"wellides" - 1 õppematerjal

Molekulaar- ja rakubioloogia

• 1200 μl / 33,15 x = 36,20 μl rakke 1 welli kohta võtame 500 μl, seega kohta welli kohta (+10%) 2 ∙ 500μl ∙ 110%=1100 μl rakususpensiooni. • 1100 μl – 2,2 ∙ 33,15 μl = 1100 μl – 72,93 μl (rakud) = 1027,10 μl (sööde)  Pipeteerisin rakususpensioon klaasidel olevatele transfektsioonisegudele, loksutasin. Panin rakud CO2 inkubaatorisse 37°C, 5% CO2. Teine päev – mikroskoopia Mõlemates wellides suspensioon oli punase värvi, seega pH on rakkudele paras, seega saastus ei olnud, vaatamata sellele, et antibiootikum pole olnud lisatud. Saab järjledada, et aseptika oli jälgitud. Selleks, et teha kindlaks, et meie plasmiid on raku sees on vaja kasutada Fluorestsentsmikroskoobi. Fluorestsents - aine omadus emiteerida valgust pärast ergastamist kindla lainepikkusega kiirgisega.Kui vaatlesime mikroskoobi all mõlemaid proovi, siis nägime rakke kujuga, mis on iseloomustav NIH3T3 rakkudele