V = k2 [E]t [S]/(Ks + [S]) Võrrand kirjeldab produkti moodustumise kiiruse sõltuvust substraadi kontsentratsioonist, [E]t, k2 ja Ks on konstandid Võrrandi rakandatavuse eeldusteks on: 1. V on ensüümkatalüüsitava reaktsiooni algkiirus, s.t. reaktsiooni kiirus olukorras, kus produkti moodustumine ajas on lineaarne välistab järgmised komplikatsioonid: ensüümi denaturatsioon produktinhibitsioon võimalik pöördreaktsioon 2. Substraat on ensüümiga võrreldes ülehulgas, s.t [S] >> [E]t (NB! mitte segi ajada küllastatusega [S] >> Ks) võimaldab kasutada võrrandis substraadi algkontsentratsiooni Michaelis-Menteni võrrandi tuletamine statsionaarse faasi eeldusel Briggs ja Haldane 1925 Statsionaarse faasi eeldus mingi aja vältel esineb olukord, kus ES kompleksi juurde toovate ja ära viivate reaktsioonide kiirused on võrdsed
(Ülehulgal pole midagi pistmist küllastumisega!!! Ntx varieerime substraati [S] 0,1-20mM, võib teha nii, et ensüüm on 0,1mM või 0,1M või 0,1nM. Substraadi kontsentratsiooni varieerimise vahemiku määrab ära MM konstant, aga ülehulga asja saab määrata selle järgi, et kui palju võtame ensüümi. 0,1 mM E 0 ei rahulda ntx antud tingimust, et substraadi oleks ensüümiga võrreldes ülehulgas.) Algkiiruste mõõtmine välistab: - ensüümi denaturatsioon - produktinhibitsioon - võimalik pöördreaktsioon pH kontroll ka oluline. Kaheastmeline reaktsiooniskeem: I aste seostumine II aste keemiline aste, kus toimub substraadist produkti moodustumine EX! MM võrrand ja selle tuletamine. Seda tuleb osata teha kahel eeldusel, tulemus on erinev. 1.MM võrrandi tuletamine kiire tasakaalu eeldused 11 Produkti tekib ainult ühte noolt pidi, seetõttu saab massitoime seaduse abil kirjutada, et