mobiilse faasiga. Aega, mis kulub ainel kromatograafilise süsteemi läbimiseks nimetatakse retentsiooniajaks. Erinevate liikumiskiiruste tõttu on ainetel erinevad retentsiooniajad. 49. Elektroforees Lihtsustatult: elektri poolt kandmine. Elektroforees eraldab aineid nende liikumiskiiruse järgi elektriväljas. Lahutatavad ained peavad esinema ioonidena. Ioone liigutatakse vastavalt vastasmärgiliste laengute tõmbumise põhimõttele. Jaotatakse: - planaarseks elektroforeesiks. Läbiviimiseks kasutatakse peamiselt õhukesi geelikihte, mõnikord paberit. PE plaat võib olla asetatud nii püsti kui pikali. Plaadi vastasservad on ühendatud elektroodidega, mis tekitavad plaadis proovi lahuta- miseks vajaliku elektrivälja. Plaadi ühe elektroodi (harilikult katoodi) poolses otsas on proovilahuse jaoks süvikud. Peale proovi sisestamist lülitatakse sisse alalisvool ja proov lahutub vastavalt selle komponentide liikumiskiirusele. Peale proovi lahutamist
suurust oleks hea võimalikult täpselt kasutatava DNA Ladderiga võrreldes kontrollida. 1. Kontroll-restriktsiooni teostamiseks esmalt pipeteerisin kokku 5,5 μl vett, 3 μl puhastatud DNA-d, 1 μl restriktaasi 10x puhvrit, 0,5 μl EcoRI restriktaasi, fuugisin ja inkubeerisin 37 °C 30 min jooksul 2. Kui 30 min on täis, fuugisin uuesti, kuna sooendamisel kaanele kondenseerus veeaur. Lisasin 2 μl 6x DNA värvi 3. Elektroforeesiks valasime 100 ml TAE geeli (1%) 4. Pipeteerisin kogu oma segu agaroosgeeli hambasse. 5. Tehtud pildist oli arusaadav, et ma ei saanud õige kõrgusega bändi. Nagu selgus, viga oli bakterite kasvamisel ja meil kasvanud bakterite kolooniad polnud tegelikult õiged. Võib olla põhjus selles, et ampitsiliin polnud nii effektiivne ja selektiivne. Need bakterid võiksid sattuda meie tassidele õhust, kuna selles praksiruumis tehakse töid paljude teiste preparaatidega. 63. 64
suur kõvadus ja kõrge sulamis temperatuur. siis keskmine kiirus sellel ajavahemikul on konsentratsioonide vahe jagatud Elektrivälja toimel liiguvad laenguga osakesed vastasmärgiga aegade vahega. Keskkiirus: V = (c2 - cl )/ (t2 tl ) = c / t elektroni suunas. Seda lõikumist nim. elektroforeesiks. Kiirusemõõtük on N: mol / dm3 * min. Elektrolüüdi lisamisega saab esile kutsuda seda, et difuusse kihi 4.6 Olekudiagrammid. Konstantsel temperatuuril on keemilise reaktsiooni kiirus võrdeline rea- ioonid lähevad adsorbsesse kihti ja graanula laeng muutub (võib
N: HC1 vesilahuse elektrolüüsil Pt elektroodidega neutral-vad saaduste vahelise vastassuunalise reakts-i kiirused võrdsed. Elektrivälja toimel liig-d laenguga osakesed vastasmärgiga elektroni katoodil H+ ioonid aatomiteks, adsorbeeruvad elektroodil, Tasakaalukonstant oleneb temp-st, kuid ei olene aine hulkadest. suunas. Seda lõikumist nim. elektroforeesiks. ühinevad ja eralduvad: H+ +e = Hads ; 2Hads Reakts-s osaleva aine lis-l tasakaalus olevale süst-le või eemaldamisel sellest, Elektrolüüdi lis-ga saab esile kuts seda, et difuusse kihi ioonid = H2 anoodil loovutab nihk tasakaal, nii et konstant säil-b oma väärtuse, kuigi konsentratsioonid lähevad adsorbsesse kihti ja graanula laeng muutub (võib muut 0ks)
annaabi.ee 
