Seega C3b võib rünnata erinevaid pindu, kaasaarvatud peremehe omi. C3b inaktiveeritakse kiirelt. Membraani küge seotakse Cb3 komplement faktor B abil, mis seejärel jaguneb faktor D-ks. Ba hulbib minema, Bb jääb seotuna C3b. See kompleks on alternatiivse raja C3 konvertaas, ja ei ole väga stabiilne, vajab properdiini, mis siis seondub selle kompleksiga. Konvertaas käitub analoogselt klassikalise raja konvertaasiga, lõigades C3 molekulid C3aks ja bks. Moodusutb C5 konvertaas ja samamoodi sarnaselt klassikalise rajaga moodustub lõpuks MAC. · letiini tee. ELISA, SDS-PAGE, WESTERN BLOT Immunoensümaatiline test mõõtis antikeha hulka lahuses. Peamised immunotestid on ELISA, SDS-PAGE elektroforees ja Western Blot. Sandwich ELISA: 1. Plastiku pind kaetakse esimese antikehaga 2. Lisatakse proov mis sisaldab uuritavat antigeeni ja lastakse antikehal antigeeniga seostuda. 3. Seostumata antigeen pestakse ära
(Met).tRNA-le kinnitub eIF2 (eukarüoodi algatusfaktorid (ingl.k. eukaryotic initiation factors). eIF4E ja eIF4G - eukarüootide translatsiooni algatusfaktorid (asuvad mRNA cap struktuuri juures) transpordivad mRNA ribosooi väikese subühiku seostumis seiti. Initsiaator tRNA liigub mööda mRNAd ja otsib start koodonit AUG. Koodon leitud eIF2 eemaldub ja suur ribosoomi ühik seondub II etapp (elongatsioon): aminotsüül tRNA seostub A seiti, moodusutb esimene peptiidside (Met ja ah),katalüüsib peptidüül transferaas (ribosoomi suuremas alaühikus). Suur subühik nihkub kolme nukleotiidi võrra. Väike subühik nihkub kolme nukleotiidi võrra ja üks tRNA lahkub E seiti kaudu III etapp (terminatsioon): ahela pikenemine lõpeb stoppkoodoniga (UAA,UAG, UGA).Aminotsüül tRNA asemel seostub Aseiti vabastamisfaktor (eRF),mis langetab peptidüül transfraasi aktiivsust. Ensüüm katalüüsib OH rühma peptidüül tRNA-le aminohappe
a hulbivad vabalt seerumis. Seega C3b võib rünnata erinevaid pindu, kaasaarvatud peremehe omi. C3b inaktiveeritakse kiirelt. Membraani küge seotakse Cb3 komplement faktor B abil, mis seejärel jaguneb faktor D-ks. Ba hulbib minema, Bb jääb seotuna C3b. See kompleks on alternatiivse raja C3 konvertaas, ja ei ole väga stabiilne, vajab properdiini, mis siis seondub selle kompleksiga. Konvertaas käitub analoogselt klassikalise raja konvertaasiga, lõigades C3 molekulid C3aks ja bks. Moodusutb C5 konvertaas ja samamoodi sarnaselt klassikalise rajaga moodustub lõpuks MAC. 30. Praktikumi materjalidest: ELISA, SDS-PAGE ja Western Blot. Immunoensümaatiline test kirjeldati esmakordselt 1971 aastal Engvall ja Perlmanni poolt. See mõõtis antikeha hulka lahuses. Peamised immunotestid on ELISA, SDS-PAGE elektroforees ja Western Blot. Sandwich ELISA: 1. Plastiku pind kaetakse esimese antikehaga 2. Lisatakse proov mis sisaldab uuritavat