transferase (TdT) lisab deoxynucleotide (dUTP) kette 3’OH lõppudesse DNA fragmentides. DNA fragmentide suur arv tekitab apoptootilistes rakkudes fluorestseeruvad punktikesed. Elus rakke eristatakse varajases ja hilises apoptoosis olevatest rakkudest nii, et värvitakse proov DAPi ja FISCiga. Pannakse läbivoolu tsütomeetrisse – graafikul neli populatsiooni . x teljel Dapi aktiivsus, y teljel FISC aktiivsus. Populatsioon, mis on mõlema fluorokroomi suhtes inaktiivne (all vasakul) on terve rakk.
mida on küll vaja, aga mis muutuvad kahjulikuks või mittefunktsionaalseks. Apoptoosil on kaks varianti (rohkem uuritud) sisemine (intrinsic - otsus surra tuleb raku seest, mitokondrid asjaga seotud) ja välimine (extrinsic - rakusurm aktiveeritakse rakupinnal teiste rakkude poolt) 6. Mis on kaspaasi funktsioon ja mis juhtub pro-kaspaasi aktiveerumisel? Kaspaas: tsüsteinüül aspartaat-spetsiifilised proteaasid, mis aktiveeritakse ainult apoptootilistes rakkudes. Aktiivtsentris on kriitiline tsüsteiini jääk konserveerunud pentapeptiidis (QACXG), lõikab substraati aspartaadi järel peaaegu absoluutse spetsiifilisusega. Apoptoos on pöördumatu, kui kaspaase on aktiveeritud üle kriitilise taseme. Kaspaaside blokeerimine peatab apoptoosi. Inimesel on 11 kaspaasi, osad osalevad põletikes, mõned alustajad, mõned teostajad. Kaspaasi aktiveerimiseks tuleb esmalt pro-kaspaas katki lõigata esimeste aktiveerimiseks kogutakse need hästi