need on hübridoomid. Selektiivsöötmel jäävad ellu ainult hübridoomid. Nüüd on puhas kultuur ühte tüüpi antikehi tootavatest, hästi paljunevatest rakkudest. Mis on roheline fluorestseeruv valk, milleks ja kuidas seda kasutatakse? See on meduusist saaadud geen, mis floresseerub rohelises vahemikus ja mis teise valguga liitudes seda ei mõjuta, kuid näitab meile kus see valk ekspresseerub. Millised on objektide detektsiooni piirid valgusmikroskoopias, millised elektronmikroskoopias? Valgusmikroskoopia võimaldab meil vaadelda objekte mis pole väiksemad kui valguse lainepikkus 100nm, elekrtronmikroskoopia aga võimaldab 0,1nm. Defineeri palun mõiste “geneetiliselt muundatud organism” Geneetiliselt muundatud organism (GMO) on selline organism, kelle pärilikkusetegureid on muudetud viisil, mis looduslikul teel ei ole võimalik. GMO-
tulevad miinimumlahendusena kõne alla lokaalsed valveandurid. Need töötavad täiesti iseseisvalt, ilma et oleksid ühendatud valvekeskusega. Häiresignaal hakkab tööle kohapeal või lihtsa kahejuhtmelise liini kaudu (nt telefoniliin) mõnes teises kohas. Arvutuskeskuse tööks on vaja installeerida valve- ja tuletõrjesignalisatsioon põlengute ja sissemurdmiste avastamiseks. Hoone asukohta ja selle infrastruktuuri silmas pidades võivad osutuda otstarbekohaseks ka teised detektsiooni valdkonnad. Tugevdatud kaitset vajavad nt serveriruumid ja andmekandjate arhiivid. Kui ei ole olemas tsentraalset valve- ja tuletõrjesignalisatsiooni, on vaja installeerida lokaalsed valveandurid. Lokaalsete valveandurite kasutamisel ohu varajaseks avastamiseks on vaja hoolitseda selle eest, et signaal oleks kuulda ka väljaspool kaitstavaid ruume. Signaali edastamine võib toimuda erineval viisil ning see peaks edasi antama kohta, mis on ööpäevaringselt hõivatud
-eelised: Tuvastab kõik muutused -puudused: Kallis Heterodupleks analüüs: -eelised: Lihtne ja odav -puudused: Puudulik tundlikus,Väikesed fragmendid dHPLC: -eelised: Kiire ja kvantitatiivne -puudused: Kallis, ei selgu asukoht SSCP: -eelised: Lihtne ja odav -puudused: Väikesed fragmendid DGGE: -eelised: Kõrge tundlikus -puudused: Kallid praimerid 17.TaqMan ja Molecular Beacon töötamisprintsiip Homogeensed hübridisatsioonitestid kasutades reaalaja PCR-d ja fluorestsentsil põhinevat detektsiooni: -Tuntumad TaqMan ja Molecular Beacon proovid.Erinevad quencherid (TAMRA ja DABCYL) -Põhinevad energia ülekandel, kus fluorestsents detekteeritakse tänu muutusele füüsikalises distantsis fluorokroomi ja vaigistaja (quencher) vahel pärast proovide hübridisatsiooni. FRET (fluoresence resonance energy transfere) tehnika -Iga SNP vajab spetsiaalpraimereid -Kõige efektiivsemad väheste SNP-de ja suure hulga proovide puhul Introduction to TaqMan® probes
Mittekodeerivad SNPd võivad muuta ekspressioonitaset. Teatud genoomiblokid on konserveerunud SNPde poolest. · Minisekveneerimine: 1 kaupa märgistatud nukleotiidide lisamine. · Reaalaja PCR spetsproovidega, SNPde deletsiooniks. Mõõdetakse fluorestsentsi teket. · Polümeraasipõhine ekstensioonitehnika 17. TaqMan ja Molecular Beacon töötamisprintsiip Homogeensed hübridisatsioonitestid, kasutades reaalaja PCR-i ja fluorostsentsil põhinevat detektsiooni. Põhinevad energia ülekandel, kus fluorestsents detekteeritakse tänu muutusele füüsikalises distantsis fluorokroomi ja vaigistaja vahel pärast proovide hübridisatsiooni. Iga SNP vajab spetsiaalpraimerit. Kõige efektiivsemad väheste SNP-de ja suure hulga proovide puhul. 18. Suure võimsusega genotüpiseerimise võimalused 1. (DNA) polümeraasipõhised ekstensioonitehnikad: 1. tillukse jupikese amplifitseerimine, kus on SNP sees. Üks ahel biotinoleeritakse,