DNA - analüüsid (0)

Meeldetuletuseks..
· DNA ehk desoksüribonukleiinhape
· On enamikus elusorganismides
pärilikku informatsiooni säilitav aine
· Keemiliselt desoksüriboosist,
lämmastikalustest ja
fosforhappejääkidest koosnev
polümeer
· Harilikult koosneb adeniinist (A),
guaniinist (G), tsütosiinist (C) ja
tümiinist (T).
DNA-analüüse kasutatakse
· Isikute identifitseerimiseks
· Bioloogilise põlvnemise tuvastamiseks,
peamiselt isaduse määramiseks
· Kurjategijate paljastamiseks
· Meditsiinis geneetiliste haiguste
diagnoosimiseks
DNA-analüüs polümeraasi (PCR)
ahelreaktsiooni meetodil
· Tänapäeva molekulaarbioloogia üks
põhimeetoditest
· Meetodi aluseks on DNA-s olevad STR
järjestused
· Leiab rakendamist fundamentaaluuringutes,
kliinilises ­ ja ka kohtupraktikas
· Võimaldab mõne tunniga tekitada miljoneid
koopiaid DNA järjestusi
PCRi etapid
· DNA denaturatsioon - kaksikheeliks
laguneb kaheks üksikahelaks
· Annealing e. praimerite seostumine
DNA-le
· DNA fragmendi süntees termostabiilse
DNA polümeraasiga
PCR-i eelised
· Lihtne ja kiire kasutada
· Väga tundlik meetod
· DNA puhtus pole väga oluline
· Võimalik kasutada algmaterjalina väga
erinevaid asju ja aineid
PCR-i puudused
· Vajadus eelnevalt teada DNA
järjestust,mille alusel sünteesida praimerid
· PCR-i fragmendid jäävad suhteliselt
lühikeseks
· DNA replikatsiooni käigus võivad tekkida
vead
Isaduse tuvastamine
· DNA analüüs on kättesaadav igaühele, kuid kulukas
· Testimiseks võetakse koha peal süljeproov suust
vatitampoonile
· Isadustesti lõppjäreldus võib olla kahesugune:
bioloogilise isaduse välistus ja bioloogilise isaduse
kinnitus
· Bioloogilise isaduse kinnituse puhul on mehel ja
lapsel kõikides lookustes vähemalt üks ühine alleel
Kurjategijate tuvastamine
· Kriminaaljuhtumite korral on analüüs aeganõudvam
· Sündmuspaigalt leitud DNA-d võrreldakse kahtlusaluse
DNA-ga
· Võrreldes isadustestidega lisandub ka DNA puhtuse
probleem: on alati oht, et sündmuspaigalt leitud DNA on
reostunud
· Analüüs ei ole siiski 100 protsenti kindel- teatud eksimine
on võimalik
· Tulemuste väljendamisel võetakse aluseks elanikkonna
uuring alleelide sagedusest
Meditsiinis geneetiliste haiguste
diagnoosimine
· On võimalik haigust tekitavaid mutantseid geene
inimorganismist tuvastada
· Aitab otsustada, millist ravi ja hooldust patsient
vajab
· Oluline on sünnieelne diagnostika, kui vanemate
suguvõsas on esinenud geneetilisi haigusi
· Nt tsüstilise fibroosi, sirprakulise aneemia või
Duchenne lihasdüstroofia puhul
Isikute identifitseerimine
· Kasutatakse siis, kui leitakse inimlaip,
kelle isikut on vaja tuvastada
· Siia alla käivad juhtumid, kus on vaja
kindlaks teha inimmaterjali pärinemist
mingilt konkreetselt isikult
· Võrdlusmaterjaliks on kas antud isiku
lähisugulased või DNA isikuga kontakti
omanud esemetelt.
DNA restriktsioonanalüüs: DNA-
sõrmejäljed
DNA-analüüsi edasine areng
· Proovitakse teha kõike veelgi
efektiivsemaks, lihtsamaks ja odavamaks
· Riik peaks analüüse rohkem inimestele
kompenseerima
· Analüüs peaks olema kättesaadavam
erinevates asutustes
· DNA-analüüsist ei tohiks saada vabalt
leviv teenus - kindlad reeglid ja
kokkulepped on hädavajalikud
Ajalugu
· 1952.a ­ leiti kinnitust Hersey ja Chase poolt,
et DNA on pärilikkuse kandja
· 1953.a - avaldasid James Watson ja Francis
Crick DNA kaksikhelikaalse struktuuri.
· 1983.a ­ PCR ahelreaktsiooni leiutamine Kary
Mullise poolt
· 1988.a ­ suudeti eraldada puhas
termostabiilne DNA polümeraas
Kasutatud materjal
· http://www.ebu.ee/doc/DNA_analuus.pdf
· http://et.wikipedia.org/wiki/Desoks%C3%BCribonukleiinhape
· http://www.ebc.ee/loengud/maia_gen/sissejuhatus.htm
· http://arhiiv2.postimees.ee:8080/leht/98/01/25/teadus.htm#teine
· http://www.ebc.ee/BIOTECHNOLOGY/Antsu_loengud/Loeng4_
2007.pdf
· http://www.horisont.ee/node/205
· M. Viikmaa, U.Tartes, Bioloogia Gümnaasiumile II osa 3.
kursus