See toimus iga päev. Kõige alguses pidi CPP tolmuimejaga puhtaks tegema, kuna peale tööd seal leidus alati väikseid elektroonilisi komponente millel on potentsiaali masina tööd rikkuda, näiteks töö ajal plaadi peale sattuda ja tekitada seal ebameeldivaid ühendusi. Peale tolmuimejaga puhastamist pidi masinas olevad rööpad(mille peal pea liigub) liigsest õlist puhastama, kuna masin ise õlitab ennast, ja tihtipeale on õli liiga palju ja peale õli puhastamist pidi joonlauad isopropanooliga puhtaks pühkima. Joonisel on näidatud kuidas tuleb puhastada joonlauda isopropanooliga. Joonlaua üleval asetseb masina vasakpoolne rööbas ja rööpast üleval magnetriba, mille kaudu pea liigub. CPP masinale tehakse eraldi ka õli hooldus. Selleks võetakse pea masinast lahti ja eraldi osad õlitatakse erineva õli tüübiga, õlid erinevad viiskoosusega. Kokku tuleb õlitada kaks põhielementi, 12-20(olenevalt masinast) haaramissegmenti ning nende
inkubaatorisse. 94. 95.Rakkudest lüsaadi valmistamine 96. Eesmärgiks on tutvustada erinevaid võimalusi rakkude lüüsimiseks valkude, RNA või DNA edasiseks analüüsiks. 97. Genoomse DNA eraldamine imetajarakkudest 98. Rakud lüüsitakse puhvris, mis sisaldab SDS-i (lahustab rakumembraanid), NaCl, EDTA-d (inhibeerib nukleaase) ja proteinaas K-d (lagundab valgud) pidevalt segades 37°C või 55°C juured. DNA sadestatakse isopropanooliga, mille tulemusena tekkib lahusesse DNA pundar, mille saab otsiku abil tõsta puhtasse tuubi. DNA lahustamiseks kasutatakse enamasti Tris-HCl puhvrit EDTA-ga. 99. DNAd saab edasi kasutada genotüüpiseerimiseks, mingite lõikude amplifitseerimiseks, kloneerimiseks jne. 100. 101. RNA eraldamine imetajarakkudest 102. RNA eraldamiseks kasutatakse tänapäeval enamasti spetsiaalseid komplekte ehk kitte. Kasutatakse ka vedelat lämmastikku
lüsaati, seega tõstsin rakud pipetiga uue epsi. Lisasin 3,4 ml söödet, tegin 8-kujulisi liigutusi ning panin tass CO2 inkubaatorisse. 3. Praktikum - rakkudest lüsaadi valmistamine (2014): Genoomse DNA eraldamine imetajarakkudest Rakud lüüsitakse puhvris, mis sisaldab SDS-i (lahustab rakumembraanid), NaCl, EDTA-d (inhibeerib nukleaase) ja proteinaas K-d (lagundab valgud) pidevalt segades 37°C või 55°C juures. DNA sadestatakse isopropanooliga või etanooliga, mille tulemusena tekkib lahusesse DNA pundar, mille saab otsiku abil tõsta puhtasse tuubi. DNA lahustamiseks kasutatakse enamasti Tris-HCl puhvrit EDTA-ga. DNAd saab edasi kasutada genotüüpiseerimiseks, mingite lõikude amplifitseerimiseks, kloneerimiseks jne. RNA eraldamine imetajarakkudest RNA eraldamiseks kasutatakse tänapäeval enamasti spetsiaalseid komplekte ehk kitte. Võib kasutada ka Trizol vms. reagenti, mille põhimõte on RNA ekstraheerimine guanidiin-