50µl 20µl Hindaksin oma täpsust rahuldavaga. Kindlasti kogemusega see paraneb. 2 III HARJUTUS Eesmärk: Harjutada iga pipeteerimiskorraga sama mahtu pipeteerima. Materjalid: Broomfenoolsinine Äädikhappe lahus Blotipaber Pipetid PCR plaat Töö käik: Pipeteerin plaadi nelja auku 100µl broomfenoolsinist Pipeteerin lisaks vastavalt 50µl; 5µl; 0,5µl äädikhappe lahust. Pipeteerin blotipaberile oma nime ja harjutuseks täpikesi Tulemus: Tulemus ei olnud väga imeline, kuna algselt ma ei pannud tervet pipetitäit üheks täpiks vaid jagasin selle kaheks. See on aga harjutuse eesmärgiga vastuolus. Kohe kui oma veast aru sain hakkasid ka ilusamad ja ühtlasemad täpid tulema. Praktiline töö nr. 1: Polümeraasi ahelreaktsioon
(kokku 5,5 ml 30% lahust). Detergendi pipeteerimiseks kasutasin pahupidi tehnikat. Pipeteerisin kahte eppendorfi 1,55 ml lahust, allesjäänud 2,4 ml pipeteerisin 200 l kaupa eppendorfidesse sain 11 ja pool eppendorfi. Harjutus 2 Hindasin silmaga vee koguseid: 1. 200 l 2. 60 l 3. 100 l 4. 20 l 5. 7 l 6. 90 l 7. 40 l 8. 150 l Hinnangud polnud küll päris täpsed, aga siiski küllaltki lähedased. Harjutus 3 Pipeteerisin laual oleva plaadi viide auku 100 l broomfenoolsinist, lisasin vastavalt 50 l, 5 l, 1 l ja 0,5 l. Lisaks lisasin juhendist erinevalt ühte auku 20 l, ning pipeteerisin uue puhta broomfenoolsinise kuuendasse auku. Tulemuseks oli küllaltki sujuv värvirida. Blotipaberile oma nime ja mustrit pipeteerides jälgisin, et pipett ei läheks liiga sügavale lahusesse, et pipett oleks otse ning pipeteerimine toimuks sujuvalt, et kogused oleks võimalikult täpsed ning täpid tuleksid ühtlased. 1. Polümeraasi ahelreaktsiooni teostamine
2. 60 μl (korras) 6. 75 μl (korras) 3. 100 μl (korras) 7. 50 μl (tegelikult 35 μl) 4. 30 μl (tegelikult 10 μl) 8. 125 μl (tegelikult 150 μl) 9. 10. 11. 12. Täpsuspipeteerimine 13. Vajalikud materjalid: broomfenoolsinine, äädikhappelahus, blotipaber, pipetid, 200-μl aukudega plaat 14. 15. Töö käik: 1. Pipeteerisin plaadi viide auku 100 μl broomfenoolsinist 2. Pipeteerisin lisaks 50 μl, 5 μl, 1 μl ja 0,25 μl äädikhapet. Segasin. Lahuste värv muutus sõltuvalt äädikhape mahust. 3. Kasutades kõige väiksemat pipetti pipeteerisin blotipaberile oma nimi ja muster. 16. Järeldus: täpid on erineva raadiusega (suurusega), kuna pipeteeritud lahuste maht oli erinev, sõltuvalt mustrist. Aga täpid, mis olid sama vedeliku mahuga pipeteeritud, ei olnud alati sama suure läbimõõduga, sest ikka olid väiksed vead pipeteerimisel. 17. 18