* geeniekspressiooni kvantiteerimine * DNA kahjustuste mõõtmine * proovide valideerimine * genotüpiseerimine (geenikaardi loomine). Lisatakse fluorestseeruvat värvainet (SYBR Green). Termotsükleril on fotodetektorid fluorestsentsi mõõtmiseks. Seatakse fluorestsentsi intensiivsuse lävi ülevalpool baasfluorestsentsi (nii et mõõtmine toimuks eksponentsiaalses faasis). Ct on lävetsükkel – tsükli number, mitu korda fluorestsents on ületanud seatud läve. Fluorestsentssignaali jälgitakse reaktsiooni kestel ja intensiivsus vastab moodustunud PCR produkti hulga, mida mõõdetakse pärast igat tsüklit. Faasid: 1. eksponentsiaalne (produkt kahekordistub igas tsüklis) - mõõdab RT PCR. 2. lineaarne (reaktsiooni komponendid vähenevad, reaktsioon aeglustub). 3. platoo (reaktsioon on lõppenud, enam produkte ei tehta). Siit mõõdab PCR. 9. Mille poolest PCR erineb RT-PCR-st? * Andmete mõõtmiskoht - PCR on mõõdetud lõpp-punktist (platoo)
Automaatsete immunoanalüsaatorite analüütiline tundlikkus ja täpsus on sarnased RIA-le, mistõttu on ta RIA-l baseeruvaid teste asendanud. Automatiseeritud immunoanalüsaatorites kasutatakse kõrge tundlikkusega mitteradioaktiivseid detekteerimissüsteeme nagu aeg-lahutatud fluorestsents (time-resolved fluorescence), võimendatud kemoluminestsents (ECL), FEIA- FluoroEnzymeImmunoAssay. Aeg-lahutatud fluorestsentsmeetodil kasutatakse märgiseks lantanoidi aatomi. Fluorestsentssignaali mõõtmine toimub aeg-lahutatult, st ergastamise ja signaali mõõtmise vahel on paus. See on vajalik selleks, et vaibuksid seerumjääkide (NADH, proteiinid, bilirubiin) autofluorestsents, väheneb taustfluorestsents. Võimalik on mõõta ka väga nõrka signaali. Signaali võimendamine toimub võimendava lahusega, mille toimel lantanoidmärgis dissotsieerub antikeha küljest ning tema ümber tekib mitsell. Sel viisil võimendub fluorestsents ca 105 korda. Võimaldab
annaabi.ee 
