30. Milline on endospooride ülesanne bakterites? Rakud hakkavad sporuleeruma, kui keskkonnatingimused on muutunud sedavõrd kehvaks. Aitab üle elada raskeid aegu. On metaboolselt mitteaktiivne ja puhkav bakterirakk. Tavaliselt moodustub 1 endospoor. 31. Kuidas endospoore rakus kindlaks teha? Eelnevalt tuleb rakud sporulatsiooni viia. R2A agarile teha väljakülv. R2A agari Mg ioonid kutsuvad esile sporulatsiooni. Seejärel teha preparaat. Malahhiitrohelisega värvitakse ja uuritakse preparaati. Lisaks täiendvärvimine safraniiniga. Saab endospoori näha, kui ta on veel rakuga seotud. 32. Milline näeb värvi endospoori preparaat pärast grami järgi värvimist ja miks? ei värvu grami järgi. spoorimantel on vastupidav igasugustele toksilistele ühenditele sh värvidele. 33. Miks on malahhiitrohelist rakust kerge välja pesta? malahiitroheline on nõrk katioonne värv ja eemaldub tsütoplasmast kergesti. 34
kasutamiseks vajalike ensüümide süntees. BAKETRITE ENDOSPOORID JA TSÜSTID (SPOROGENEES) Endospoorid on puhkevormid, mida teatud bakterid moodustavad ebasoodsate keskkonnatingimuste üleelamiseks. Esimesena kirjeldas: Ferdinand Cohn (Bacillus subtilis) Reeglina tekib ühes rakus üks endospoor, mis vabaneb emaraku lüüsudes ning mis võib idanemisvõimelisena väga pikka aega. Endospoore saab rakus tuvastada rakkude kuumutamisel malahhiitrohelisega. Järgneval pesemisel ei tule värv spoorist välja ja tsütoplasma saab värvida täiendvärviga. Tuntuimad endospoore moodustavad bakterite perekonnad on Bacillus ja Clostridium Erandeid on ka. Näiteks Metabacterium polyspora rakus moodustub 4-9 endospoori. Anaerobacter'i rakus on leitud kuni 5 endospoori. Tsüst puhkevorm, võimaldab bakterirakul üle elada halbu keskkonnatingimusi. Tsüste moodustavad: o Müksobakterid o Spiroheedid o Azotobacter o Riketsiatel
mõttes. Sellele seadmestikule tuginev eraldihautamise meetod on praegu Soomes kasutusel. Vähikasvatajad on ise ehitanud oma vajaduste järgi täiendatud inkubatsioonisüsteemi versioone ja täielikke hautamissüsteeme võib osta ka valmina või poolvalmina. Marja pidev liikumine inkubaatoris vähendab seenhaiguste s.h. Saprolegnia kasvu. Eraldihautamine eeldab siiski seenhaiguste tõrjeainete (malahhiitrohelise) kasutamist. Marjateri tuleb vannitada malahhiitrohelisega igal teisel päeval või vähemalt kaks korda nädalas . Töökindel malahhiitrohelise sisaldus on 100 ppm (osa miljoni kohta) ehk 100 mg/l hautamisvee kohta. Lühiajalise vannitamise korral võib kasutada isegi 500 ppm sisaldust. Sel juhul hautamisnõud uputatakse vannitamislahusesse mõne sekundi-minuti vältel. Malahhiitroheline hävitab efektiivselt mitte ainult Saprolegnia, vaid ka katkuseene niidid ja spoorid, mistõttu kunsthautamisel võib toota katkuvabasid vastseid ka katkuga
aega. Erandeid on ka, aga neid on väga vähe. Näiteks Metabacterium polyspora rakus moodustub 4-9 endospoori. Anaerobacter'i rakus on leitud kuni 5 endospoori. Epulopiscium sp rakus moodustub arvukalt tütarrakke. Tütarrakud väljuvad emarakust pilu kaudu. Tegu on ainulaadse "sünnitajabakteteriga". 16SrRNA järjestuste alusel on need kaks bakterit lähedased klostriididega. Endospoore saab tuvastada rakus kuumutamisel malahhiitrohelisega. Pesemisel ei tule värv spoorist välja ja tsütoplasma saab värvida täiendvärviga (bismarkpruuv v muu punane värv). Sporogeensete bakterite perekonnad Perekond Raku kuju Bacillus Pulkbakter Clostridium Pulkbakter Sporolactobacillus Pulkbakter Sporomusa Pulkbakter