tsütoplasma, lüsosoomid. 43. Restriktaasid. Ehk endonukleaasid lagundavad nukleiinhapet, lõhkudes suhkur-fosfaat selgroos nukleotiidide vahelist sidet ehk fosfodiestersidet ahelasiseselt, mitte otstest. Restriktaase toodavad bakterid. Restriktaasid on järjestusspetsiifilised. 44. DNA kloneerimise etapid. 1. Lõigatakse nii vektorit B-saidis(vektoriteks kasutatakse tihti plasmiide) kui ka uuritavat DNA- d retriktaasiga, mis genereerib "kleepuvad" otsad. (kui nii kloneerimisvektori DNA-d kui ka kloneeritavat DNA-d on lõigatud ühe ja sama restriktaasiga, saame klonerimisvektoi otste vahele "kleepida" uuritava DNA lõigu. Fosfodiestersidemete moodustamiseks kloneerimisvektori DNA ja uuritava DNA lõigu otse vahele kasutatakse ensüümi DNA ligaas) 2. DNA fragment kleebitakse vekroti B-saiti 3. Uus konstrukt viiakse bakterirakkudesse. 45.DNA sekveneerimise põhimõte. DNA nukleotiidse järjestuse määramine
Usaldusväärsuse vahemik : 23-820 Blast ja selle tulemused: 1. Identities 632/632 ehk kõik nukleotiidid klapivad ja ei ole toimunud mutatsioone. 2. Gaps 0/632 ehk ei ole eemaldatud või juurde lisatud kuskile nukleotiide. 3. Strand Plus/Miinus ehk sisestatud insert on sisenenud vektorisse tagurpidi ja transkripstsiooni suund on vastupäeva. Tegemist on tõepoolest DST geeniga, mis me sisestasime. Kontrollisin ka vektori järjestust ja see klapib 100% pSTBlue-1 kloneerimisvektori järjestusega. Nukleotiidne järjestus: GCGTTACGTATCGGATCCAGAATTCGTGATTTGGATCCTGACATCATTTTGTTAGTGATG GGATGGCCAATCCCTGTGATTACTAATTCACACTGTCGCAGCTGCTGGGCAAACC CCTCATCAACCAGGCCTCTATGCAAAGCTTCGGCCACCCGGTACTTTTTGCCAGT AAGAGGATCAATTATGCCCCCTGTACTGACTTGGGCTTCAAGGCATCGGAGGGC AGTAATCCGATCAACCAAATTTCTACGGGAGGCTTTTAGTACAGAGATCCTTTCC CCACTAGCAGTCAGCCAATACCCTGCAACAGGACTGTGCAAATCTTTCTTGGGGA CTAACCGGCTCAGCAAAGAATCAGCAAGTTCTGTAAGTGTGATGAGGCCTTCCTG ATACTTTTTGACCAAGGCTTTGTCAATTGTTCCCTGCTCTATAGCCTCATTAATATT