Töö käik Kontrollisin kolonni vertikaalsust. Tegin vastavaid mõõtmisi (kõrgus L ja diameeter d) ja kirjutasin endale Sephadex'i mark ja seda iseloomustav tegur k. Avasin kolonni väljavooluava ja täidise kohal olev voolutuslahus hakkas aeglaselt kolonni alla asetatud anumasse tilkuma. Kui vedeliku tase kolonnis langes täidise pinnani, sulgesin kolonni väljavooluava (tuleb vältida, et vedeliku nivoo ei langeks geelipinnast allapoole ja õhk ei tungiks geelikihti). Sisestasin 0,5 ml uuritavat proovi «DB+Lysozyne+DnAsp» kolonni, jättes umbes 5 mm kaugusele geeli pinnast. Proov lastakse tilkuda geeli pinnale nii, et see seal võimalikult ühtlaselt jaotuks. Kui proov on sisestatud, avasin väljavool ja lisasin kiiresti pipeti abil väike kogus eluneti (NaCl). Seda tegevust korratakse kuni proov on täidisesse imbunud. Seejärel lisasin suurema koguse voolutuslahust
eluendi, mis enne uuritava segu sisestamist kolonnist välja lasin. Segu komponentide lahutamine. · Avasin ettevaatlikult kolonni väljavooluava ja täidise kohal olev voolutuslahus hakkas aeglaselt kolonni alla asetatud anumasse tilkuma. · Kui vedeliku tase kolonnis langes täidise pinnani, sulgesin kiiresti kolonni väljavooluava ja kolonn oli valmis uuritava proovi sisestamiseks. Vedeliku nivoo ei tohtinud langeda geelipinnast allapoole. Proovi sisestamine. · Uuritava segu doseerimiseks ja kolonni sisestamiseks kasutasin sobiva mahuga (1 ml) mõõtpipetti, mille otsas on tükike peenikest voolikut. · Pipeti võtsin juhendaja poolt määratud 1 ml uuritavat proovi ja viisin selle kolonni, jättes pipeti otsa umbes 5 mm kaugusele geeli pinnast. · Proovi lasin tilkuda geeli pinnale nii, et see seal võimalikult ühtlaselt jaotuks.
põhjustava massiülekande ja difusiooni mõju lahutuvusele oleks võimalikult väike. 51 Kui vedeliku tase kolonnis langeb täidise pinnani, suletakse kiiresti kolonni väljavooluava ja kolonn on valmis uuritava proovi sisestamiseks. Kogutud lahust pole vaja säilitada ega selle mahtu mõõta. NB! Mingil juhul ei tohi lasta kolonni kuivaks joosta, st. tuleb vältida , et vedeliku nivoo ei langeks geelipinnast allapoole ja hk ei tungiks geelikihti! Proovi sisestamine Uuritava segu doseerimiseks ja kolonni sisestamiseks kasutatakse sobiva mahuga (1 ml) mõõtpipetti või süstalt, mille otsas on tükike peenikest voolikut. Pipeti või süstlaga võetakse juhendaja poolt soovitatud kogus (reeglina 0,5 või 1 ml) uuritavat proovi ja see viiakse kolonni, juhtides pipeti otsa vastu kolonni seina või jättes umbes 5 mm kaugusele geeli pinnast
annaabi.ee 
