kontsentratsioonidega lehe proovid viirusega või viiruseta. ELISA plaat 1 2 A L- L- 1:5 B L- L- 1:20 C L- L- 1:50 D L- L- 1:100 E L+ L+ 1:5 F L+ L+ 1:20 G L+ L+ 1:50 H L+ L+ 1:100 · Igasse süvendisse kanname 100µl proovi. · Taimelehest eraldame mahla spetsiaalse mahlapressi abil, tsentrifuugime ja eppendorftuubis lahjendame selle vajaliku kontsentratsioonini PBS-ga. L- terve leht, L+ nakatunud. · Kanname kõik proovid vastavatesse süvenditesse ja jätame seisma üleöö 4 kraadi juurde. · Plaadilt eemaldame mitteseostunud antigeeni ja peseme plaate 4x PBS/ Tw-ga ja 1x PBS- ga shakeril. · Plaadi blokeerime 1% BSA lahusega PBS/ Tw-s 1h toatemperatuuril, eemaldame blokeeriva lahuse ja peseme 3x PBS/Tw-ga.
Petri tassidele. Teeme transformatsioonisegule kuumašokki 50sekundit 42 kraadi juures. Meetod seisneb selles, et CaCl2 tõttu DNA tõmbus rakumembraanide ligi. Ja nüüd kui paneme oma segu sooja, siis membraanikahjustuse tagajärjel DNA migreerub raku sisse. Tõstame tuubi 5minutiks jääle jahutma Järgneb elustamisefaas. Selleks lisame 500 µl vedelat LB söödet ja inkubeerime 30 minutit 37 kraadi juures. Tsentrifuugime bakterid põhja Eemaldame sööte bakterite pealt Suspendeerin, et tekiks ühtlane lahus Kannan bakterisegu Petri tassile. Kallan klaasterad tassile ja loksutan et bakterid laiali kanduksid. Asetame tassid 37 kraadi juurde kasvama . Mida ja miks me transformeerime? Millist tulemust ootad? Viime enda vaheplasmiidi bakterisse, et see paljuneks ja et tekiksid kolooniad. Vastavalt valged ja sinised. Meie tahame valgeid kolooniaid saada.
annaabi.ee 
