Lahuse kontsentratsioon kontrollitakse tiitrimisel. Tiitrimiseks 10 ml lahust pipeteeritakse koonilisse kolbi ja tiitritakse 1n HCl lahusega metüüloranzi juuresolekul. Lubja koguseks võetakse 47,25g . 1 liitrise mahuga koonilisse kolbi valatakse 500 ml sooda lahust, paigutatakse elektripliidi peale ja kuumutatakse temperatuurini 50-90 C, umbes 30min ja segatakse vahepeal. Lahusele lisatakse väikeste portsjonitega peenestatud lupja 5% liiaga. Katse lõppedes jäätakse lahus seisma umbes 5minutiks, et sade põhja vajuks. Seejärel võetakse süstlaga proov 20ml ja filtritakse kahte katseklaas, ning seejärel tiitritakse HCl juuresolekul ainult NaOH-d fenoolftaleiiniga (lahus muutub läbipaistvast valgeks) ning NaOH ja jääki metüüloranzi (lahus muutub punasest oranziks) juuresolekul ja saadakse vajalikud kontsentratsioonid. Arvutused: Algandmed: CaO+ H2O= Ca(OH)2 Na2CO3 =85g H2O= 415g CaO= 47,25g Katse tulemused: C NaOH =33,5 C NaOH+Na2CO3=33,8 C NaOH K kaust =
1.2.5 Barfoed' reaktsioon Monosahhariide oligosahhariididest eristamine on võimalik Barfoed' reaktiiviga, kuna nõrgas happelises keskkonnas taandavad vaske üksnes monosahhariidid ning tulemusena sadestub punane Cu2O. RCOH + 2Cu+2 + 2H2O RCOOH + Cu2O + 4H+ Töö käik · Valan ühte katseklaasi fruktoosi · Teise katseklaasi lisan laktoosi · Lisan mõlemasse katseklaasi 3ml Barfoed' reaktiivi · Segan ja panen kuumale veevannile 5minutiks Fruktoosi lahuses sadestub kuumutades vask(I)oskiid kiirelt punasena, kuna tegu on monosahhariidiga. Laktoosi lahus jääb läbipaistvaks, kuna tegu on oligosahhariidiga, mis vaske ei taanda. Pikaajalisel kuumutamisel muutus ka laktoosi lahus õrnalt roosaks, sest oligosahhariid on kuumutamise käigus hüdrolüüsunud galaktoosiks ja glükoosiks, mis on monoosid ja taandavad vaske. 1.2.6 Selivanoff'i reakstsioon
ampitsilliin laguneb kuumuse käes ära) ja lisame sinna X-gal, IPTG ja ampitsilliini. Loksutame segamini ja valame söötme õhukeste kihtidena Petri tassidele. Teeme transformatsioonisegule kuumašokki 50sekundit 42 kraadi juures. Meetod seisneb selles, et CaCl2 tõttu DNA tõmbus rakumembraanide ligi. Ja nüüd kui paneme oma segu sooja, siis membraanikahjustuse tagajärjel DNA migreerub raku sisse. Tõstame tuubi 5minutiks jääle jahutma Järgneb elustamisefaas. Selleks lisame 500 µl vedelat LB söödet ja inkubeerime 30 minutit 37 kraadi juures. Tsentrifuugime bakterid põhja Eemaldame sööte bakterite pealt Suspendeerin, et tekiks ühtlane lahus Kannan bakterisegu Petri tassile. Kallan klaasterad tassile ja loksutan et bakterid laiali kanduksid. Asetame tassid 37 kraadi juurde kasvama . Mida ja miks me transformeerime
annaabi.ee 
