Interkalaarsed agendid tungivad nukleiinhapete aluspaaride kihtide vahele, moonutades kaksikspiraali kuju, mis takistab DNA replikatsiooni ja transkriptsiooni. Alküleerivad agendid on tugevad elektrofiilid, mis nukleofiilidega moodustavad tugevaid kovalentseid sidemeid. Ahelat lõikavad agendid on suured glükoproteiinid, mis lõikavad DNA ahelat ning oma mahukusega takistavad DNA ligaasil tekkinud katkestuskohti parandamast. Antimetaboliidid blokivad normaalsed metaboolsed rajad. Aminopteriin - blokeerib DNA sünteesi dihüdrofolaadi reduktaasi inhibeerides. Sellega on inhibeeritud tetrahüdrofolaadi süntees, mis on kofaktor puriinaluste sünteesil. 6-merkaptopuriin on eelühend 6-merkapto-guanosiinfosfaadi sünteesil, ning inhibeerib mitmeid radu puriin-nukleotiidide sünteesil. Fluorouratsill - arvatakse, et inhibeerib mitmeid ensüüme DNA sünteesil. Ensüümide inhibiitorid inhibeerivad otseselt DNA sünteesil osalevaid ensüüme.
2' positsioonis riboosil OH asendada H aatomiga. Konversioon toimub nukleosiiddifosfaatide tasemel. 16. Tümidülaadi sünteesi reaktsioon. Metüülrühma allikas. 17. Dihüdrofolaadi reduktaasi reaktsiooni roll desoksütümidülaadi sünteesis. Dihüdrofolaadi reduktaas on vajalik tetrahüdrofolaadi regenereerimiseks dihüdrofolaadist. 18. Inhibiitorid: fluorouratsüül, metotreksaat, aminopteriin. Metotreksaat on folaadi antagonist, mis inhibeerib nukleiinhapete biosünteesi bakterites. Inhibeerimine toimub puriinide tasemel, sest folaati on vaja puriinide sünteesiks. Aminopteriin DNA sünteesi peataja. PENTOOSFOSFAADI RADA 1. Nimetage pentoosfosfaadi raja füsioloogilised funktsioonid. funktsioonid on: · Genereerida NADPH kujul redutseerivaid ekvivalente, mida vajatakse taandaval biosünteesil
hübridiseerimisel. Somaatiliste rakkude hübridiseerimist saab kasutada inimese geenide kaardistamisel tingimusel, et uuritav geen avaldub hübriidses rakus ja tema funktsioon on eristatav hiire omast. Inimese ja hiire rakkude liitumist stimuleeritakse Sendai viirusega. Hübriidsete rakkude jagunemisel lähevad inimese kromosoomid järk-järgult kaotsi. 24 Hübriidseid rakke selekteeritakse HAT (hüpoksantiin-aminopteriin-tümidiin) söötmel, kus aminopteriin blokeerib põhilise nukleotiidide sünteesiraja 39. Geenide kaardistamine deletsioone ja duplikatsioone sisaldavate kromosoomide abil. KAARDISTAMINE DELETSIOONIGA Tehnika, mis võimaldab kindlaks määrata geeni asukohta kromosoomis. Tsütoloogiliselt määratavat deletsiooni tähistatakse tavaliselt tähekombinatsiooniga Df. Näiteks Drosophila X-liiteline geen, mille: mutantne alleel w määrab valgesilmsuse w+ määrab punasilmsuse tekke.
katki. 11. Monoklonaalsete antikehade valmistamise põhimõte ja kasutamine teraapias. Milline peaks olema edukas ravim? Monoklonaalne antikeha on antikeha, mis on produtseeritud ühe raku või rakuliini poolt, mis on ühest rakust arenenud. On identsed ja omavad unikaalset aminohappe järjestust, kasvavad identselt. Reageerivad vaid ühe epitoobiga antigeeni molekulis. Hiirt immuniseeritakse antigeeniga, eraldatakse põrnarakud, fuseeritakse müeloomi rakkudega, kasvatatakse HAT söötmel (Aminopteriin blokeerib nukleotiidide sünteesi põhiraja ning HGPRT defekti tõttu ei saa müeloomirakud kasutada alternatiivseid substraate ja surevad, vanuse tõttu hukkuvad ka põrnarakud. Alles jäävad vaid hübridoomid.), isoleeritakse üksikutest hübridoomidest pärinevad rakukloonid, mis produtseerivad ühesuguste omadustega monokloonseid antikehi immuniseerimisel kasutatud antigeeni vastu, paljundatakse, säilitatakse ja kasutatakse antikehade tootmiseks koekultuuris.
Pärast mitmeid rakujagunemisi on hübriidses rakus alles veel ainult üks või väga vähesed inimese kromosoomid. Miks see nii toimub, on seni selgusetu. Isegi, kui katsetingimused on ideaalsed, moodustub väga vähe hübriidseid rakke. Osa rakke ei liitu, palju on ka hiir - hiir ning inimene inimene liitrakke. Selleks, et töötada edasi tõeliste hübriididega, kasutatakse rakkude kasvatamiseks selektiivset söödet tavaliselt HAT söödet (hüpoksantiin-aminopteriin-tümidiin). Juhul, kui üks rakutüüpidest on defektne tümidiini kinaasi suhtes (TK-) ja teine näiteks hüpoksantiini fosforibosüül transferaasi suhtes (HPRT-), need rakud söötmel ei kasva. Kasvada saavad üksnes hübriidid. HAT söötmes olev aminopteriin blokeerib tavalise puriinide ja tümidülaadi sünteesiraja, mistõttu rakud saavad kasvada ainult siis, kui neis on funktsionaalsed TK ja HPRT alleelid ning söötmes tümidiin ja hüpoksantiin
Pärast mitmeid rakujagunemisi on hübriidses rakus alles veel ainult üks või väga vähesed inimese kromosoomid. Miks see nii toimub, on seni selgusetu. Isegi, kui katsetingimused on ideaalsed, moodustub väga vähe hübriidseid rakke. Osa rakke ei liitu, palju on ka hiir - hiir ning inimene inimene liitrakke. Selleks, et töötada edasi tõeliste hübriididega, kasutatakse rakkude kasvatamiseks selektiivset söödet tavaliselt HAT söödet (hüpoksantiin-aminopteriin-tümidiin). Juhul, kui üks rakutüüpidest on defektne tümidiini kinaasi suhtes (TK-) ja teine näiteks hüpoksantiini fosforibosüül transferaasi suhtes (HPRT-), need rakud söötmel ei kasva. Kasvada saavad üksnes hübriidid. HAT söötmes olev aminopteriin blokeerib tavalise puriinide ja tümidülaadi sünteesiraja, mistõttu rakud saavad kasvada ainult siis, kui neis on funktsionaalsed TK ja HPRT alleelid ning söötmes tümidiin ja hüpoksantiin
annaabi.ee 
