· 5x Bradfordi reagendi varulahus (0,01% (w/v) CBBG, 4,75% (v/v) etanool, 8,5 % (v/v) fosforhape) Iga väikse grupi peale: · 200 µl 1 mg/ml BSA lahus · 200 µl 5M NaOH · mQ vesi · 100 µl uuritav valgulahus proov nr Töö käik 1. Bradfordi reagent: Lahusta 100 mg Coomassie Brilliant Blue G-250 50 ml 95% ethanoolis, lisa 100 ml 85% (w/v) fosforhapet. Kui reagent on täielikult lahustunud, lahjenda 1 liitrini ja filtreeri lahus läbi Whatman #1 paberfiltri. Reagent peab olema värvuselt pruun. Korduv filtreerimine aitab eemaldada sinist komponenti. Külmas säilitatuna on reagent väga stabiilne (1 aasta). 2. 1 M NaOH lahus, kasutatakse juhul, kui valk pole lahustuv värvaine lahuses. 3. Tee standardvalgu (BSA) lahjenduste rida: 1 mg/ml 0,5 mg/ml 0,2 mg/ml 0,1 mg/ml 0,05 mg/ml 4. Terve grupi peale on antud 5x Bradfordi reagendi stock. Lahjenda see 25 ml-s, et oleks 1x stock
filterpaber, aga Tähistused: ja nitraadist Tähistus: PTFE Tähistus: PP on teh-tud Nylaflo (Gelman), memb- peenest Nylon raanfiltrid klaaskiust. Tähistused: GN Tähistused: GF, Metricel GMF (Gelman), WCA, (Whatman) WCN (Whatman) Omadused Väga inertne Eelised: Eelised: Annavad Eelised: Eelised:Keemiliselt materjal Suhteliselt võrreldes Üliinertne, väga püsiv, aga Hüdrofiilne (ei inertne, kõlbab paberiga väga kõlbab tugevate odavam kui PTFE