Prae, kuni kala on kergelt läbikumav ja keskelt veel niiske (4-8 minutit). ¤ Wokis küpsetamine: Lõika haifileed või-lõigud parajateks tükkideks. Veereta maisitärklises Ning prae kiiresti kuumas OLIS pidevalt segades. Seejärel lisa wokitud aedviljadele. ¤ Hautamine: Kuumuta hautamisvedelik (vesi, puljong, ürdid ja vürtsid) tasase keemiseni. Libista hailiha puljongisse, kata pott kaanega Ning Haud umbes 8 minutit 2,5 cm kalalõigu kohta. ¤ Aurutamine: Pane hailiha võitatud augulisele pannile Ning tõsta vt 2.5-5 cm kõrgusele keeva vee kohale. Kata pann kaanega Ning küpseta 8-10 minutit 2,5 cm kalalõigu kohta. TOITEVÄÄRTUS 100 g toore hailiha kohta: Energiat 130 kalorit Valku 21 g Süsivesikuid 0 g Rasva 4,5 g Kiudaineid 0 g Sisaldab ohtralt seleeni (36,5 mcg), samuti magneesiumi (49 mg), B12 Vitamiini (1,5 mcg) ja niatsiini (2,9 mg).
ja inkubeerida 10-15 minutit toatemperatuuril. Selles etapis tekivad DNA ja transfektsioonireagendi PEI kompleksid, lahus muutub häguseks. 4. Tõsta katteklaasid steriilsete pintsettide abil 24-augulise plaadi kahte auku. 5. Pipeteerida transfektsioonisegud klaasidele. Aja kokkuhoiu mõttes jätsime meie ära tsentrifuugimise ning pipeteerisime transfektsioonisegu kohe klaasile ning alles seejärel inkubeerisime 15 minutit. Rakkude külvamine 24-augulisele plaadile 6. Rakkude vaatlemine mikroskoobis. Rakkude tihedus umbes 100% 7. Rakkudelt imeda vaakumiga sööde, pesta 1 ml PBSiga , PBS ära imeda. 8. Lisada trüpsiin-EDTA lahust 0,2 ml, inkubeerida mitte rohkem kui 5min. 9. Lisada 1ml söödet (DMEM + 10% FBS NB! antibiootikumideta), suspendeeri rakud 1ml automaatpipetiga tassi küljest lahti. 10. Teha söötmega sobiv lahjendus, et rakkude lõpptihedus 24-augulisel plaadil oleks 33,3%. Arvestada 0,5 ml rakususpensiooni augu kohta
Pipeteerisin transfektsioonisegud klaasidele. Rakkudelt imesin vaakumiga sööde ja pestsin 1 ml PBSiga. Lisasin 0,2 ml trüpsiin- EDTA lahust, inkubeerisin 5 min. Lisasin 1 ml DMEM + 10% FBS, seekord ilma antibiootikumideta, et vältida antibiootikumi reaktsiooni teiste komponentidega ja kõrvaldada nende toksilisuse riski, suspendeerisin rakud automaatpipetiga tassi küljest lahti. Rakkude külvamine 24-augulisele plaadile Valmistasin söötmega sobiv lahjendus, et rakkude lõpptihedus 24-augulisel plaadil oleks 30%. Minu rakkude algne tihedus on 90%, seega: • tiheduse suhe: 90%/30% = 3x • pindalate suhe (6cm plaat vs 24 auguline plaat): 21cm2/1,9cm2 = 11,05x • lahjendus: 3 ∙ 11,05 = 33,15x • 1200 μl / 33,15 x = 36,20 μl rakke 1 welli kohta võtame 500 μl, seega kohta welli kohta (+10%) 2 ∙ 500μl ∙
annaabi.ee 
