Molekulaar- ja rakubioloogia praktikum
= x/1 ehk x=0,1
Vesi- 10-5-1-0,1 = 3,9 µl
DNA värv: 10 / 5 = 2.
Töö käik:
Pipeteerime kokku DNA, MQ, restriktaari ja puhvri. Inkubeerime 37 kraadi
juures 30 minutit.
Valame agaroosgeeli (meie töö puhul oli see enne juba valmis)
Peale 30 minutit tsentrifuugin oma kontroll- restriktsiooni, et koguda kokku
kaanelt ja seintelst veeaur.
Lisame 2 µl 6X DNA värvi ja pipeteerime kogu segu agaroosgeeli
hambasse.
Voolutame 150V juures 10-15 minutit. Teeme geelist pildi.
13
Minu rada: 5
Milleks teostatakse kontroll-restriktsioon?
Et kontrollida, kas eraldatud plasmiid on õige
Millise tulemuse sain kontroll-restriktsioonist?
Minu tulemus on väga ilus, eraldatud plasmiid tuli õige.
Mille järgi valisime sobiva restriktaasi? Veel sobivaid restriktaase.
Valisime EcoRI restriktaasi, kuna meie insert sisenes pSTBlue-1 vektorisse EcoRV
saiti