väärtuslikuna testitud embrüost mitu isendit 2) Somaatilise/diferentseerunud keharaku tuumasiirdamises munaraku, mille oma tuum on kõrvaldatud. I Tuuma- toonorilt keharakk. II munarakudoonorilt munarakk. III rakud leidatakse elektriimpulsiga. IV ,,Vegetatiivse" sügoodi areng kultuuris. V Embrüo siirdamine kolmandale isendile. VI Emb- rüo arenemine.Kloonimine: 1)identne keharakult võetud isendiga=saab teada juba tunnuseid jne. Rakendusbioloogia-seisneb bioloogia haruteaduste poolt avastatu praktilise kasutamise võimaluste ja lahenduste uurimises ning teostamises. Lähtekohaks oli maaviljelus ja loomakas-vatuse teke nina vanaaja meditsiin.
muude org. rakudes. Ravitakse haiguseid Kloonimine : · Reproduktiivne saadakse terviklik organism · Tereaupiline eesmärg luua tüverakke, neid saadakse in vitro meetodil ja neid kas. Ravimiseks · Embrüosiirdamine võetakse ühelt org. munarakk , viljastatakse in vitro, seejärel jagatakse osadeks ning siirdatakse teistesse org. · Tuum keharakku tuuma viimisel munarakku on saadud uus org. udararakk + munarakk liidetakse elektriimpulsiga , rakk jaguneb embrüoks ning tekkib 3 organism. Nt Lammas Dolly 1997 a. 2003, Sotimaal, haigestus ja suri Surrogaatema emasimetaja, kes sünnitab talle siirdatud võõrast päritolu embrüost arendatud järglase Superevolutsioon hormonaalmõjutustega kunstlikult esile kutsunud polüovulatsioon imetajatel Antikeha - erilise koostise ja struktuuriga valk, mis tekib vastureaktsioonina ning antigeeni sattumisel organismi Antigeen mis tahes kehavõõras teiselt org
kloonembrüote kasutamine identse genotüübiga järglaste saamiseks) ... Tuumkloonimine - selgroogsetel teostatav kloonimine somaatilise raku tuuma siirdamisega munarakku, millest eelnevalt on tuum eemaldatud 3. Kirjelda tuumkloonimist lammas Dolly näitel! (Vt. lk 29) Võeti tuumadoonorist udararakud, munaraku doonorist võeti munarakk, mille tuum eemaldati. Seejärel liideti rakud elektriimpulsiga, see impulss käivitas ka sügoodi embrüonaalse arengu. Embrüo siirdati teist tõugu utele, kes asendusemana sünnitas Dolly. 4. Võrdle reproduktiivset- ja terapeutilistkloonimist inimesel, too välja sarnasused ja erinevused! (Vt. lk31-32) Mõlemas kloonimises kasutatakse munaraku- ja tuumadoonorit, elektriimpulsi mõjul siirdatakse tuumata munarakku somaatilise raku tuum ning embrüo areng in vitro. Reproduktiivses kloonimises siirdatakse blastotsüst
embrüot (kõik ei hakka arenema). Kasutatakse: perekondade puhul, kus naisel esineb mingi terviserike, mis takistab rasestumist tavalisel teel; võidakse teha ka mehe viljakushäirete puhul. 8.Kuidas toimub embrüonaalkloonimine? Varajane embrüo (moorula staadiumis) jaotatakse osadeks, lastakse taastuda ning siirdatakse emakasse. 9.Kuidas toimub tuumkloonimine?Miks seda tehakse? Munarakudoonori munarakust eemaldatakse tuum, rakud liidetakse elektriimpulsiga, ,,vegetatiivse ,, sügoodi areng kultuuris. Varajane embrüo siirdatakse kolmandale olendile, kus embrüo areneb edasi. Seda tehakse sest: tõuloomade aretamine, väljasuremisohus populatsioonide taastamine, 10.Kas inimest on vaja kloonida?põhjenda? Arvan, et inimest ei ole vaja kloonida, sest looduslikke protsessidega pole mõtet vastuollu sattuda. Kui kõik klooniksid inimesi, siis tekitaks seda globaalprobleeme, nt ülerahvastumist ning sealt tulevad juba muud hädad. 11
Kasutatakse põllumajandusloomadel, et selekteerida välja kõige paremate omadustega järglased, mis tagab suure ressursside kokkuhoiu ning saadakse ühelt väärtuslikult paarilt palju rohkem järglasi. Teiselt loomalt pärit embrüotest järglasi sünnitanud loomi nimetatakse surrogaatemadeks ehk asendusemadeks. In vitro viljastamine väljaspool organismi munaraku viljastamine. Dolly meetod kloonimisel udararaku doonori rakutuum ja eemaldatud tuumaga munarakk liidetakse elektriimpulsiga, vegetatiivne rakk areneb kultuuris, embrüo siirdatakse surrogaadile ja saadakse tuumadoonoriga geneetiliselt identne isend Terapeutiline kloonimine tekitatakse kloonembrüo, eraldatakse tüvirakud ja neist kasvatatakse koed/organid Tüvirakud diferentseerumata või vähe diferentseerunud jagunemisvõimelised rakud, mis võivad diferentseeruda teisteks rakutüüpideks, kuid säilitavad ka endasuguseid.
Kloonimine: · Embrüolõhestuse meetodil embrüonaalkloonimine Lõigustusrakud ehk blastomeerid on totipotentsed, embrüod/moorula jagatakse osadeks. · Somaatilise ehk diferentseerunud keharaku tuuma siirdamine munarakku - tuumkloonimine 1. Võetakse munarakk ja tuumadoonori keharakk 2. Munarakul tuum eemaldatakse 3. Munarakk ja tuumadoonori keharakk liidetakse elektriimpulsiga 4. ,,Vegetatiivse" sügoodi areng kultuuris 5. Embrüosiirdamine surrogaatemale 6. Kloonitud organism on geneetiliselt identne tuumadoonoriga Rekombinantne DNA DNA molekul, milles on ühendatud eri liikidelt pärit DNA- fragmendid. Restriktaasiga lõigatakse lahti ja ligaasiga ühinevad ahelate otsad kovalentse sidemega. GMO geneetiliselt muundatud organism Transgeenne organism isendi genoomi on siirdatud võõrliigi geene