Splitless (jagamiseta) - proov aurustub kuumutatud sisestuskambris ja kogu proov viiakse kandegaasi poolt lahutuskolonni; proov viibib aurutis rohkem aega; kromatogrammil ilmub suur solvendi piik. Kasutatakse väga väikeste kontside puhul. 20. Lahutuskolonnid GK-s ja statsionaarsed faasid Täidiskolonn - täidetud adsorbendiga või inertse tahke kandjaga, mis on kaetud vedelfaasiga. Suurem mahutuvus; madal lahutuvus; madalam tundlikkus; pikem analüüsi aeg; preparatiivne rakendus. Kapillaarkolonn - tahke või vedel statsionaarne faas õhukese kihina on kantud kapillaari siseseinale. Väiksem mahutuvus; kõrgem lahutuvus; kõrge tundlikkus; lühem analüüsi aeg; Analüütiline rakendus. Statsionaarses faasis ?? 21. Isotermiline ja gradientkuumutamine GK-s Isotermiline reziim (temp on konstante) - kui T on liiga madal siis piigid elueeruvad koos; kui T on liiga kõrge siis piigid elueeruvad liiga kaua, laiad piigid.
Vaja ainult plaati, hermeetiliselt suletavat klaasanumat. Kuid pole niivõrd informatiivne kui teised kromatograafid. Liikuva faasi liikumine toimub vastupidiselt raskusjõule. Paberiga tavaliselt alanev meetod. Kromatograafia eesmärgi järgi 1) analüütiline kromatograafia eesmärk kas kvalitatiivselt määrata teatud ainete olemasolu segus või kvantitatiivselt määrata ainete kogus. Aine otseselt ei huvita. Ainult tema identsus või sisaldus. 2) preparatiivne kromatograafia eesmärk on eraldada segust teatud aine. Võidakse kasutada ka 2-3 m läbimõõduga kolonne. AINE SEGU KOMPONENTIDE KVANTITATIIVNE SISALDUSE SPPEKTROFOTOM.MÄÄRAMINE (UV ALAS) Vastavalt Lambert-Beeri seadusele sumeeruvad kõigi segu komponentide optilisd tihedused antud lainepikkusel ja seega mõõdetakse summaarset optiliset ithedust. Selleks, et määrata individuaalsete komponentide kvantit sisaldust: 1)peavad komponentide neeldumimax-d piisavalt erinema üksteisest
üksikahelatel omavahel paarduda. 4)mitteseostunud proov pestakse maha ja NA asukoht tuvastatakse märgiste järgi. Kromatograafia. Segu lahustatakse vedelikus - nn ‘’mobiilne faas’’, mis voolutatakse (flow) läbi nn ‘’statsionaarse faasi’’. Segu (mixture) eri koostisosad constituents liiguvad erinevad kiirusega ja nad lahutatakse üksteisest. Eraldus põhineb liikuva faasi erinevate koostisosade erinevas ‘’külgejäämises’’ statsionaarsele faasile. Preparatiivne -uuritava valgu puhastamiseks segust – et puhastatud materjali edasisteks analüüsideks kasutada Analüütiline – et kindlaks teha uuritavate koostisosade olemasolu ja või suhtelisi proportsioone segus. Ioonvahetuskromatograafia- Valkude teineteisest eraldamine ioonvahetuskromatograafias kasutab ära erinevusi valkude summarses elektrilaengus (vt. eelmine peatükk). Siin liiguvad lahuses olevad valgud läbi poorse
– nt lüüsitud rakkudest/kudedest) 1. Segu lahustatakse vedelikus - nn ‘’mobiilne faas’’, mis voolutatakse (flow) läbi nn ‘’statsionaarse faasi’’. 2. Segu (mixture) eri koostisosad constituents liiguvad erinevad kiirusega ja nad lahutatakse üksteisest 3. Eraldus põhineb liikuva faasi erinevate koostisosade erinevas ‘’külgejäämises’’ statsionaarsele faasile. Preparatiivne -uuritava valgu puhastamiseks segust – et puhastatud materjali edasisteks analüüsideks kasutada Analüütiline – et kindlaks teha uuritavate koostisosade olemasolu ja või suhtelisi proportsioone segus Valkude struktuuri ja funktsiooni (valk-valk interaktsioonide) uurimise meetodid. VALK-VALK interaktsioonid: enamasti tänu paljudele MITTEkovalentsetele sidemetele valkude vahel (3-D konformatsioonid sobituvad nagu ‘lukk-võti. Valkude analüüsi näiteid: