tehtud õigesti ja saab topsis jäänud DNA-ga töötada jätkata. 4. Praktikum – Rekombinantse plasmiidi ligeerimine Selleks, et meid huvitava amplifitseeritud DNA paljuneda, on vaja teda sisestada vahuvektorisse(plasmiidi). Selleks on vaja kokku ligeerida meie järjestus (L-Desmo) ja pSTBlue-1 vektor. Selle praktikumi käigus kasutasimi vektorit, mis oli enne lõigatud niimodi, et kleepuvad osted sisaldasid T-otsad. Taq polümeraas ei oma eksonukleaarset aktiivsust, sellega suure tõenäosusega lisab iga PCR produkti sabale lisa A-nukleotiidi. Sellega meil on
RT PCR kvantiteerib DNA- d reaktsiooni käigus – RT-PCR on kiirem. * Tundlikkus - PCRi produkte määratakse EtBr-ga värvunud produktide suuruse alusel. RT PCR määrab produkti kogust fluorestsentsi intensiivsuse alusel. Geeli lahutusvõime (10x erinevust saab tuvastada) on tunduvalt madalam kui fluorestsentsil (2x erinevust). * Tulemuste esitamine – RT PCR-il numbritega, PCR-il ei ole. * Produkti suurus - RT PCR-ga on amplifitseeritud DNA lõigu suurus on väiksem. 5. 10. Mis on GMO? Geneetiliselt muundatud organism. Organism, mille genoomi on inimese poolt muudetud. Looduses teda ei esine loomulikult. 11. Millal leiab aset geneetiline muundamine? Mida ei loeta geneetiliseks muundamiseks? Leiab aset * Muundatakse organismi geneetiline materjal ja seejärel viiakse peremeesorganismi. * Valmistatakse geneetiline materjal ja seejärel viiakse organismi.
märgistega, segatakse kokku ning hübridiseeritakse kiibile. Fluorestsentsi suhteid kasutatakse piirkondade detekteerimiseks test ja referents proovide vahel, mis erinevad koopiaarvult. Saab visualiseerida deletsioone ja duplikatsioone väga väikestes DNA segmentides Saab uurida tervet genoomi ilma varasema teadmiseta kromosomaalsete aberratsioonide kohta Ei vaja spetsiifilisi sonde Saab detekteerida amplifitseeritud geenide olemasolu vähis ja kaardistada nende asukoht Ebatäpsused teatud kromosoomide regioonides (kus on palju kordusi, akrotsentriliste kromosoomide tsentromeerides ja enamus kromosoomide telomeerides) Koopiaarvu muutusi saab tuvastada ainult siis, kui rohkem kui 50% rakkudest sisaldavad kromosomaalseid muutusi. Ei saa identifitseerida kromosomaalseid ebanormaalsusi mis on tasakaalus.