6. Saime elektroforeesi tulemust : Lahtrites vasakust paremale : 1. Marker 2. BSA (Mw = 66,5 kDA) 3. Trypsin (Mw =23,8 kDA) 4. Lactate dehüdrogenase ( Mw = 35 kDA) 5. Tundmatu 6. Albumin (Ovalbumin) (Mw = 44,3 kDa) 7. Proteinase K ( Mw = 28,5 kDa) Migreerumistee Mw Valk pikkus (cm) (kDA) BSA 2.9 66.5 Albumine 4.6 44.3 Lactate dehydrogenase 5.2 35 Proteinase K 5.7 28.5 Trypsin 6.5 23.8 Tundmatu 6.2 ? Geeli pikkus (cm) 7.4 Kalibreerimisgraafik : Y=Mw X=migreerimispikkus Y= -12.351*6.2 + 101.13 = 24.55 Vastus: meie valgu kontsentratsioon on 24.6 kDa
Seejärel koostatakse kaliibrimiskõver valgustandardi lahjendusrea absorptsiooni tulemuste põhjal. Saadud kaliibrimiskõvera kaudu saab määrata uuritava valgu kontsentratsiooni. Standardvalk. Standardvalguks sobib mingi odav valk, millest on võimalik võtta täpne kaalutis ning teha kindla kontsentratsiooniga lahus. Siiski standardvalgu valik mõjutab oluliselt katse tulemust. Originaaltöös kasutati valgustandardiks BSA-d (bovine serum albumine), mis on jäänud laialdaselt kasutusse. Siiski on täheldatud, et BSA annab tugevama värvimuutuse, kui enamik valke, mistõttu võivad BSA abil määratud valgu kontsentratsioonid olla kõrgemad tegelikust. Tihti kasutatakse valgu standardiks ka immunoglobulin G-d (IgG). Mõõtepiirkond: Bradfordi meetodil on võimalik määrata valgu kontsentratsiooni vahemikus 100-1,500 µg/ml Bradfordi mikromeetodil on võimalik määrata valgu kontsentratsiooni 1-25 µg/ml. Segavad reagendid.
annaabi.ee 
